脾亢患者冷凝集素干扰致交叉配血不合的处理1 例

胡晓玲，汪新明，邓淑芬，叶 蕾

冷凝集素会给交叉配血及血型鉴定带来干扰，因其为IgM 类完全抗体， 在低温时可使自身红细胞、O 型红细胞及献血员相同血型的红细胞发生凝集[1]。 在温度达到20 ℃以上时，冷凝集素效价逐渐降低，凝集消失。 笔者在工作中遇到1 例脾功能亢进患者，在手术用血时因冷凝集素干扰导致交叉配血不合， 采用37 ℃加温盐水洗涤红细胞及37 ℃水浴血清的方法快速消除干扰，及时准确地为患者发放了相合的血液， 保证了输血治疗的安全有效，现将处理过程报告如下。

1 病例摘要

患者，女，59 岁，既往无输血史，临床诊断为巨脾并脾功能亢进，实验室检查结果：Hb 79 g/L，RBC 0.56×1012/L，WBC 2.24×109/L，血型鉴定为AB 型；在手术备血时血型正反定型为AB 型， 抗体筛选试验阴性；次日术中提血时，与AB 型血液交叉配血不相合。

2 试剂与检测方法

2.1 主要试剂和仪器 戴安娜全自动配血仪、戴安娜抗人球蛋白检测卡、戴安娜血型检测卡，反定型标准红细胞、抗体筛选细胞（长春博迅生物制品），强生抗人球蛋白检测卡、强生血型检测卡，强生半自动配血专用孵育器、离心机。

2.2 术前备血的血清学试验 此患者输血目的为手术备血，在术前1 d 接到手术备血申请单，后即为该患者做血型鉴定和抗体筛选试验，所用试剂为反定红细胞及抗体筛选细胞，戴安娜血型鉴定卡及戴安娜抗人球蛋白检测卡。 因戴安娜试剂卡所要求的红细胞浓度为0.8%的红细胞悬液，标准反定红细胞及抗筛细胞的浓度均为3%～5%，经过反复的试验得出我实验室所使用的反定红细胞及抗筛细胞最适配制方法为：2 ml 生理盐水加入3 滴标准红细胞（以标准红细胞试剂瓶的滴管为标准） 或是抗体筛选细胞，0.8%的红细胞悬液配制完成后， 放入戴安娜全自动配血仪内备用，将患者样本及检测卡放入仪器内，20 min 后试验结束， 血型鉴定结果为正反定型均为AB 型，RH（D）阳性，抗体筛选试验阴性。备血完成，标本放入4 ℃冰箱保存。

2.3 术中用血交叉配血试验 在次日为该患者做交叉配血试验时，与AB 型献血员交叉配血不相合，此次试验所用试剂卡为强生交叉配血卡，其方法为微柱凝胶法.取配血卡1 张，撕开锡箔纸两孔，取干燥洁净试管2 只，将受血者及供血者的红细胞各取30 μl，加入1 ml 生理盐水配制成3%的红细胞悬液待用。 主侧加入患者血清40 μl 和献血员红细胞悬液10 μl，次侧加入患者红细胞悬液10 μl 及献血员血清40 μl，放入孵育器孵育10 min，离心5 min，取出观察结果，主次侧均凝集，交叉配血不相合。

2.4 复查ABO 血型及抗体筛选试验结果 核对标本及患者信息、复查血型，取强生血型卡1 张，前4孔内加入患者红细胞悬液10 μl，后2 孔加入患者血清40 μl， 离心5 min 后观察结果， 正定型为AB 型RH（D）阳性，反定型为O 型，正反定型结果不一致。再次复查抗体筛选，取强生交叉配血卡1 张，撕开锡箔纸4 孔，分别加入患者血清40 μl，前面3 孔依次加入抗体筛选细胞1、2、3 号细胞， 第4 孔加入患者红细胞悬液10 μl，孵育10 min，离心5 min 后观察结果，抗体筛选试验阳性，自身对照阳性。 结合术前备血试验结果，考虑该患者可能为冷凝集素干扰。

2.5 红细胞及血清的处理及结果 将患者的血清放入37 ℃水浴箱中，水浴10 min，患者红细胞用37 ℃温盐水反复洗涤3～5 次， 镜下观察无凝集后，再次做ABO 血型鉴定及交叉配血[2]，经过37 ℃水浴后的血清及加温洗涤后的红细胞与AB 型献血员交叉配血相合，血型鉴定为AB 型RH（D）阳性，正反定型结果一致。 发血时告知临床该患者血液冷凝集素效价高，输注时需保温缓慢输注，并密切观察，室内温度需控制到25～30 ℃。 本例术中输注红细胞3 U，普通冰冻血浆300 ml，未出现不良反应。

3 讨论

冷凝集素存在于正常人血清中， 但效价很低，一般情况对交叉配血及血型鉴定不会造成干扰。 在温度较寒冷的冬天及室温降至4 ℃时作用最强，但此种凝集反应是可逆的，在恢复室温至20 ℃以上时即可消失。 此例手术备血时为新鲜抽取标本，在检测时未产生冷凝集素。 而次日交叉配血时，由于标本在4 ℃冰箱中保存， 使患者血液中的冷凝集素效价增高，导致交叉配血不相合。 此例是手术患者，在术前1 d 已做了输血相关的血清学试验， 在术中用血时配血不合，结合术前试验结果，就能准确判断是由于冷凝集素干扰所致，所以在重复交叉配血实验时，采用37 ℃水浴血清及加温盐水洗涤红细胞的方法，就能快速消除冷凝集素对试验的干扰。

在临床上易出现冷凝集素干扰的病例一般为：老年、儿童、长期反复输血的慢性病、肺炎、多发性骨髓瘤、血液病及造血干细胞移植后、肾脏疾病、系统性红斑狼疮、肿瘤、严重的肝脏疾病等患者。 如交叉配血试验时仅次侧发生凝集， 抗体筛选试验阴性，自身对照阳性，可判断为自身抗体。 在确认供血者和受血者血型均正确的情况下，可以发血，但应嘱缓慢输注、密切观察。 如在交叉配血试验时主侧凝集，抗体筛选试验阳性，在排除是否为ABO 以外的血型抗体时，即可用37 ℃水浴血清及加温盐水洗涤红细胞的方法来确认是否为冷凝集素干扰，如此种方法后交叉配血相合，才能发血，反之则不能输注。 针对此类患者的输血原则是，需抢救生命时才选择输注；交叉配血标本应采用新鲜血，无溶血、无脂肪血、无污染；输注时血液必须在室温复温，调高室内温度至20～30 ℃，密切观察。

[1] 刘引霞, 潘俊均, 李雪莹. 红细胞冷凝集素现象2 例临床分析[J]. 国际检验医学杂志, 2014, 35(8)：75.

[2] 王静, 徐凤娟, 叶红辉. 高效价冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的影响相关分析[J]. 临床血液学杂志, 2014, 27(6)：23.