三黄鸡肾型传染性支气管炎和H9亚型禽流感的诊断

李凤玲 吕宗德

(南京市动物疫病预防控制中心,江苏南京 210001)

三黄鸡肾型传染性支气管炎和H9亚型禽流感的诊断

李凤玲 吕宗德

(南京市动物疫病预防控制中心,江苏南京 210001)

鸡肾型传染性支气管炎是由肾型传染性支气管炎病毒引起的鸡的一种以肾病变为主，呼吸道症状较重的急性高度接触性呼吸道传染病。与H9亚型禽流感混合感染时，导致病情加重，发病率和死亡率均增加。

传染性支气管炎 H9亚型禽流感 诊断

鸡传染性支气管炎临诊特征是呼吸困难、发出啰音、咳嗽、张口呼吸、打喷嚏，主要引起肾脏病变和生殖道病变，以肾型病变为主的鸡传染性支气管炎称为鸡肾型传染性支气管炎。该病的传染方式主要是通过空气传播，也可以通过饲料、饮水、垫料等传播。虽然该病毒对外界的抵抗力不强，但传染性极强，如果一只鸡或几只鸡发病，1～2天内会很快波及全群。H9亚型禽流感属于低致病性禽流感，可使鸡群出现轻度呼吸道症状，发病形式是流感继发气囊炎形式，主要表现部分鸡肿头肿脸、拉绿色粪便、有呼吸道症状、眼睛流泪、缩头闭眼等，经常与鸡传染性支气管炎病毒混合感染，管理不善或中后期必定出现严重的继发感染。近几年来，由于养殖业的迅速发展，本病呈逐年扩散流行发展的趋势，发病率可达100%，死亡率达10%～40%，给养殖业带来巨大的经济损失。

1 发病情况

2014年10月16日，南京一养鸡场购进5000羽鸡苗，按免疫程序相继进行了新城疫、禽流感（H5N1RE-6-7二价苗）、法氏囊、鸡球虫的免疫。2014年12月31日，鸡群出现呼吸道症状、精神沉郁，打堆，羽毛蓬松，缩颈垂翅，食量减少。在发病前期投喂多西环素和双黄连等药进行治疗但无明显效果。养殖场主认为是新城疫，于2015年1月5日进行新城疫免疫接种，导致鸡群死亡率猛增，截至2015年1月10日，鸡群死亡数已超过总饲养量的一半。针对上述情况，我们去现场进行了流行病学调查、剖检和现场采样，并将样品带回实验室检测。

2 临床症状

发病初期主要表现有轻微呼吸道症状，持续4d左右后呼吸道症状消失，出现表面上的康复，随着病情的发展整个鸡群出现伸颈张口喘气，精神沉郁，羽毛松乱，垂翅，流泪，流涎，眼肿，甩鼻（鼻腔中有黏液）甩头喷嚏，鸡冠发紫，鸡爪干瘪，持续排大量灰白色的水样或绿色粪便，并含有大量尿酸盐。白天听到啰音，夜间特别明显。最后病鸡因严重衰竭而死亡。

3 剖检变化

解剖发现，病死鸡鼻腔中有脓性的分泌物，气管黏膜有充血或出血，黏液较多，肺充血，气囊浑浊，含有黄色干酪性渗出物。肝大，易碎且发暗。肾脏明显肿大出血，肾小管内尿酸盐沉积而扩张，充血，蓄积大量白色尿酸盐。输尿管尿酸盐沉积而变粗。个别鸡只十二指肠有出血，空肠和盲肠有不同程度出血，盲肠扁桃体肿大，出血，泄殖腔充血。其他器官无明显病变。

4 诊断

4.1 病料涂片镜检

分别取病死鸡的心、肝、脾进行触片，革兰氏染色镜检，均未见可疑细菌。

4.2 细菌分离和培养特性观察

分别取上述病死鸡的肝、脾、肾、肺接种于营养肉汤、普通琼脂、麦康凯琼脂培养基上，37℃培养24 h。均未发现可疑菌落。

4.3 禽流感抗体监测

分别进行禽流感H5N1、H9N1、H7N9三种抗体的检测，采用血凝-血凝抑制试验方法，抗原和阳性血清均购自哈维科，检测结果显示，20份鸡血清H5N1禽流感抗体效价均大于lg24，H9N1禽流感抗体效价均大于lg24，H7N9抗体效价均为0。

4.4 新城疫抗体检测

采用血凝-血凝抑制试验方法，抗原和阳性血清购自青岛易邦公司。检测结果显示，20份鸡血清新城疫抗体效价均大于lg25。

4.5 分子生物学鉴定

用荧光PCR方法，分别进行了H5N1、H9N1、H7N9、新城疫、鸡传染性支气管炎5种病原的检测。所用试剂盒为上海之江生物科技股份有限公司病毒核酸测定试剂盒（荧光PCR法）分别对上述病死鸡的肝、脾、肾、肺、血液，上呼吸道和泄殖腔的分泌物进行了检测，结果显示，H5N1、H7N9、新城疫病原为阴性，H9N1和鸡传染性支气管炎病原为阳性。

根据流行病学情况调查，临床症状和病理变化观察，以及实验室检测，分析判定认为，该户鸡群发病的病原为H9亚型禽流感和鸡传染性支气管炎，鉴于鸡群肾脏病变明显，诊断为H9亚型禽流感和鸡传染性支气管炎混合感染。

4.6 结论

鸡肾型传染性支气管炎在鉴别诊断上应注意与新城疫、鸡传染性鼻炎、鸡传染性喉气管炎的病理变化有许多相似之处，应注意加以鉴别。鸡新城疫一般发病较严重，在雏鸡中常见到神经症状。鸡传染性喉气管炎很少发生于雏鸡，而传染性支气管炎则在雏鸡和成鸡均可以发病。该鸡场主将该病误诊为鸡新城疫，并进行新城疫疫苗紧急喷雾接种，由于鸡群本身呼吸困难，喷雾接种后，加重病情，在1 d内造成大批鸡群呼吸衰竭死亡。所以我们在鸡群发病后，一定要谨慎用药。

H9流感通常与其他病毒混感，病禽临床症状和病理变化比较复杂，造成诊断困难。另外针对H9继发感染引起“气囊炎”病例[1]，我们要正确理解病变形成的原因，不要误判肺脏病变病因。肺脏出现、充血、肿胀、出血、发灰黑、纤维素养肺炎是感染或混合感染后的一个严重的炎性病变。不要误认为是 “新病”。

造成本病发病的原因很多：饲养管理不当可导致该病发生，鸡日粮供给的营养不稳定，营养成分不全面，免疫应激，母源抗体低等都是致病因素。免疫水平低，密集的饲养，寒冷，过热，通风不良等因素可使鸡只抵抗力下降，蛋白和能量比例不当，饲料中蛋白质含量过高可能是发生本病的诱因。不良环境条件易发生本病，鸡舍不清洁，潮湿，通风不良也可导致舍内空气中氨及CO2浓度高，空气中含尘量大，温度或湿度偏高或偏低等。

5 防控措施

对传染性支气管炎和H9感染目前尚无有效的治疗方法，采取综合防控措施，平时要做好饲养管理、搞好环境卫生、消毒工作、加强通风换气、适当提高舍温2℃～3℃、适当的密度等可以减少传染病的发生，坚持“全进全出”饲养方式和避免多日龄混养。引进无传染性支气管炎病疫情鸡场的鸡苗，搞好雏鸡饲养管理，防止过于拥挤，注意保温，适当补充雏鸡日粮中的维生素和矿物质。

制定合理的免疫程序，做好免疫接种是预防本病的重要措施，疫苗接种是目前预防病毒病的一项主要措施。发病时可以采取紧急免疫鸡传染性支气管炎和H9二联苗。提高母源抗体也是预防本病的基本有效措施，为了使种鸡能将母源抗体传递给雏鸡，需要对种鸡重复免疫，在产蛋期10～12周/1次，以后雏鸡才能获得一致的母源抗体。人们常用中西医结合的对症疗法[2]，由于实际生产中鸡群常并发细菌性疾病，故采用一些抗菌药物有时显得有效。对肾病变型传染性支气管炎的病鸡，有人采用口服补液盐、0.5%碳酸氢钠、维生素C等药物投喂能起到一定的效果。

[1] 朱艳平，郭东光，岳锋，等.鸡传染性支气管炎病毒S1基因抗原区的原核表达及鉴定[J].中国畜牧兽医，2014，（6）：55-59.

[2] 李广兴，杜威威，韩溪，等.传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究[J].东北农业大学学报，2014，（10）：57-63.

李凤玲，女，硕士，现在南京市动物疫病预防控制中心工作。