老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达分析

董 丽

（汪清县中医院，吉林 汪清 133200）

老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达分析

董 丽

（汪清县中医院，吉林 汪清 133200）

目的 探讨老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达情况。方法 选取我院接收的70例老年妇女外阴营养不良患者作为观察1组，同时选取10例老年妇女外阴营养不良恶变患者作为观察2组，利用原位末端标记及免疫组化S-P法对两组患者蜡包埋组织中的细胞凋亡及相关基因bcl-2、bax的表达情况进行检测。同时选取10例石蜡包埋的老年妇女正常外阴皮肤进行对照（对照组）。结果 三组患者均在细胞凋亡及bcl-2、bax的表达现象，且观察1组患者的细胞凋亡指数及bcl-2、bax的表达方面均明显高于观察2组（P＜0.05）；bcl-2、bax二者间的表达呈正相关（P＜0.05），在恶变部分凋亡细胞的分布区域及bcl-2、bax的表达方面则无明显相关性。结论 外阴营养不良的发生发展与恶变及细胞凋亡间有较大的关系，且bcl-2、bax发挥着一定的作用。

老年妇女；外阴营养不良；细胞凋亡；基因表达

慢性外阴营养不良是女性常见的一种良性病变，其恶变率高达8%，严重影响着妇女的身体健康。且近些年来，该病的发病年龄逐渐趋于年轻化，然而现阶段临床上尚未明确该病的根治方法。临床上通常将原位末端标记及免疫组织化学S-P法作为检测外应营养不良及恶变组织中细胞凋亡及相关基因表达的常用方式。我院为探讨老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达情况特进行了以下研究，报道如下。

1　资料与方法

1.1临床资料：选取我院自2013年1月至2014年1月期间接收的80例外阴活检患者为研究对象，以其中70例外阴营养不良患者为观察1组其中增生型营养不良25例，硬化型营养不良25例，混合型营养不良20例；10例营养不良恶变患者为观察2组，本组10例患者均恶变为鳞癌；同时选取10例正常外阴患者为对照组。本组所有标本均采用10%福尔马林溶液进行固定，并行常规石蜡包埋，切片厚度应控制为4 µm。

1.2方法

1.2.1原位末端标记检测法：本次研究选用由BoehringerMannheim公司生产的试剂盒，并严格以说明书为依据进行操作，结果判定：阳性细胞：细胞核中含有棕黄色颗粒，且背景清晰。在400倍显微镜下，于标记良好区域选择10个视野计数，每个视野计数100个。凋亡指数=阳性细胞数总和/1000×100%。

1.2.2免疫组织化学S-P法检测bcl-2、bax蛋白：选用由Snta Cruz公司生产的第一抗体鼠抗人bcl-2、兔抗人Bax单克隆抗体，同时选用由北京中山技术有限公司生产的S-P试剂进行检测。工作浓度应设置为1∶50及1∶75，严格按照说明术进行操作。结果判定：阳性细胞：以细胞质着棕黄色为阳性细胞；阳性：细胞质着色程度＞20%；阴性：细胞质着色程度＜20%。

1.3统计学分析：采用SAS9.0软件进行t检验及χ2检验，并对其相关性进行分析，P＜0.05具有统计学差异。

2　结 果

2.1细胞凋亡的检测结果：对照组患者细胞凋亡指数为（23.2± 4.6）%，观察1组患者细胞凋亡指数为（19.6±4.2）%，其中增生型营养不良患者的细胞凋亡指数为（18.9±5.7）%，硬化型营养不良患者的细胞凋亡指数为（20.5±3.1）%，混合型营养不良患者细胞凋亡指数为（19.9±4.4）%；观察2组患者细胞凋亡指数为（5.1±2.2）%，三组患者均存在有细胞凋亡现象，其观察组及研究组患者的细胞凋亡指数均明显高于对照组（P＜0.05），但两组间及观察组中三种病理类型组间比较细胞凋亡指数比较均无明显统计学意义（P＞0.05）。

2.2bcl-2、bax检测结果：对照组10例患者中bcl-2表达9例，占90%，bax表达10例，占100%；观察1组70例患者中bcl-2表达65例，占92.9%，bax表达63例，占90%；其中增生型营养不良25例中bcl-2表达23例，占92%，bax表达23例，占92%；硬化型营养不良25例中bcl-2表达24例，占96%，bax表达23例，占92%；混合型营养不良20例中bcl-2表达17例，占85%，bax表达18例，占90%；观察2组10例患者中bcl-2表达2例，占20%，bax表达2例，占20%；对照组患者及观察1组患者中bcl-2、bax均有较高表达，但观察2组患者中bcl-2、bax均显著减弱（P＜0.05）。

2.3细胞凋亡指数、bcl-2、bax三者间的关系：观察1组和对照组患者凋亡细胞的分布区域及表达bcl-2、bax蛋白的细胞分布区域则保持一致，且bcl-2、bax二者间的表发呈正相关（P＜0.05），在恶变部分凋亡细胞的分布区域及bcl-2、bax的表达方面则无明显相关性。

3　讨 论

细胞凋亡也叫程序化细胞死亡，其主要是指细胞核在特定条件下通过启动自身内部机制，同时通过一系列连续性变化所引发的主动性死亡的过程［1］。细胞凋亡不同于细胞坏死，细胞凋亡是一种主动过程，而非被动过程，细胞凋亡往往需涉及一系列的基因激活、表达及调控作用，其并非病理条件下的自体损伤现象，是为适应环境而主动争取的一种死亡过程［2］。细胞凋亡不仅可有效的维持个体自身的稳定性，同时在控制细胞增殖、分化及疾病的发生发展中同样发挥着难以取代的作用［3］。本次研究结果显示正常外阴皮肤及外应营养不良患者与外阴营养不良恶变患者相比其细胞凋亡指数均明显升高。这就表明外应营养不良的发生发展在一定程度上受细胞凋亡的影响，因而在细胞凋亡现象受到抑制时便极易引起外阴营养不良组织恶现象。所以，临床上通常将细胞凋亡指数作为判断生物学活性的有效依据。

bcl-2及bax属于正负凋亡调节基因，其中bcl-2可有效的对细胞凋亡现象进行抑制，且可有效的延长细胞生存周期，有助于增加细胞的积累率［4］。而bax本身即可诱导细胞凋亡，同时还可与bcl-2联合对细胞凋亡现象进行调控。临床研究表明bcl-2与bax间存在有较大的化学剂量关系，其比值在一定程度上决定了细胞接受信号后是否存活；通常在bcl-2含量较大时可对细胞凋亡现象进行抑制，而在bax含量较大时则可对细胞凋亡现象进行促进，而在两组计量相当时则不会抑制细胞凋亡［5］。本次研究结果显示组患者均在细胞凋亡及bcl-2、bax的表达现象，且观察1组患者的细胞凋亡指数及bcl-2、bax的表达方面均明显高于观察2组（P＜0.05）；bcl-2、bax二者间的表达呈正相关（P＜0.05），在恶变部分凋亡细胞的分布区域及bcl-2、bax的表达方面则无明显相关性。这就表明外阴营养不良的发生发展与恶变及细胞凋亡间有较大的关系，且bcl-2、bax发挥着一定的作用。

［1］方志启，吴刚，王贺彬，等.凋亡相关基因p53、bcl-2、baX在前列腺组织中的相关性［J］.中国临床解剖学杂志，2013，31（5）：560-563.

［2］周兰英，孙圣华，高健，等.吲哚美辛对COPD大鼠TNF-α与Bcl-2和Bax表达的影响［J］.现代生物医学进展，2012，12（6）：1044-1047.

［3］郭巍，陈美霓，王爱红，等.P53、Bcl-2和Bax在膀胱癌的表达及意义［J］.山西医科大学学报，2014，45（3）：180-183.

［4］余姚凤，何爱文，李章平，等.凋亡相关性microRNA及其靶基因蛋白在心肺复苏后大鼠心肌中的表达变化［J］.温州医学院学报，2013，43（6）：367-370.

［5］桂春，贾卫光，林梅，等.上调HCCR-2基因表达对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响［J］.临床医学工程，2012，19（12）：2117-2119.

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1671-8194（2015）012-0085-02