血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白测定在慢性肾脏病的临床应用价值

血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白测定在慢性肾脏病的临床应用价值

吴亚1，魏宏莲2

(1.河北省中医院 检验科,河北 石家庄050011;2河北医科大学第二医院 检验科，河北 石家庄050000)

近年来，伴有脂质代谢紊乱的糖尿病和代谢综合征的发病率正在逐年上升,由其导致的慢性肾脏病(CKD)的发病率和病死率也在逐年增加，从早期脂代谢紊乱角度寻找CKD发生发展的诊断指标成为目前的研究热点之一。脂肪细胞胞液中含有较多的脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)，它在脂肪酸的摄取、代谢和转运过程中起着非常重要的作用，从基因水平调控脂肪细胞的分化，与体内糖及脂肪代谢密切相关[1]。有报导血清A-FABP水平与肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗和代谢综合征密切相关[2]。目前有关CKD时A-FABP的研究鲜有报道。本研究以患不同类型肾病的患者为对象，通过检测140例CKD(其中原发性肾小球肾炎52例，肾病综合征46例，糖尿病肾病42例)患者的血清A-FABP和非酯化脂肪酸(NEFA)水平，探讨其在CKD发生发展中的意义及临床应用价值。

1资料与方法

1.1研究对象2010年1月-2012年12月河北医科大学第二医院肾内科收治的慢性肾小球肾炎患者52例(CKDⅠ组)，其中男36例，女16例，年龄30-60岁，平均(46.5±13.0)岁；肾病综合征患者46例(CKDⅡ组)，其中男36例，女10例，年龄28-60岁，平均(45.8±13.4)岁；糖尿病肾病组(CKDⅢ组)42例，其中男25例，女17例，年龄36～64岁，平均(49.2±10.3)岁。对照组(Con组)50例，均为同期健康查体者，其中男35例，女15例，年龄30-60岁，平均(45.0±10.3)岁。所有患者均经肾活检确诊，CKDⅠ组、CKDⅡ组、CKDⅢ组和Con组间男女比例和年龄差异无统计学意义，具有可比性。

1.2方法采集空腹静脉血标本后3 500转/min离心10分钟分离血清，-20℃冷冻保存，集中测定。①A-FABP测定：酶联免疫吸附试验(ELISA)法,试剂盒由美国ADL公司提供，应用芬兰Thermo自动洗板机和酶标比色仪进行洗板和吸光度测定。② NEFA测定：铜显色法，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。③血清中其他生化指标测定：在HITACHI7600全自动生化分析仪上测定尿素氮(BUN)，肌酐(SCr)，白蛋白(ALB)、胆固醇(TC) 、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、24小时尿蛋白，试剂由上海科华生物公司提供。

2结果

2.1血生化指标测定CKDⅠ组、CKDⅡ组和CKDⅢ组血清A-FABP(P<0.01)、NEFA(P<0.01))、TG(P<0.01)和24小时尿蛋白(P<0.01)均高于Con组，ALB显著低于Con组(P<0.01)。CKDⅡ组血清TC明显高于其它组，CKDⅢ组血清FBG明显高于其它组，支持临床诊断。各生化指标检测结果见表1。

组别A-FABP(μg/L)NEFA(mmol/L)BUN(mmol/L)SCr(μmol/L)ALB(g/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)FBG(mmol/L)24小时尿蛋白(g)CKDⅠ组8.41±3.53**1.01±0.14**6.55±3.5493.53±32.9636.28±9.17**4.87±1.591.85±1.02**4.56±0.871.64±0.90**CKDⅡ组8.71±4.54**1.01±0.11**6.28±2.9391.31±23.9924.42±5.94**▲▲8.49±2.99**▲▲2.50±1.16**▲4.39±1.014.59±2.74**▲▲CKDⅢ组6.36±1.93**▲1.04±0.07**8.81±1.55**▲▲106.27±20.48*▲36.09±9.06**5.19±1.322.04±1.37**7.85±2.00**▲▲1.52±0.80**Con组3.88±1.510.82±0.265.30±1.1682.21±5.6548.03±2.404.86±0.591.05±0.334.16±0.390.06±0.03F值24.96618.15215.3548.3687.7443.67616.69796.77144.115P值0.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000

注：与Con组相比：*P<0.05,**P<0.01；与CKDⅠ组相比：▲P<0.05,▲▲P<0.01。

2.2相关分析直线相关分析结果显示CKDⅠ组A-FABP和NEFA有相关关系r=0.446(P=0.033)；CKDⅡ组A-FABP和NEFA有相关关系r=0.469(P=0.032)，CKDⅢ组A-FABP和NEFA有相关关系r=0.379(P=0.012)。

3讨论

FABP是一组能结合长链脂肪酸的低分子量胞质蛋白，具有组织分布特异性，分布于哺乳动物的小肠上皮细胞、心肌细胞、脂肪细胞等组织细胞中，以其分布而命名[3]。目前发现的有9种类型。脂肪细胞以及巨噬细胞高表达的A-FABP，在脂肪酸的摄取、胞内转运及代谢调节中发挥着重要作用[1]。A-FABP能与激素敏感性脂肪酶结合成复合物，增强此酶的效率，促进脂解作用[2]。脂肪酸和A-FABP二者密切相关，长链脂肪酸浓度增加时，可结合位于A-FABP基因上游的启动子区域的转录因子过氧化物酶体增生体激活受体(PPAR)的DNA结合区，诱导其下游A-FABP靶基因表达[4]。有研究表明代谢综合征和糖尿病患者血A-FABP水平升高[5,6]。本研究结果显示各型CKD患者的血A-FABP和NEFA水平均升高，分析其原因可能是：①CKD患者体内存在脂质代谢紊乱，血TG增高和(或)血TC增高，血NEFA增高，NEFA可与A-FABP上游基因PPAR结合，诱导A-FABP基因表达；②CKD时，尿蛋白增高，结合了白蛋白的NEFA可促进巨噬细胞浸润、细胞凋亡和皮质细胞增殖，导致肾损伤。Thomas等通过动物试验研究发现，白蛋白-NEFA可吸引巨噬细胞在皮外层浸润，导致严重的肾小管间质损伤[7]；③A-FABP在巨噬细胞中高表达，CKD有巨噬细胞等炎细胞浸润。有研究表明敲除载脂蛋白B基因小鼠中A-FABP缺失的巨噬细胞可明显防止动脉粥样硬化的进展[8]，提示A-FABP参与调控脂质代谢和炎症反应；④慢性肾脏病时血A-FABP和血NEFA显著增高，且二者存在直线相关关系，推测可能在CKD的进展过程中，NEFA和A-FABP二者在基因表达调控方面有一定关系，这有待进一步研究。

与传统CKD诊断指标BUN、SCr相比，血A-FABP和NEFA的灵敏度更高。所以本研究认为CKD患者血A-FABP和NEFA升高，提示血A-FABP和NEFA测定对其诊断有一定的临床应用价值。

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收稿日期：(2014-03-18)

文章编号：1007-4287(2015)04-0619-02