尿液分析仪与显微镜检测尿液WBC和RBC结果的探讨
孙圣明,肖世玉
(常德职业技术学院附属第一医院 检验科,湖南 常德415000)
尿液分析仪是一种半定量分析技术,操作简便、快速、准确、结果可靠,在许多国家已经把它作为常规方法在临床检验中广为应用[1]。但随着自动化尿液分析仪的普及忽视了传统的人工显微镜检查,结果造成漏诊或误诊。传统的尿液显微镜检测是一种物理检测法,素有尿液有性成分检测的“金标准”之称。本文通过比较尿液分析仪与显微镜检测尿液中红细胞和白细胞的结果,就两种方法结果不一致性问题进行分析,对尿液分析仪筛检尿液RBC及WBC正常标准加以探讨,提高尿液检测的准确性,为临床诊治提供更准确的依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1标本随机选取常德职院附属第一医院2013年3月到6月住院部需进行尿常规检查的1000例标本作为研究对象,其中男性标本 408 例,女性标本 592 例。
1.1.2仪器与试剂MT-N600型尿液分析仪(长春瑞克医疗仪器有限公司);CX21BIM-SET5生物显微镜(日本奥林巴斯);低速离心机LC-32(安徽中科中佳,尿沉渣专用);MT-N600尿液分析仪原装配套的试纸条和质控液(长春瑞克医疗仪器有限公司)。
1.2实验方法
1.2.1标本处理接收标本、编号、充分混匀后分为2管,每管10 ml,并于2小时检测完。
1.2.2尿液分析仪检测检测标本前,先用MT-N600配套的质控品进行校准。校准后,取每份标本的其中一管依次用配套的试纸条(均为同一批号)浸入尿液1-2秒,取出试纸条置于吸水纸上将多余的尿液拭去,放入分析仪中,通过仪器检测尿液中的红细胞及白细胞水平。
1.2.3显微镜手工法取另一管标本于离心机以1500转/min进行离心,5分钟后取出标本。倾倒或吸取上清液留取沉淀物0.2 ml,混匀后约取20 μl置于载玻片上,用18 mm×18 mm盖玻片覆盖后显微镜检查。先用低倍镜(10×10)观察全片,在用高倍镜(10×40)仔细观察10视野中,检查尿液中的红细胞及白细胞水平,取其平均值,做好详细的记录。
1.2.4结果判定标准尿液分析仪结果分为-、+/-、+、++、+++/++++五个等级;显微镜检测结果依据红细胞大于3个/HP为阳性,白细胞大于5个/HP为阳性。
1.2.5统计学处理采用SPSS18.0统计软件包,利用卡方检验进行数据分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1尿液分析液与显微镜检测尿液红细胞和白细胞结果见表1、表2。结果显示:尿液分析仪检测白细胞的结果为(-)、(+/-)和(+)时,与显微镜检测的结果差异较大,其不一致率为22.4%、19.2%、18.1%。尿液分析仪检测红细胞的结果为(+/-)和(+)时,与显微镜检测的结果差异较大,其不一致率分别为84.9%、36.2%。
表1 尿液分析仪与显微镜检测WBC的结果比较
表2 尿液分析仪与显微镜检测RBC的结果比较
2.2红、白细胞不同筛选标准与显微镜检测结果比较尿液分析仪检测白细胞和红细胞分别以(+/-)和(+)为正常筛选标准与显微镜检测的结果比较,见表3-6。结果显示:白细胞不管是以尿液分析仪(+/-)还是(+)为正常筛选标准,两方法阳性率差异较大(P>0.01)。红细胞以尿液分析仪(+/-)为正常筛选标准时,两方法阳性率差异较小,无统计学意义(P>0.05);以尿液分析仪(+)为正常筛选标准时,两方法阳性率差异较大(P>0.01)。
表3 白细胞以尿液分析仪(+/-)为正常筛选标准
注:χ2=99.6,P<0.01
表4 白细胞以尿液分析仪(+)为正常筛选标准
注:χ2=276.4,P<0.01
表5 红细胞以尿液分析仪(+/-)为正常筛选标准
注:χ2=3.3,P>0.05
表6 红细胞以尿液分析仪(+)为正常筛选标准
注:χ2=88.9,P<0.01
2.3红细胞不同筛选标准结果比较见表7。结果显示:当红细胞筛选标准为(+/-)时,整体数据较为理想。
表7 红细胞不同筛选标准结果比较
3讨论
传统显微镜镜检与尿液分析仪是基于两种不同原理的检测手段,前者通过显微镜的放大作用,直观、真实地分析呈现于镜下的细胞等有形成分;后者利用尿液中相应的化学成分使尿多联试带上各种含特殊试剂的膜块发生颜色变化,然后在尿液分析仪上进行比色得出结果。因此总体检测结果大致相符的情况下,也可能造成临床上另一些化学分析法与镜检法结果不相符的情况。
尿液分析仪检测白细胞原理是基于中性粒细胞中含有特异性酯酶,能水解试带中的吲哚酚酯分解出吲哚和有机酶,吲哚酚可进一步氧化成靛蓝,或吲哚酚和重氮盐反应生成紫红色缩合物而显色,颜色深浅与中性粒细胞的含量成正比。但尿液白细胞中的其他细胞如单核细胞、淋巴细胞因其不含酯酶均不参加反应。当患者尿液白细胞为淋巴细胞、单核细胞时便无法检出,故造成一定的漏检。当尿液分析仪测白细胞的结果为(-)、(+/-)和(+)时,不如显微镜下看到的多。因而,造成两者的差异较大。加上较高的葡萄糖浓度(160 mmol/L)或高比重可使WBC阳性率降低[2],还有乳糜尿及深棕色、尿蛋白>5 g/L或尿中大剂量先锋霉素I或庆大霉素等时,均产生假阴性结果。镜检的阳性率明显高于尿液分析仪,所以白细胞(+/-)和(+)为筛选标准时,两法测得白细胞阳性有明显差异(P<0.01)。当然,白细胞的影响因素较多,除此之外如上皮细胞、女性患者白带增多、阴道排泄物的污染及甲醛、呋喃坦啶导致白细胞遭到破坏[3],使其特异性酯酶游离于尿中;以及炎症反应造成脓细胞结构不清楚,形态改变无法在显微镜下辨认[4]都会造成干化学实验阳性,镜检为阴性,操作中应注意。
尿液分析仪测红细胞原理是利用游离血红蛋白溶解RBC或肌红蛋白中血红素能催化过氧化氢释放新生态氧,使色原氧化而显色,其颜色深浅与血红蛋白含量有关。尿液分析仪对血红蛋白非常敏感,既可检出完整的红细胞,又可检出游离的红细胞,而镜检只能检出完整的红细胞,所以尿液分析仪检测红细胞为阴性时与镜检一致;部分标本化学法为阳性,但镜检为阴性,如尿液分析仪结果为(+/-)和(+)时。尿液的渗透压、酸碱度、肌红蛋白、某些氧化物和细菌的污染使红细胞被破坏[5,6];肾病患者,红细胞在肾脏或泌尿道破坏或尿比重过低,尿pH值偏高,均易造成红细胞破坏,造成所谓红细胞干化学检测的“假阳性”现象。所以尿液分析仪检测红细胞的阳性率高于显微镜,对于以红细胞(+/-)为尿液红细胞正常筛选标准较理想,也就不难理解。当然,高维生素C(尿液中通常所含的少于1.42 mmol/L维生素C不会影响结果)、高比重、高蛋白会影响尿液分析仪的灵敏度;由于食物或药物所致,尿液pH呈碱性,生成褐色颗粒[5],会导致干化学试纸条失效,造成假阴性,但这些因素的影响较小。
尿液分析仪检测筛选的目的是以不遗漏阳性病人为原则,显微镜检查才是尿液检查的确正试验,才能保证检测结果的真实性和可信性。对于干化学测定法与显微镜镜检所表现出的矛盾加以综合分析,检验医生须结合临床合理解释检测结果,得出正确的检验报告,避免漏诊和误诊,向患者提供准确的、有价值的诊断信息。
当然,本文只是针对本实验室MT-N600型尿液分析仪所得到的结果。不同型号的仪器和试条可能得出的试验结果不尽相同,应注意选择各自的正常筛选标准。
综上所述,本文认为在大批量的尿液检测时,以尿液分析仪测得红细胞弱阳性为正常筛选标准;尿液分析仪测得白细胞阴性为正常筛选标准时,其结果与显微镜镜检结果的差异较小。
参考文献:
[1]Kirsten MJ,Eves LM,Demoiselle PL,et al.Elevation of CSF soluble CD27 levels in patients with meningeal localization of lymphoid malignancies[J].Blood,1996,87(5):1958.
[2]蒋焕平.两种方法检测尿WBCRBC的结果比较[J].航空航天医学杂志,2012.5(23):569.
[3]汤炜.尿干化学检测与镜检白细胞结果对比分析[J].中外医学研究,2012,7,10(20):55.
[4]阳建华.干化学试带法检测尿液白细胞假性原因探讨[J].医学信息,2010,23(11):302.
[5]舒旷怕,朱蓉,陈小剑.菌尿对尿液分析红细胞和隐血测定的影响[J].浙江创伤外科.2009,5(14):529.
[6]王永强.探讨尿液分析仪潜血反应与显微镜检查红细胞的联合应用[J].中外健康文摘,2013,10(6):110.
收稿日期:(2014-12-25)
文章编号:1007-4287(2015)03-0482-03