益气通脉饮对慢性心力衰竭大鼠心功能及血清 TNF-α、IL-6、TGF-β1水平的影响

吉 利，张 艳

辽宁中医药大学附属医院心内一科，辽宁 沈阳 110032

慢性心力衰竭(CHF)是心血管疾病的终末期表现和最主要的死因。心气虚衰是CHF发病的始动因素，而血瘀是CHF的中心病理环节。根据CHF的病机特点，筛选药物制成益气通脉饮治疗CHF取得了良好的疗效，为进一步探讨益气通脉饮治疗CHF的作用机理进行了动物实验研究，现报道如下：

1 材料与方法

1.1 动物 10～12周龄健康雄性Wistar大鼠100只，体质量250～300 g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供，实验动物使用许可证号：SYXX(辽)2010-0013。

1.2 试剂 益气通脉饮，药物组成：黄芪、人参、红花、丹参、三七、益母草等（辽宁中医药大学附属医院中药局提供）；科素亚（杭州默沙东制药有限公司生产，国药准字H20000371，规格：50 mg/片）；大鼠肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、白介素 -6(IL-6)、转化生长因子 -β1(TGF-β1)ELISA试剂盒（上海博研生物工程研究中心，产品编号分别为BYS11721B、BYS11731B、BYS11722B）。

1.3 仪器设备 DH-140B型小动物呼吸机(浙江医科大学医疗实验仪器厂生产)；MS-2000多媒体化心电图软件(广州市龙飞达科技有限公司生产)；SONOS5500分色多普勒超声心动图机(Agilent公司生产)。

1.4 方法

1.4.1 造模与分组 参考文献［1］方法，在无菌操作下，于胸骨左侧第3、4肋间皮肤处横向切开长约1.5 cm的切口，钝性分离软组织，暴露心脏后，于左冠状动脉前降支起点下2～4mm处用6号丝线结扎左冠状动脉主干造成急性心肌梗塞模型。术后记录标准肢体导联及胸前导联(纸速50 mm/s)心电图，ST段弓背抬高者为造模成功。常规喂养饲料与水1周后，于第2周将饲料减半，使大鼠处于半饥饿状态，常规喂水；于第3周开始，每天游泳1次，致疲乏无力(约20分钟)；于第4周由电检科医生做彩色超声多普勒心电图，测定左室收缩末期容积(ESV)、左室舒张末期容积(EDV)、左室射血分数(LVEF)、左室每搏输出量(SV)，进而计算左室心指数(CI)，CI≤180mL/(min/kg)者作为心衰成功模型入选。将造模成功大鼠随机分为模型对照组、中药等效剂量组、中药大剂量组、西药对照组，另设正常对照组，每组8只。

1.4.2 给药方法 中药等效剂量组与大剂量组分别按照5.4 g/kg(体质量)、16.2 g/kg(体质量)予益气通脉饮煎取液灌胃，即相当于临床成人剂量与3倍成人剂量；西药对照组予科素亚混悬液，按4.5mg/kg(体质量)灌胃，相当于临床成人剂量；模型对照组与正常对照组以同体积生理盐水灌胃。1次/d，共8周。

1.5 观察指标及检测方法 心功能检查：由电检科医生为大鼠做彩色超声多普勒心动图，测定左室收缩末期容积(ESV)、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期容积(EDV)、左室每搏输出量(SV)，各项数值均经计算机处理后获得；测定血清TNF-α、IL-6、TGF-β 含量：5%戊巴比妥(2～3mL/kg)腹腔注射麻醉下开胸取左心室腔血2mL，注入试管中，摇匀，4℃3 000 r/min离心10分钟，取血清-20℃保存。用放射免疫法(ELISA)测定TNF-α、IL-6与 TGF-β1。

1.6 统计学方法 数据采用SPSS 13.0统计软件包进行分析，计量资料以(χ±s)表示，组间多重比较采用SNK-q检验。检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1 各组大鼠一般状态 除正常对照组外，其余各组大鼠在造模后均出现不同程度的蜷卧、脱毛、消瘦、厌食、便溏等症状，未经任何治疗的模型对照组最重。该组大鼠一般状态差，表现为活动度显著下降，进食及饮水量明显减少，消瘦明显。各组大鼠治疗后一般状态普遍有所改善，以中药等效剂量组最为明显，表现为体质量增加，活动较多，一般状态尚可。中药大剂量组和西药对照组同模型对照组比较，一般状态也有所改善，但不如中药等效剂量组明显。

2.2 各组大鼠心功能的变化 模型对照组大鼠ESV、LVEF、EDV、SV同正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，同模型对照组比较，中药等效剂量组以及西药对照组ESV、LVEF、EDV、SV差异有统计学意义(P＜0.05)；而中药大剂量组和西药对照组之间各项指标比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

2.3 各组大鼠血清细胞因子水平比较 与正常对照组相比，模型对照组大鼠血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平显著增高(P＜0.01)；中药大剂量组、等效剂量组和西药对照组血清 TNF-α、IL-6、TGF-β1水平均较模型对照组降低(P＜0.05)；而中药大剂量组、等效剂量组和西药对照组之间血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表 2。

表1 各组大鼠心功能变化情况(χ±s)

表 2 各组大鼠血清 TNF-α、IL-6、TGF-β1水平比较(χ±s)

3 讨论

多项研究表明，慢性心力衰竭是一种神经激素细胞因子网络失衡状态［2］。心衰时，多种有生物活性细胞因子的过度表达是造成心肌损伤、循环功能受损的重要原因。TNF-α是一种具有多种生物学效应的细胞因子。近年研究发现，充血性心力衰竭时，心肌细胞会产生大量TNF-αmRNA及表达TNF-α。而且，血清TNF-α浓度与心力衰竭的严重程度以及临床特征密切相关，提示TNF-α是反映心力衰竭程度的一项重要指标［3］。IL-6类似于TNF-α，是另一种多功能细胞因子。除了调节免疫和炎症反应，IL-6还能独立调节心脏功能，发挥负性肌力作用和细胞毒作用。相关实验证实衰竭心肌组织可表达IL-6，并通过自分泌或旁分泌机制致心肌收缩功能不全［4］。TGF-β1是一种多功能蛋白质,具有增加细胞外基质沉积的作用。在心脏中,心肌成纤维细胞是其作用的主要靶点。作为最重要的促纤维性细胞因子之一，TGF-β1可促进心肌成纤维细胞的生长并调节基因的表达［5］。

CHF属祖国医学“心悸”“怔忡”“心痹”等范畴［6-8］。本研究认为CHF的基本病机为本虚标实，心气亏虚为本，血瘀为标。益气通脉饮是基于心气虚衰为CHF发病的基础，血瘀是其中心病理环节理论认识的基础上，结合临床经验组方，由黄芪、人参、红花、丹参、三七、益母草等组成。本研究表明，益气通脉饮不仅能改善大鼠的一般状况、减轻心力衰竭症状，还可有效降低血清中TNF-α、IL-6、TGF-β1水平，拮抗这些细胞因子对心血管的不利影响。

总之，本研究发现益气通脉饮治疗慢性心力衰竭的作用与抑制炎性细胞因子TNF-α与IL-6的活性，降低促纤维性细胞因子TGF-β1的水平有关,从而在一定程度上达到改善心衰症状，提高生存质量的目的，对于预防和延迟心功能不全的进展具有重要意义。

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