任彩虹
SOX9与NM 23基因在前列腺癌中的表达
任彩虹
目的 探讨SOX9、NM 23基因在前列腺癌中的表达。方法 选取16例前列腺癌患者与24例前列腺良性增生患者,取其病理组织采用实时荧光定量PCR测定其mRNA表达量。结果 前列腺癌组患者NM 23、SOX 9 mRNA表达量与前列腺增生组患者比较明显更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 通过对NM 23、SOX9 mRNA表达量进行测定可为前列腺癌临床诊断提供可靠依据。
前列腺癌;NM 23基因;SOX 9基因;表达
前列腺癌是一种老年男性非常多见的恶性肿瘤疾病,根据美国调查数据显示,前列腺癌在恶性肿瘤发病率中排首位,死亡率则排第二位[1]。伴随着中国经济的快速发展,医疗水平的提升,人们的寿命普遍延长,但因饮食结构和生活习惯等变化,使得我国的前列腺癌患者的发病率也呈现为逐年递增的趋势,并发展成为了我国男性泌尿系统常见肿瘤疾病。目前,在前列腺癌的临床诊断中,主要采用血清PSA、直肠指诊、经直肠前列腺超声等手段,但这些方法的误诊率和漏诊率相对较高。随着基因检测技术的进步,不少学者纷纷指出通过对SOX9与NM23基因进行测定,可有效掌握前列腺癌的病变进程,为临床诊断提供客观的依据。现结合我院前列腺癌患者SOX9与NM23基因表达,对其用于前列腺癌诊断价值进行探讨。有关情况报道如下。
1.1 一般资料
收集我院2014年1月~2015年6月泌尿外科接诊的24例前列腺良性增生患者与16例前列腺癌患者,所有病理组织均来自经尿道前列腺电切术或者前列腺根治术等。所有样本均在获得后置于存有液氮的瓶内速冻保存。其中PCa患者平均年龄(71.5±1.54)岁;BPH患者平均年龄(63.6±2.54)岁。并根据石蜡切片诊断结果Gleason分级。
1.2 SOX9与NM23基因mRNA定量检测
1.2.1 仪器与试剂 (1)仪器:运用荧光定量PCR仪(ABI 7500)与配套分析软件。(2)试剂:10×PCR Buffer、热启动Taq酶、Rox Dye Reference等。
1.2.2 测定方法 (1)提取RNA:向速冻瓶中加入Trizol液,并放置于匀浆机行匀浆处理获得RNA;(2)采用Takara Taq HS试剂;(3)通过荧光定量PCR仪与荧光定量PCR分析软件;(4)对mRNA进行提取;(5)经NCBI的gene bank,对NM23以及SOX9基因的相关资料进行检索,获取NM23以及SOX9基因的相关uniSTS 和Normal mRNA序列。通过Vextor NT6.0软件对NM23以及SOX9基因的相关uniSTS扩增片段中Normal mRNA位置进行定位,长度选取为100~300 bp。再通过NCBI中的e-PCR软件与Blast软件对该片段的特异性进行分析,排除重复引物与特异性较差的引物。按照KLK11基因与TMPPSS2基因中的相关uniSTS和mRNA序列,按照反转录标记与杂交的要求及ePCR结果,对特异性较佳的序列进行筛选,同时完成NM23以及SOX9基因的uniSTS引物序列与探针序列的制作;(6)采用实时荧光定量PCR对RNA样本进行测定;(7)完成标准曲线的制作;(8)采用相对定量法对数据进行处理。
1.3 统计学处理
应用SPSS软件处理数据,分别对良性前列腺增生症和前列腺癌患者的NM23以及SOX9 mRNA表达量进行独立样本t检验。P <0.05为差异具有统计学意义。
通过对前列腺癌患者与前列腺增生患者NM23、SOX9基因进行测定。结果显示,前列腺癌组NM23 mRNA表达量为(4.38±0.75),SOX9 mRNA表达量为(9.18±0.99);前列腺增生组NM23 mRNA表达量为(3.01±0.76),SOX9 mRNA表达量为(4.06±0.82)。前列腺癌组患者NM23、SOX9 mRNA表达量均高于前列腺增生组患者,对比差异均有统计学意义(t1=11.294,t2=34.795,P<0.05)。
近几年来,在前列腺癌临床诊断中,主要采用血清PSA进行筛查、诊断与预后判断,但因前列腺炎、前列腺增生等均可致使血清PSA水平因此上升,致使其诊断灰区,导致前列腺增生与前列腺癌经常出现误诊、漏诊等现象。为此,选取一种有效的分子标记物来对前列腺癌的诊断进行指导具有非常重要的作用。SOX9 是SOX家族基因中非常重要的一名成员。有研究该基因与多种恶性肿瘤的病变和发展均有直接联系[2]。有研究者通过实验发现,SOX9不仅在正常前列腺的发育中有重要作用[3-4],同时在肿瘤的侵袭力和肿瘤生长中也发挥了重要作用[5]。NM23基因的表达与失活可引起组织器官出现肿瘤转移和畸形分化。根据本研究结果来看,通过对前列腺癌与前列腺增生患者NM23、SOX9基因表达进行测定,结果发现,前列腺癌组的NM23、SOX9 nRNA均高于前
列腺增生组(P<0.05)。
综上所述,在对前列腺癌诊断中,以NM23、SOX9基因为分子标记物,可充分掌握组织中其表达量,并根据表达量的不同来作为病情诊断、预后的判断指标。参考文献
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[2]毕丽荣,杨华,刘仲祥,等.Ki-67、C-erb-B2及nm23在前列腺癌中的表达及意义[J].中国实验诊断学,2010,13(1):90-92.
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Expression of SOX9 and NM23 Gene in Prostate Cancer
REN Caihong, Pathology Department, the First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Fuzhou 350005, China
ObjectiveTo investigate the expression of SOX9 and NM 23 gene in prostate cancer.Methods16 patients w ith prostate cancer and 24 patients w ith benign prostatic hyperplasia, take the pathological tissue, the expression of mRNA was measured by real-time fluorescence quantitative PCR.ResultsThe expression of SOX9 and mRNA NM 23 in prostate cancer group was significantly higher compared w ith that in patients w ith benign prostatic hyperplasia(P<0.05).ConclusionThe expression of SOX9 and mRNA NM 23 can be measured, and it can provide reliable basis for clinical diagnosis of prostate cancer.
Prostate cancer, NM 23 gene, SOX9 gene, Expression
R 737.25
B
1674-9308(2015)28-0042-02
10.3969/j.issn.1674-9308.2015.28.030
350005 福建省福州市福建医科大学附属第一医院病理科