不同检验方法对慢性肝病的检验结果影响探讨

2015-01-31 11:02:16刘欣
中国继续医学教育 2015年30期
关键词:实验法胶体金层析

刘欣

不同检验方法对慢性肝病的检验结果影响探讨

刘欣

目的 探究分析不同的检验方法对于慢性肝病检查结果的影响。方法 以我院在2013年1月~2014年1月间收治的108例慢性肝病的患者为观察对象,分别采用胶体金层析法、PCR检测法以及免疫电子发光实验法检测患者血清,统计并分析三种方法的肝病阳性检出率。结果 胶体金层析法对于慢性肝病的阳性检出率为73.15%,PCR检测法的检出率为94.44%,免疫电子发光实验法的检出率为84.26%。对比可知,PCR检测法对于慢性肝病的检出率叫其他两种方法高,且差异显著(P<0.05)。结论 PCR检测法对于慢性肝病的检出率高,且特异性强,敏感性高,对于临床上对慢性肝病的早期具有重要的诊断价值。

慢性肝病;胶体金层析法;PCR检测法;免疫电子发光实验法

笔者以我院在2013年1月~2014年1月收治的108例慢性肝病患者为观察对象,探究分析了不同的检验方法对于慢性肝病检查结果的影响,现总结报道如下。

1 资料与方法

1.1 基本资料

以我院在2013年1月~2014年1月收治的108例慢性肝病患者为观察对象,其中男性68例,女性40例,年龄25~75岁,平均年龄(42.2±3.5)岁。本组患者不包含HBV携带者和HAV等其他肝炎病毒感染的重症患者,且所有患者的诊断符合2005年颁布的慢性乙肝的防治指南。

1.2 检测方法

1.2.1 胶体金层析法 首先制备胶体金,用蒸馏水溶解氯金酸,并使其浓度在0.01%左右。取100 ml液体,加热至沸腾后,加入1.0 ml 1%的柠檬酸三钠,继续加热,直至液体颜色由白色变为蓝色最终变为红色,说明胶体金溶液已制备好,将溶液放置冷却。在测试条上铺匀IgM抗体,将其与硝酸纤维素膜和吸水滤纸重叠放置[1-2],并粘在白色的塑料片上。将患者的血清用生理盐水按1:10稀释,然后将测试条加样端没入血清中,5~10min后观察结果。若为红色“+”则为阳性,若为红色“-”则为阴性,若无显示红色说明测试失败应重新检测。

1.2.2 PCR检测法 取待检样本100 µl加入核酸提取液A100 µl,混匀后离心:13 000 r/min,15min。弃上清液再加入25µl核酸提取液B,混匀加热:100℃,10min,离心:13 000 r/min,2min。根据取样的量分别取18 µlhBV-cDNA反应液、3 µl氯化镁、2 µl Taq酶和3 µl荧光探针加入离心管中,混匀并离心,按照每管26 µl的量分装。将样本和标准品分别加入反应管中,混匀并放在荧光PCR仪中进行PCR扩增反应:50℃下1min,94℃下5min,93℃下30 s,60℃下1.5min,以上述温度和时间循环40次。当结果显示的D值小于38时,则为阳性。

1.2.3 免疫电子发光实验法 使用美国雅培公司生产的AX-SYM及其相关试剂、标准品对所取的样品进行检测。

1.3 统计学分析

采用SPSS 17.0软件处理实验数据,计量资料使用(x-±s)表示,计数资料使用χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

对比分析本组108例患者通过胶体金层析法、PCR检测法以及免疫电子发光实验法三种检测方法的慢性肝病的检出率,结果显示:使用胶体金层析法检测的阳性患者数有79例,则其检出率为73.15%;使用PCR检测法检出的阳性患者有102例,则其检出率为94.44%;使用免疫电子发光实验法检出的阳性患者91例,则其检出率为84.26%。由此可知,PCR检测法对于慢性肝病的检出率较其他两种方法高,且差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

慢性肝病的发病率逐年上升,严重威胁着人们的身体健康和生活质量[3],临床上对于慢性肝病的检测方法较多。近年来,随着分子生物学的发展,PCR检测法逐渐应用于慢性肝病的检测中[4],其利用病毒的部分DNA片段在体外进行扩增,并联合使用电泳技术,具有方便、快捷以及特异性强、敏感性高等特点,但其在慢性肝病检测中具体效果尚不十分明确。为探究分析不同的检验方法对于慢性肝病检查结果的影响,本文以我院108例慢性肝病的患者为观察对象,分别采用胶体金层析法、PCR检测法以及免疫电子发光实验法检测患者血清,统计并分析三种方法的肝病阳性检出率,结果显示:胶体金层析法对于慢性肝病的阳性检出率为73.15%,PCR检测法的检出率为94.44%,免疫电子发光实验法的检出率为84.26%。对比可知,PCR检测法对于慢性肝病的检出率叫其他两种方法高,且差异显著(P<0.05)。

综上所述,PCR检测法对于慢性肝病的检出率高,且特异性强,敏感性高,对于临床上对慢性肝病的早期具有重要的诊断价值。

[1]李国文.慢性肝病伴糖代谢异常48例临床分析[J].山西医药杂志,2012,41(2):25.

[2]周潇.几种检验方法对慢性肝病的检验结果分析[J].中国医药指南,2012,10(12):16-17.

[3]石亮.慢性肝病患者血清中的诊断指标临床意义探讨[J].中华医院感染学杂志,2011,21(1):56.

[4]黄平.不同检验方法对慢性肝病的检验结果分析[J].临床内科杂志,2012(1):23.

Different Inspection Methods Affect the Test Result of the Chronic Liver Disease

LIU Xin, Taiping People's Hospital, Harbin 150050, China

Objective To explore the analysis of different test methods for the infuence of chronic liver disease results. Methods From January 2013 to January 2014, 108 cases of chronic liver disease patients were taken as observation object, respectively using colloidal gold chromatography, PCR assay and the serum in patients with immune electron emitting experiment method and statistics and analysis of the three methods of liver positive detection rate.Results Colloidal gold chromatography for chronic liver disease positive detection rate of 73.15%, the PCR test detection rate of 94.44%, immune electron emitting experimental method detection rate of 84.26%. Comparison shows that the PCR assay for the detection rate of chronic liver disease is high, the other two methods and has a significant difference (P<0.05). Conclusion PCR assay for the detection rate of chronic liver disease is high, and strong specifcity, high sensitivity, it has important diagnostic value of chronic liver disease for early clinical effect.

Chronic liver disease, Colloidal gold chromatography, PCR assay, Immune electron emitting experimental method

R575

A

1674-9308(2015)30-0030-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.30.022

150050 黑龙江省哈尔滨市道外区太平人民医院检验科

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