李启芳
(青海省海南州贵南县茫曲镇兽医站,青海贵南 813100)
猪链球菌病的诊断报告
李启芳
(青海省海南州贵南县茫曲镇兽医站,青海贵南 813100)
2010年5~6月间,贵南县某良种饲养场的种猪发生严重疫病,以脑膜炎、淋巴结脓肿、关节炎为主要临床症状。
该饲养场共饲养新淮猪418头,其中,饲养小猪258头,种公猪6头,肥猪39头,架子猪50头,繁殖母猪65头。在5~6月间,饲养场先后发病101头,发病率为24.1%,死亡71头,致死率为70.2%。疫病主要侵害小猪,发病94头,发病率36.4%,其次是公猪16%,再次是架子猪12%,繁殖母猪及肥育猪未见发病。
患猪体温升高,精神萎靡,食欲减退和废绝;呼吸增数,有浆液、黏性至脓性分泌物从鼻腔流出;病猪体表淋巴结比日常普通淋巴结肿大约3倍;发病初期一肢或两肢(多为后肢)膝关节逐渐出现红肿,触碰膝关节会有疼痛,随着病情深入,肿胀会逐步增大并且质地由硬变得软,且有波动感,直到破溃后流出黄白色浓汁,此时见病猪喜卧,行走时跛行,步态蹒跚,重则卧地不起,最后衰竭死亡;少部分病例表现神经症状,颈部强直,角弓反张,颤抖,四肢游动。病程长短不等,一般5~7 d,最长达1个月以上。康复猪只生长发育慢,往往成为僵猪。
剖检病猪可见体表淋巴结脓肿,包括颌下、颈部、肩前、腹股沟等,里面有黄白色脓汁或者干酪样物质,部分病例有灰白色坏死灶,颌下淋巴结周围组织胶样变性;一肢或两肢关节肿胀,内有多量脓汁;胸腔、腹腔积液混浊,有大量黄白色纤维素沉着;气管、支气管内有多量带泡沫的液体,肺有暗红色充血、出血斑点;肾脏略肿大;软脑膜有弥漫性出血斑点。
4.1 涂片检查
用淋巴结脓汁、脾脏、肝脏、胸、腹腔积液涂片,革兰氏染色显微镜检查,均见形态一致革兰氏阳性球菌,呈单个或两个排列,少数为3~4个的短链。用液体培养物涂片染色检查狗崽子单个、双个短链或20~30个菌体的链状排列。固体培养物涂片检查呈单个、双个或7~8个菌体的链状排列的球菌。
4.2 分离培养
用上述病料分别种于鲜血琼脂、普通琼脂、血清肉汤培养基中,37℃培养,结果鲜血琼脂培养基上12 h就见到针尖状小菌落,圆形,湿润,光滑,灰白色,菌落周围有明显的完全浴血环;浴血环直径3~4 mm。普通琼脂平板上能生长,菌落灰色,露滴状,光滑,边缘整齐。血清肉汤中培养,生长良好,24 h观察呈均匀一致辞的轻度混浊,液面无菌膜,管底形成黏性沉淀物;普通肉汤中亦能生长,24 h后观察呈均匀一致的轻微混浊,液面无菌膜,管底有少量黏性物沉着。
4.3 生化鉴定
发酵葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖产酸不产气;不发酵菊糖、木糖、山梨醇、甘露醇;甲基红试验、胆汁溶解试验、亚甲蓝还原试验阳性;不能在6.5%氯化钠液中生长。
4.4 试验动物接种
用血清肉汤培养物腹腔注射小白鼠2只,0.5 ml/只;对照组2只各接种生理盐水0.5 ml。结果试验组1只小白鼠于接种21 h后死亡。另1只于接种24 h后死亡。取死亡的小白鼠肝、脾组织及腹水等涂片检查及培养后,均见到与接种病料相同的链状球菌。对照组健康存活。
4.5 回归动物接种
引入2~3月龄健康猪2头,饲养观察14 d无异常后,分别接种(腹腔)小白鼠脏器混悬液20 ml和血清琼脂培养物10 ml。结果脏器混悬液接种的1号猪于18 h后发病,主要症状为体温升高至41℃,稽留,持续18 h后下降。食欲废绝,呼吸增数,52 h后死亡。剖检见纤维素性腹膜炎和出血性败血症状。取脏器培养后,回收到与病料相同的链状球菌。接种血清培养物的2号猪,于48 h后发病,有体温升高,精神沉郁,食欲减退,眼结膜潮红充血,大便干燥等症状,52 h后用青霉素80万IU、链霉素100万IU,肌肉注射,2次/d,连续3 d后治愈。
从流行病学、临床症状、解剖变化以及实验室检查结果,确诊这次红河多呈慢性经过,病变主要表现为淋巴结化眼、脑膜炎、关节炎的事实及病原生化鉴定,认为本病的病原体是E群链球菌。