接骨草花乙酸乙酯部位化学成分研究

文 / 马建苹，张庆（兰州理工大学生命科学与工程学院, 甘肃 兰州, 730050)

接骨草花乙酸乙酯部位化学成分研究

文 / 马建苹，张庆（兰州理工大学生命科学与工程学院, 甘肃 兰州, 730050)

目的：研究忍冬科接骨木属植物接骨草Sambucus chinensis Lindl花乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位的化学成分。方法：用乙醇加热回流提取法对接骨草花进行提取，采用硅胶、凝胶、反相柱色谱等方法进行分离，并通过理化常数和NMR等多种波谱学方法对化合物结构进行鉴定。结果：从接骨草花乙醇提取物乙酸乙酯部位分离得到了6个化合物，分别鉴定为乌索酸（1），齐墩果酸（2），山奈酚 3-O-β-D-葡萄糖苷（3），对羟基苯甲酸（4），丁子香基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5），胡萝卜苷（6）。结论：化合物5为首次从该属植物中分离得到，化合物4为首次从该植物中分离得到。

接骨草；花；乙酸乙酯部位；化学成分

接骨草为忍冬科接骨木属植物接骨草(Sambucus chinensis Lindl) 的干燥全草，又称陆英、臭草，分布于华北、华东、华南、西南及陕西、甘肃、宁夏等省区[1]。以根、茎及叶入药，具有活血散 、祛风除湿、通经活络之功效，能治扭伤、腰肌劳损、骨折、风湿痹痛等症，又能做兽药治牛跌伤[2-3]。药理实验证实接骨草提取物具有抗肝炎[4]、止痛[5]和消炎的作用。临床用于治疗急性病毒性肝炎、脚气、肾炎水肿、跌打损伤、骨折疼痛、风湿性关节炎、疮痈肿毒[6-7]等症。本研究采用多种色谱方法对接骨草花的乙酸乙酯萃取部位进行化学成分研究，为进一步高效合理利用开发甘肃省接骨草药用资源提供了科学依据。

1、材料

本实验所用药材采集于甘肃省兰州市榆中县官滩沟，经甘肃中医学院晋玲教授鉴定为接骨草(Sambucus chinensis Lindl.)，拣选花，干燥，粉碎，备用。

薄层色谱、柱色谱硅胶及硅胶GF254均为青岛海洋化工厂产品；Sephadex LH-20购自上海安玛西亚生物技术有限公司；ODS (GH) 购自北京京京时代科技发展有限公司；所用溶剂均为分析纯，由上海振兴化学试剂厂和天津化学试剂厂生产。

2、提取与分离

将干燥的接骨草花用乙醇加热回流法提取3次，合并提取液，减压浓缩蒸干，得总浸膏124g。浸膏加适量水成混悬液，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物36g，乙酸乙酯萃取物25g，正丁醇萃取物33g，水萃取物22g。

乙酸乙酯萃取物，经反复硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶色谱得化合物1（39mg）、2（49mg）、3（174mg ）、4（26.2 mg）、5（14.9mg ）和6（15mg）。

3、结构鉴定

化合物1 白色粉末 (甲醇)。EI-MS m/ z :456 [M]+；1H-NMR (600MHz, DMSO-d6) δ:0.65-1.07

(21H, H-23, 24, 25, 26, 27, 29, 30), 3.00 (1H, m, H-3), 5.15 (1H, br s, H-12), 11.97 (1H, s,COOH)；13C-NMR (150MHz, DMSO-d6) δ:38.2 (C-1), 27.5 (C-2), 76.8 (C-3), 38.4 (C-4), 54.8 (C-5), 18.5 (C-6), 32.7 (C-7), 38.5 (C-8), 47.0 (C-9), 36.6 (C-10), 22.8 (C-11), 121.5 (C-12), 143.8 (C-13), 41.3 (C-14), 27.0 (C-15), 23.8 (C-16), 45.7 (C-17), 40.8 (C-18), 45.4 (C-19), 30.4 (C-20), 33.3 (C-21), 32.1 (C-22), 28.3 (C-23), 16.0 (C-24), 15.1 (C-25), 16.8 (C-26),25.6 (C-27), 178.6 (C-28), 32.8 (C-29), 23.4 (C-30)。以上数据与文献对照基本一致[8]，且经与对照品TLC检测Rf值一致，故鉴定该化合物为乌索酸。

化合物2 白色晶体（甲醇）。EI-MS m/z:456 [M]+。1H-NMR (600MHz, DMSO-d6) δ:0.68-1.05 (21H, H-23, 24, 25, 26, 27, 29, 30), 3.01 (1H, m, H-3), 5.14 (1H, br s,H-12), 11.96 (1H, s, COOH)；13C-NMR (150MHz, DMSO-d6) δ:38.4 (C-1), 22.8 (C-2), 76.8 (C-3), 38.5 (C-4), 52.4 (C-5), 17.0 (C-6), 36.5 (C-7), 38.4 (C-8), 47.0 (C-9), 38.4 (C-10), 23.8 (C-11), 124.6 (C-12), 138.2 (C-13), 41.6 (C-14), 32.7 (C-15), 21.1 (C-16), 46.8 (C-17), 54.8 (C.18), 30.4 (C-19), 28.3 (C-20), 27.5 (C-21), 36.6 (C-22), 23.4 (C-23), 16.9 (C-24), 16.1 (C-25), 15.2 (C-26), 27.0 (C-27), 178.3 (C-28), 18.0 (C-29), 23.3 (C-30)。以上数据与文献对照基本一致[9]，且经与对照品TLC检测Rf值一致，故鉴定该化合物为齐墩果酸。

化合物3 黄色固体（甲醇）ESI-MS m/z:449.2 [M+H]+, 471.3 [M+Na]+。1H-NMR (600MHz, C5D5N) δ:3.61-4.43 (6H, m, Glc-H-2, 3, 4, 5, 6), 6.34 (1H, d, J=7.8Hz, Glc-H-1), 6.75 (2H, d, J=2.4Hz, H-6, H-8), 7.23 (2H, d, J=9.0Hz, H-3', H-5'), 8.45 (2H, d, J=9.0Hz, H-2', H-6')；13C-NMR (150MHz, C5D5N) δ:157.3 (C-2), 135.0 (C-3), 178.7 (C-4), 157.5 (C-5), 99.8 (C-6), 165.9 (C-7), 94.5 (C-8), 162.7 (C-9), 105.2 (C-10), 121.9 (C-1'), 131.8 (C-2',C-6'), 161.6 (C-4'), 116.0 (C-3',C-5'), 103.9 (Glc-1), 76.0 (Glc-2), 78.4 (Glc-5), 71.4 (Glc-4), 79.0 (Glc-3), 62.5 (Glc-6)。以上数据与文献对照基本一致[10]，且经与对照品TLC检测Rf值一致，故鉴定该化合物为山奈酚 3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物4 无色晶体（丙酮）。ESI-MS m/z:137.1 [M-H]-。1H-NMR (600MHz, CD3COCD3) δ:7.93 (2H, d, J=9.0Hz, H-2, H-6), 6.93 (2H, d, J=9.0Hz, H-3, H-5)；13C-NMR (150MHz, CD3COCD3) δ:167.9 (C-7), 162.6 (C-4), 132.6 (C-2, C-6), 122.5 (C-1), 115.6 (C-3, C-5)。以上数据与文献对照基本一致[11]，且经与对照品TLC检测Rf值一致，故鉴定该化合物为对羟基苯甲酸。

化合物5 无色晶体（甲醇）ESI-MS m/z:343.9 [M+NH4]+。1H-NMR (600MHz, CD3OD) δ:6.99 (1H, d, J=8.4Hz, H-6), 6.73 (1H, d, J=1.8Hz, H-3), 6.63 (1H, dd, J=8.4, 1.8Hz, H-5), 5.85 (1H, m, H-8), 4.96 (1H, dd, J=16.8, 1.8Hz, H-9b), 4.94 (1H, dd, J=10.2, 1.8Hz, H-9a), 4.75 (1H, d, J=7.2Hz, H-1'), 3.76 (1H, d, J=10.2Hz, H-6'b), 3.74 (3H, s, OMe), 3.60 (1H, m, H-6'a), 3.21 (2H, m, H-7)；13C-NMR (150MHz, CD3OD) δ:146.3 (C-1), 150.8 (C-2), 118.3 (C-3), 139.0 (C-4), 122.1 (C-5), 114.2 (C-6), 40.7 (C-7), 136.5 (C-8), 115.9 (C-9), 56.7 (2-OCH3), 103.1 (C-1'), 74.9 (C-2'), 78.2 (C-3'), 71.4 (C-4'), 77.8 (C-5'), 62.5 (C-6')。以上数据与文献对照基本一致[12]，且经与对照品TLC检测Rf值一致，故鉴定该化合物为丁子香基O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物6 白色粉末（甲醇）。EI-MS m/z:576.8[M+H]+。1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ:5.32 (1H, d, t, J=4.4Hz, H-6), 3.75 (1H, m, H-3), 5.05 (1H, d, t, J=6.0Hz, H-1')。13C-NMR (100MHz, DMSO-d6) δ:38.3 (C-1), 29.3 (C-2), 76.8 (C-3), 40.3 (C-4), 140.4 (C-5), 121.2 (C-6), 33.3 (C-7), 31.4 (C-8), 49.6 (C-9), 25.5 (C-10), 20.6 (C-11), 27.8 (C-12), 41.8 (C-13), 56.2 (C-14), 23.9 (C-15), 41.6 (C-16), 55.4 (C-17), 11.7 (C-18), 19.1 (C-19), 36.4 (C-20), 19.0 (C-21), 35.4 (C-22), 36.8 (C-23), 45.1 (C-24), 28.8 (C-25), 18.9 (C-26), 19.7 (C-27), 22.6 (C-28), 11.8 (C-29), 102.5 (C-l'), 73.4 (C-2'), 76.9 (C-3'), 70.0 (C-4'), 76.7 (C-5'), 61.0 (C-6')。以上数据与文献对照基本一致[13]，且经与对照品TLC检测Rf值一致，故鉴定该化合物为胡萝卜苷。

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甘肃省自然科学基金项目(1107RJZA129)