胃蛋白酶原和再生基因Ⅳ在胃癌诊断中的价值研究

吴文华，黄容旺

(东莞市第八人民医院a.北院区内科,b.内二科,广东 东莞 523325)



胃蛋白酶原和再生基因Ⅳ在胃癌诊断中的价值研究

吴文华a，黄容旺b※

(东莞市第八人民医院a.北院区内科,b.内二科,广东 东莞 523325)

摘要：目的探讨胃蛋白酶原(PG)、再生基因Ⅳ(Reg Ⅳ)诊断胃癌的研究。方法选取2010年2月至2014年6月在东莞市石龙博爱医院住院部、门诊及社区行胃镜检查的胃部病变患者648例，其中胃癌54例(胃癌组)、胃溃疡594例(胃溃疡组)，另选择同期收治的慢性胃炎患者352例为慢性胃炎组。检测受试者血清PG、Reg Ⅳ、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)水平。比较不同指标联合诊断胃癌的效能。结果胃癌组PG Ⅰ、PG Ⅱ、PG Ⅰ/PG Ⅱ值均显著低于胃溃疡组和慢性胃炎组[PG Ⅰ(42±3) μg/L比(78±6) μg/L、(61±6) μg/L，PG Ⅱ(8±3) μg/L比(15±4) μg/L、(12±3) μg/L，PG Ⅰ/PG Ⅱ2.8±0.9比9.2±1.2、5.4±1.3，均P<0.01]，胃溃疡组PG Ⅰ、PG Ⅱ、PG Ⅰ/PG Ⅱ值高于慢性胃炎组(P<0.05)；胃癌组Reg Ⅳ、CEA、CA19-9水平均高于胃溃疡组和慢性胃炎组[Reg Ⅳ(5.4±1.3) μg/L比 (4.0±1.2) μg/L、(3.8±1.1) μg/L，CEA (10.2±2.9) μg/L比 (6.1±1.3) μg/L、(4.2±1.0) μg/L，CA19-9 (57±5) kU/L比(35±3) kU/L、(27±3) kU/L，均P<0.05]。PG联合Reg Ⅳ诊断胃癌的灵敏度(83.3%)及特异度(78.1%)均最高(P<0.05)。结论PG联合Reg Ⅳ诊断胃癌时灵敏度、特异度高，且准确可靠，在胃癌筛查中具有重要临床价值。

关键词:胃癌；胃蛋白酶原；再生基因；筛查；诊断

胃癌是我国最常见的消化道肿瘤，病死率居恶性肿瘤之首，我国是胃癌高发地区[1]。目前诊断胃癌的主要方法是纤维胃镜和上消化道造影检查，其中胃镜是确诊胃癌的金标准[2]。由于这两种途径检查方法技术要求高，费用较贵，而且胃镜检测不适感强，不适合儿童和心功能不全的老年人，对亚临床症状患者尚不能作为普查手段[3]。而早期胃癌缺乏特异性症状与体征，一般的消化道症状经对症治疗后能暂时好转，当出现明显的临床症状而来就诊时，往往病情已属中、晚期，使胃癌难以早期发现，失去最佳的治疗时机，影响胃癌的预后。早期诊断、早期治疗成为提高患者生存质量、降低病死率的重要途径。因此，探寻出一种更为理想的检查方法对胃癌的早期诊断具有重要价值。大量研究显示，血清胃蛋白酶原(pepsinogen，PG)、再生基因Ⅳ(regeneration genes-Ⅳ，Reg Ⅳ)对于胃癌的筛查，特别是早期胃癌优势明显[4-7]。本研究通过检测胃癌患者血清PG、Reg Ⅳ水平，旨在探讨PG、Reg Ⅳ在胃癌筛查中的作用。

1资料与方法

1.1一般资料选取2010年2月至2014年6月在东莞市石龙博爱医院住院部、门诊及社区行胃镜检查的患者648例，根据胃镜检查结果将以上患者分为胃癌54例，年龄23~75岁，平均(39.0±2.1)岁，男32例、女22例；胃溃疡594例，年龄22~72岁，平均(41.0±2.0)岁，男304例、女290例；另选择同期在石龙博爱医院门诊及社区体检的慢性胃炎患者352例为慢性胃炎组，年龄21~79岁，平均(40.0±1.9)岁，男172例、女180例。胃癌组、胃溃疡组、慢性胃炎组在性别、年龄方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2纳入与排除标准

1.2.1纳入标准年龄满18周岁；符合相关疾病的诊断标准[7]；无其他组织或器官的恶性肿瘤；无严重肝肾疾病；患者知情同意并签署协议书。

1.2.2排除标准有严重精神疾病者；其他消化道恶性肿瘤；有酒精、药物滥用史；依从性差。

1.3方法

1.3.1标本采集于清晨空腹状态下抽取受试者外周静脉血4 mL，以离心半径13.5 cm，3500 r/min离心10 min，取上清液-80 ℃冰箱保存待测。

1.3.2指标检测应用东芝TBA-120FR全自动生化分析仪(日本)，使用时间分辨荧光分析法检测PG Ⅰ、PGⅡ并计算PG Ⅰ/PG Ⅱ，应用酶联免疫吸附试验检测Reg Ⅳ；定量检测所用仪器系 BIO-RAD公司(中国上海) i-Cycler 荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)仪，试剂盒选自深圳匹基生物公司。上述指标的检测严格按照试剂盒说明书操作。应用罗氏电化学发光法，使用原装试剂检测癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原19-9 (carbohydrate antigen 19-9，CA19-9)。PG Ⅰ联合PG Ⅰ/PG Ⅱ检测：PGⅠ<70 μg/L，同时PGⅠ/PGⅡ<3诊断为阳性。PG联合Reg Ⅳ检测：PGⅠ/PGⅡ<3，同时Reg Ⅳ>4.21 μg/L诊断为阳性。CEA联合CA19-9检测：CEA>5 μg/L，同时CA19-9>35 kU/L诊断为阳性。

2结果

2.1胃癌组、胃溃疡组、慢性胃炎组不同指标检测结果胃癌组PG Ⅰ、PG Ⅱ、PG Ⅰ/PG Ⅱ值低于胃溃疡组和慢性胃炎组(P<0.05)，胃溃疡组PG Ⅰ、PG Ⅱ、PG Ⅰ/PG Ⅱ值高于慢性胃炎组(P<0.05)；胃癌组Reg Ⅳ、CEA、CA19-9水平均高于胃溃疡组和慢性胃炎组(P<0.05)。见表1。

表1　三组行胃镜检查者不同指标检测结果比较　±s)

PG：胃蛋白酶原；Reg Ⅳ：再生基因 Ⅳ； CEA：癌胚抗原；CA19-9：糖类抗原19-9；a与慢性胃炎组比较，P<0.05；b与胃溃疡组比较，P<0.05

2.2不同指标联合诊断胃癌的诊断效能比较以病理组织学检测结果为诊断胃癌标准，绘制各指标下的ROC曲线，显示PGⅠ 最佳临界值为70 μg/L，PG Ⅰ/PG Ⅱ最佳临界值为3.0；不同指标联合诊断胃癌的灵敏度、特异度见表2， 其中PG联合Reg Ⅳ诊断胃癌的灵敏度(83.3%)及特异度(78.1%)均最高，见表2、3，图1。

表2　不同指标诊断胃癌的诊断效能比较　(%)

PG：胃蛋白酶原；Reg Ⅳ：再生基因 Ⅳ；CEA：癌胚抗原；CA19-9：糖类抗原19-9

表3　PG Ⅰ联合PG Ⅰ/PG Ⅱ、PG联合Reg Ⅳ、CEA联合CA19-9的检测结果　(例)

PG：胃蛋白酶原；Reg Ⅳ：再生基因 Ⅳ；CEA：癌胚抗原；CA19-9：糖类抗原19-9

PG：胃蛋白酶原；Reg Ⅳ：再生基因 Ⅳ； CEA：癌胚抗原；CA19-9：糖类抗原19-9；ROC：受试者工作特征

图1PG Ⅰ联合PG Ⅰ/PG Ⅱ检测、PG联合Reg Ⅳ

检测、CEA联合CA19-9检测的ROC曲线

3讨论

寻找一种具有简便、快速、重复性好、非介入性、便于动态监测等优点的检查方法是胃癌诊断方面的一个全新的研究发展方向[8]。目前，肿瘤标志物的研究与应用在肿瘤学中已成为一个引人注目的新领域[9]，血清PG、Reg Ⅳ在早期胃癌筛查方面具有诸多优势[10]，本课题联合PG、Reg Ⅳ筛查胃癌的研究，旨在为临床提供一种实用、灵敏、准确、简单、廉价的胃癌筛查方法，降低医疗费用，提高胃癌检出率。

近年来胃癌的发病率呈上升趋势,早期发现胃癌作为胃癌早期治疗的重要基础具有重要临床意义[11-15]。PG是一种门冬氨酸蛋白酶前体，是相对分子质量为 42 000 的单链多肽，血清 PG Ⅰ和 PG Ⅱ反映了胃黏膜腺体和细胞的数量，也间接反映了胃黏膜不同部位的分泌功能[16]。当肠上皮化生、不典型增生和胃癌时，PG Ⅰ分泌会减少，PG Ⅰ/PG Ⅱ也会发生变化，血清 PG 可作为监测胃癌的一个可靠的标志物[17]。Reg属于钙依赖性凝集素超家族，Reg家族可分为 4 个亚型(Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ)，在人类至今发现3个亚型(RegⅠ，RegⅢ，RegⅣ)[18-19]。研究显示，胃癌RegⅣ可呈阳性表达，并与小肠黏蛋白表型和神经内分泌分化有关，RegⅣ的表达与临床特征，如肿瘤分期、患者预后等未显示明显相关性[5-8]。定量反转录PCR分析显示 RegⅣ 在 30.4%的胃癌中呈高水平表达。

本研究通过采用东芝120生化分析仪检测受试者血清PG Ⅰ、PG Ⅱ水平，酶联免疫吸附试验检测Reg Ⅳ，同时检测 CEA、CA19-9 作为对照， 结果显示，胃癌组患者PG Ⅰ、PG Ⅱ及Reg Ⅳ血清水平与胃溃疡组、慢性胃炎组比较差异有统计学意义，说明上述指标用于胃癌的早期筛查具有良好的区分度，与既往研究[5-8]相符。本研究对不同指标联合诊断胃癌的效能进行比较，结果显示， PG联合Reg Ⅳ诊断胃癌具有更高的灵敏度、特异度及准确度，与相关研究[5-8]一致。

综上所述，PG联合Reg Ⅳ诊断胃癌具有灵敏度、特异度高等优势，且准确可靠，在胃癌筛查中具有重要临床价值。

参考文献

[1]Yan LH,Wei WY,Xie YB,etal.New insights into the functions and localization of the homeotic gene CDX2 in gastric cancer[J].World J Gastroenterol,2014,20(14):3960-3966.

[2]Tanaka T,Arai M,Minemura S,etal.Expression level of sonic hedgehog correlated with the speed of gastric mucosa regeneration in artificial gastric ulcers[J].J Gastroenterol Hepatol,2014,29(4):736-741.

[3]曹雪源,贾志芳,马洪喜,等.血清抗幽门螺杆菌IgG抗体、胃蛋白酶原水平与胃癌发病的相关性分析[J].中国实验诊断学,2012,16(6):1026-1028.

[4]桂继琮,刘兴党,陆云，等.体格检查人群幽门螺杆菌感染与血清胃蛋白酶原的关系[J].中华核医学与分子影像杂志,2014,34(1):57-58.

[5]Hu L,Luo H,Wang W,etal.Poor prognosis of phosphatase of regenerating liver 3 expression in gastric cancer:a meta-analysis[J].PLoS One,2013,8(10):e76927.

[6]Zhou W,Sun M,Wang DL,etal.Silencing of RegIV by shRNA causes the loss of stemness properties of cancer stem cells in MKN45 gastric cancer cells[J].Oncol Rep,2013,30(6):2685-2690.

[7]Sun ZH,Bu P.Downregulation of phosphatase of regenerating liver-3 is involved in the inhibition of proliferation and apoptosis induced by emodin in the SGC-7901 human gastric carcinoma cell line[J].Exp Ther Med,2012,3(6):1077-1081.

[8]Ying LS,Yu JL,Lu XX,etal.Enhanced RegⅣ expression predicts the intrinsic 5-fluorouracil (5-FU) resistance in advanced gastric cancer[J].Dig Dis Sci，2013，58(2):414-422.

[9]郑奎城,林曙光,李晓庆,等.血清PG和G-17及幽门螺杆菌抗体表达与胃癌发病率相关性分析[J].中华肿瘤防治杂志,2012,19(1):24-27.

[10]吕艳丽,李毅,刘光顺,等.胃癌高发区血清胃蛋白酶原初筛加高危人群胃镜检查方案与直接胃镜筛查方案的效果比较[J].中华肿瘤杂志,2013,35(5):394-397.

[11]黄语嫣,陈卫昌,高楠,等.血清胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ在胃癌及癌前病变诊断中的价值[J].中华内科杂志,2013,52(4):332-333.

[12]杨莉,孙明军,徐倩,等.血清胃蛋白酶原、促胃液素-17在慢性胃窦部萎缩性胃炎诊断中的价值[J].中华消化杂志,2014,34(7):478-480.

[13]杨俊,厉朝喜,戴一扬,等.三叶因子1蛋白与血清胃蛋白酶原在胃溃疡中的表达及其意义[J].中华医学杂志,2012,92(22):1540-1543.

[14]Takamura A,Ito M,Boda T,etal.High expression of gastrin receptor protein in injured mucosa of Helicobacter pylori-positive gastritis[J].Dig Dis Sci,2013,58(3):634-640.

[15]Hong H,Kim EH,Lee HJ,etal.Molecular mechanisms elucidating why old stomach is more vulnerable to indomethacin-induced damage than young stomach[J].Dig Dis Sci,2013,58(1):61-71.

[16]黄容旺,范文伟,李国斌,等.血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验对胃癌早期诊断的应用价值[J].重庆医学,2014,43(14):1755-1757.

[17]Cao Y,Tu Y,Mei J,etal.RNAi mediated knockdown of PRL 3 inhibits cell invasion and downregulates ERK 1/2 expression in the human gastric cancer cell line,SGC-7901[J].Mol Med Rep,2013,7(6):1805-1811.

[18]O′Hara A,Howarth A,Varro A,etal.The role of proteasome beta subunits in gastrin-mediated transcription of plasminogen activator inhibitor-2 and regenerating protein1[J].PLoS One,2013,8(3):e59913.

[19]Sekikawa A,Fukui H,Zhang X,etal.REG Iα is a biomarker for predicting response to chemotherapy with S-1 plus cisplatin in patients with unresectable stage Ⅳ gastric cancer[J].Br J Cancer,2013,108(2):395-401.

Study on the Value of Pepsinogen and Regeneration Gene Ⅳ in the Diagnosis of Gastric Cancer

WUWen-huaa,HUANGRong-wangb.

(a.DepartmentofInternalMedicineofNorthWard,b.SecondDepartmentofInternalMedicine,DongguanEighthPeople′sHospital,Dongguan523325,China)

Abstract：ObjectiveTo study the value of pepsinogen(PG),regeneration gene Ⅳ(Reg Ⅳ) in the diagnosis of gastric cancer.MethodsA total of 648 patients with gastric lesions underwent gastroscopy examination in inpatient and outpatient department of Shilong Fraternity Hospital and community from Feb.2010 to Jun.2014 were selected as research objects,including 54 patients with gastric cancer(group A),594 patients with gastric ulcer (group B),and another 352 patients with chronic gastritis admitted in the same period were selected as group C.Serum levels of PG,RegⅣ,carcinoembryonic antigen (CEA),and carbohydrate antigen 19-9 (CA19-9) were detected.Efficiencies of different markers in the diagnosis of gastric cancer were compared.ResultsValues of PG Ⅰ，PG Ⅱ，PG Ⅰ/PG Ⅱ of group A were significantly lower than those of group B and group C[PG Ⅰ(42±3)μg/L vs (78±6) μg/L,(61±6) μg/L，PG Ⅱ(8±2) μg/L vs (15±4) μg/L,(12±3) μg/L，PG Ⅰ/PG Ⅱ2.8±0.9 vs 9.2±1.2,5.4±1.3，all P<0.01]，values of PG Ⅰ,PG Ⅱ,PG Ⅰ/PG Ⅱ of group B were higher than group C;levels of Reg Ⅳ,CEA,CA19-9 of group A were higher than group B and group C[Reg Ⅳ(5.4±1.3) μg/L vs (4.0±1.2) μg/L,(3.8±1.1) μg/L， CEA (10.2±2.9) μg/L vs (6.1±1.3) μg/L,(4.2±1.0) μg/L，CA19-9 (57±5) kU/L vs (35±3) kU/L,(27±3) kU/L，all P<0.01].The sensitivity(83.3%)and specificity (78.1%) of PG combined with Reg Ⅳ in the diagnosis of gastric carcinoma were the highest(P<0.05).ConclusionPG combined with Reg Ⅳ in the diagnosis of gastric carcinoma has high sensitivity and specificity,it is accurate and reliable,and has important clinical value in screening the gastric cancer.

Key words：Gastric cancer; Pepsinogen; Regenevsn gene; Screening; Diagnosis

收稿日期：2014-10-17修回日期：2015-01-23编辑：相丹峰

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.07.057

中图分类号：R735

文献标识码：A

文章编号：1006-2084(2015)07-1296-03