茯苓酸药理学研究进展

黄 斯， 潘雨薇， 蓝 海， 余 璇， 陈凤国， 佟 义， 赵国平

（暨南大学医学院，广东广州510632）

［综 述］

茯苓酸药理学研究进展

黄 斯， 潘雨薇， 蓝 海， 余 璇， 陈凤国， 佟 义， 赵国平*

（暨南大学医学院，广东广州510632）

茯苓酸是中药茯苓的特有成分，也是茯苓的主要活性成分之一，具有多种与药效有关的药理活性。目前茯苓酸已经引起广泛关注，对其研究越来越多，本文就茯苓酸在抗肿瘤、抗炎、抗氧化、降血糖、镇静催眠等方面的药理作用及其药物代谢动力学研究进展进行综述，为茯苓酸的进一步研究提供依据。

茯苓酸；药理学；药理作用；药物代谢动力学

茯苓是多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核。传统中药理论认为茯苓具有利水消肿、健脾渗湿、宁心安神功效。茯苓主要成分有茯苓多糖和三萜类物质，茯苓酸（Pachymic acid，PA）是茯苓特有的一种四环三萜化合物，也是茯苓的主要活性成分之一，具有多种与药效有关的药理活性。Shu S等［1］利用从头测序和转录组分析测得茯苓酸在干燥茯苓菌核中的量为0.174%。近年来，随着茯苓酸分离方法的不断完善，其单体药理活性的研究越来越多，已经引起广泛关注。陈少军等［2］采用PharmMapper、PyRx 0.8、Autodock Vina等工具，通过反向分子对接技术对茯苓酸潜在治疗靶点进行预测，发现转甲状腺蛋白、维生素D3受体、11β羟基类固醇脱氢同工酶可能是其潜在靶点。

1 茯苓酸药理作用

1.1 抗肿瘤作用 茯苓酸对结肠癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌等肿瘤细胞的增殖和侵袭都有显著抑制作用。LiG等［3］发现茯苓酸对人结肠癌细胞株具有中等程度的细胞毒活性（IC50：29.1 mmol/L），对DNA拓扑异构酶I（100 mmol/L时43.5%）和II（20 mmol/L时43.9%）都有较强抑制作用。Ling Hui等［4］对人乳腺癌细胞进行研究发现茯苓酸 （20μmol/L）阻断核因子κB抑制物激酶（IKK）磷酸化，减少核因子κB抑制物α（IκBα）降解，不影响丝裂原活化蛋白激酶 （MAPK）磷酸化水平，抑制核因子κB（NF-κB）信号通路（对转录激活蛋白AP-1没有影响），从而降低基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达量，抑制乳腺癌细胞侵袭能力。Hong R等［5］也发现茯苓酸（10～40μg/mL）抑制磷酸肌酸转运蛋白3（PITPNM3）磷酸化，阻止其配体趋化因子CCL18与PITPNM3结合，抑制乳腺癌细胞转移和侵袭。Zhou L［6］发现茯苓酸对非小细胞肺癌细胞A549有显著细胞毒性，Ling Hui等［7］也发现茯苓酸 （30～200μmol/L）浓度依赖性抑制A549生长，除细胞毒作用，茯苓酸可破坏线粒体膜电位，抑制白细胞介素-1β（IL-1β）引起的NF-κB、MAPKs激活，降低胞浆型磷脂酶A2（cPLA2）、环氧化酶-2（COX-2）活化水平，减少花生四烯酸代谢，起潜在肿瘤预防作用。Cheng S等［8］发现茯苓酸呈浓度依赖性效抑制人胰腺癌细胞Panc-1、MiaPaca-2、AsPc-1和BxPc-3增殖（0.125～25μmol/L）和侵袭（1.0～5.0μmol/L），且对正常胰腺导管上皮细胞的增殖影响很小。Gapter L等［9］研究发现茯苓酸（20～40μg/mL）通过减少前列腺素合成和蛋白激酶 （Akt）活性，减少前列腺癌细胞增殖。茯苓酸降低凋亡相关蛋白Bad磷酸化，提高B淋巴细胞瘤-2基因 （Bcl-2）磷酸化，并激活半胱天冬酶-9和-3，表明其通过线粒体功能障碍启动细胞凋亡。此外，茯苓酸对非雄激素敏感的前列腺癌细胞DU145表现出更强生长抑制作用。

1.2 抗炎抗氧化作用 Cuélla M J［10-11］、Giner E M［12］、Prieto JM［13］发现茯苓酸对皮肤、口腔、耳道等局部炎症有显著抗炎作用，其抗炎作用是通过抑制磷酸酶A2（PLA2）、白三烯B4分泌，降低5-脂氧合酶、弹性蛋白酶、COX-2活性实现的。炎症因子会启动细胞氧化应激反应，Sekiya N等［14］发现茯苓酸 （25～1 000μg/mL）能抑制2，2-偶氮二 （2-甲基丙基咪）二盐酸盐 （AAPH）引起的人红细胞溶血，在50～500μg/mL时抑制率超过60%。Kim TG等［15］研究AH plus根管充填剂引起的MC-3T3 E1细胞炎症和氧化应激模型发现茯苓酸通过恢复碱性磷酸酶（ALP）活力，下调NO、TNF-α、IL-1β生成，减少NF-κB配体受体激活剂、COX-2、MMP-2、MMP-9，移除活性氧簇（ROS），减轻AH Plus对MC-3T3 E1细胞引起的炎症及氧化应激状态的不利影响，恢复细胞活力。

除此之外，茯苓酸（15μmol/L）可抑制NF-κB易位、增强核因子E2相关性因子2（Nrf2）易位，增强血红素加氧酶-1蛋白表达量，改善H2O2导致的人牙髓细胞炎症和氧化应激状态［16］。

1.3 降血糖作用 Huang Yu Chuan等［17］发现茯苓酸 （1.0 μmol/L）提高3T3-L1细胞GLUT4受体表达量，促进其向胞膜转移，提高诱导分化的脂肪细胞胰岛素受体底物（IRS）-1、Akt、腺苷酸活化蛋白激酶 （AMPK）磷酸化水平，增强3T3-L1细胞对葡萄糖摄取能力。此外实验还证明茯苓酸可以诱导脂肪细胞中甘油三酯的积累，阻止其降解。在体实验也发现［18］茯苓酸 （10 mg/kg）灌胃能显著降低db/db小鼠和链脲佐菌素（STZ）（200 mg/kg）诱导的C57BL/6J小鼠2型糖尿病模型血糖水平，其机制可能是增强胰岛素敏感性有关，但并未激活PPAR-γ信号通路。

1.4 镇静催眠作用 Shah V K等［19］发现茯苓酸（5 mg/kg）灌胃能提高谷氨酸脱羧酶65/67表达水平，显著减少ICR小鼠活动度，增强戊巴比妥诱导的睡眠时间，缩短入睡前等待时间。茯苓酸镇静催眠效果是通过γ-氨基丁酸能系统实现的，茯苓酸可以提高氨基丁酸A型受体α和β亚基水平，降低γ亚基的水平。

1.5 其他作用 李春雨等［20］报道茯苓酸 （1～10 mg/kg）灌胃延长接受心脏移植手术SD大鼠生存时间，减少心肌细胞炎症反应和坏死，降低血清炎症因子IL-2和IFN-γ水平；Zhang Fan等［21］也发现茯苓酸 （10 mg/kg）灌胃降低接受心脏移植手术的雄性SD大鼠排斥反应。茯苓酸的抗排斥作用是通过稳定线粒体跨膜电位，抑制外周血淋巴细胞（PBLs）凋亡，抑制CD8+淋巴细胞百分比，但对CD4+淋巴细胞未见显著影响。通过双电极电压钳技术，Lee JH等［22］发现在非洲爪蟾卵母细胞上，茯苓酸存在电压依赖性的抑制5羟色胺3A受体（IC50：3.2+/-0.2μmol/L）。Cai TG［23］等发现茯苓酸（20μmol/L）降低脂多糖（LPS）引起RAW 264.7细胞NO生成增加，这可能与茯苓酸降低AP-1表达水平，从而导致其目的基因诱导型一氧化氮合酶（iN0S）表达水平下降有关。周宏超［24-25］等发现茯苓酸（1～10μg/mL）抑制志贺样毒素II型变异体引起大鼠肠粘膜微血管内皮细胞NO、内皮素1、血栓素A2、细胞间黏附分子1分泌过量，阻止血栓形成，缓解肠道微循环障碍。Keller A C等［26］研究发现茯苓酸具有显著的抗微生物功效。王伟等［27］研究茯苓酸 （1～5 mg/kg）灌胃对C57小鼠梗阻性肾积水导致的肾间质纤维化的作用，发现茯苓酸可能通过下调转化生长因子-β1（TGF-β1）、p-Smad2/3、MMP-9表达水平，减少肾间质胶原纤维蛋白-1、纤维黏连蛋白、平滑肌肌动蛋白mRNA和蛋白表达水平，减轻组织纤维化和病理损伤。

2 茯苓酸药物代谢动力学

Ling Yun等［28］用茯神乙醇提取物对SD大鼠灌胃，收集灌胃后24 h内大鼠排泄的全部尿液，以及灌胃后第1、2、3、4、6、8小时的血浆，通过LC-ESI-MSn法，研究提取物所含34种化合物在大鼠体内代谢情况，发现仅有茯苓酸在血浆和尿液中都检测到。Alatengqimuge Y等［29］采用HPLC-UV方法，研究茯苓酸药物代谢动力学发现茯苓酸（30 mg/kg）经静脉注射大鼠，血浆中茯苓酸半衰期为（8.79±6.80）h，药时曲线下面积AUC（0～inf）（18.90± 9.39）mg/（h·mL），消除率（CL）（0.53±0.28）L/h，分布容积V（ss）（5.60±4.60）L，平均滞留时间 （MRT）（0～inf）（12.58±9.95）h。Zheng Y等［30］利用Caco-2细胞建立单层肠上皮细胞模型，使用RP-HPLC-UV检测210 nm处最大吸收波，研究茯苓酸从顶层 （AP侧）到基底层（BL侧）以及从BL侧到AP侧的渗透能力。结果发现茯苓酸在AP侧到BL侧的交通参数和表观渗透系数（Papp）为（9.50+/-2.20）×10-7cm/s，从BL侧到AP侧为（11.30+/-5.90）×10-7cm/s，高于相同条件下的阿替洛尔Papp。实验证明茯苓酸在Caco-2细胞模型中运输时间与浓度呈线性关系。除了被动扩散，茯苓酸跨细胞运输部分有ATP参与。

3 总结与展望

综上所述，茯苓酸具有抗肿瘤、抗炎抗氧化、降血糖、镇静催眠等药理作用，其作用机制涉及到MAPK、NF-κB、Nrf2、Akt、AMPK等多条信号通路。目前对于茯苓酸的研究比较多的集中在药理作用方面，尤其集中于抗肿瘤作用的研究，对于药物代谢动力学的研究较少，对茯苓酸在各效应器官内分布水平，据笔者所知未见报道，从中药理论上看，茯苓具有利水消肿的功效，茯苓酸对此是否有相关药理作用，据笔者所知也未见报道。而且，对于茯苓酸药理作用研究和药物代谢动力学研究是分开进行的，无法确定建立时间-血药浓度-效应之间的关系，如果能进行药效-药动结合模型的研究，确定给药方案-血药浓度-药物效应三者之间的关系，对揭示血药浓度及效应之间的内在联系将会有重大帮助。

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R285.5

A

1001-1528（2015）12-2719-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.12.031

2014-11-29

国家自然科学基金资助项目 （81173189）

黄 斯 （1989—），男，硕士生，从事中医内科学经方治疗疑难病的研究。

*通信作者：赵国平 （1958—），男，研究员，博士生导师，从事中医教学、临床、中西医结合消化系统疾病的研究。E-mail：tguo428 @jnu.edu.cn.