蒙医温针疗法对哮喘大鼠模型病理学改变的观察△

秀 兰 阿古拉

(1.北京中医药大学基础医学院在读博士研究生，北京 100029;2.内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028001;3.内蒙古医科大学，内蒙古 呼和浩特 010010)

支气管哮喘，是一种发生频率极高的呼吸系统疾病，这类慢性气道炎症由肥大细胞、T 细胞及嗜酸性粒细胞等多种细胞及其成分直接或间接参与的气道慢性非特异性炎症。支气管哮喘是严重危害人民群众健康的常见病，多发病。根据世卫组织统计，全球哮喘患者已经突破3 亿以上人，且儿童的发病率较高，21 世纪中叶之后以老年人群中哮喘发病率亦呈上升趋势。数十年来，对支气管哮喘的治疗进展缓慢，在现阶段，温针防治哮喘的临床研报道日益增多［1］;我们在临床上采用温针治疗哮喘，取得了较好疗效。目前临床多采用激素(地塞米松)可缓解哮喘临床症状，目前认为地塞米松影响Eos(嗜酸性粒细胞)浸润的主要机制为抑制Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化和诱导Eos(嗜酸性粒细胞)凋亡。地塞米松可作为多种炎症介质释放的抑制剂，而其中许多介质可诱导Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化，如PAF(血小板活化因子)、IL-5(白介素-5)等。上皮细胞是Eos(嗜酸性粒细胞)趋化因子的主要来源［2］，亦是激素的主要IE 细胞，其可使上皮细胞因子的表达显著下降。而温针治疗的干预机理目前主要机制为抑制Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化和诱导Eos(嗜酸性粒细胞)凋亡有关，温针治疗支气管哮喘机理与激素治疗哮喘相似，尚待今后进一步的研究。

1 材料与方法

1.1 实验动物：由昆明医学院动物实验中心提供的体重(250 ～300)g 左右的健康大鼠，雌雄各半，共40 只。随机分成正常对照组(空白组)，阳性对照组(模型组)，温针组(治疗组)，西药组(地塞米松组)共4 组，每组各10 只。

1.2 材料

1.2.1 主要试剂：卵清白蛋(OVA)(美国Sigma 公司)，水合氯醛：天津市科密欧化学试剂有限公司;40%甲醛：广州化学试剂厂;1%盐酸：广州化学试剂厂;1%稀氨水：广州化学品试剂厂;二甲苯：天津市富宇精细化工有限责任公司;无水磷酸氧二钠：广州市番禹强化工厂;PBS 缓冲液：赛默飞世尔生物化学制品有限公司;自制10%中性缓冲福尔马林固定液：10ml 40%甲醛溶液 + 90ml PBS 缓冲液(PH =7.2);其余试剂均化验室提供。

1.2.2 主要仪器设备：医用超声雾化器(CSW)1AB 型雾化器，广州汕头光电子研究所生产)，玻璃钟罩，注射器;JA1203N 型分析天平：上海精密科学仪器有限责任公司;电子天平，型号：BL150/cl;莱卡切片机Leica RM2135;光学显微镜Olympus U- PMTVC;尼康D90 单反摄像机(Nikon);MLY-Ⅰ型蒙医疗术温针仪(内蒙古医学院蒙医药学院研制，专利号ZL201120058078.0);特制蒙医银针(0.5mm×30mm，内蒙古元阳中蒙医科技开发有限责任公司提供)。

1.3 实验步骤

1.3.1 参照OVA 致敏法制备大鼠哮喘模型［2］，将40 只健康大鼠随机分为空白组、阳性对照组(模型组)、温针组(治疗组)、西药组(地塞米松组)，每组10 只。用10%的卵清白蛋白生理盐水1ml 腹腔注射，2 周后将致敏大鼠放入半密闭的玻璃钟罩内，以超声雾化器喷1%的卵清白蛋白溶液雾化吸入20min，以大鼠腹肌出现明显收缩(用力呼吸的标志)，呼吸频率增快、鼻翼煽动为阳性，连续14 天，每天1次，。阳性对照组、温针组，西药组均按此方法复制哮喘大鼠模型。

1.3.2 穴位选择：穴位的定位参照《蒙医传统疗法》赫依穴、母肺穴、子肺穴分别取第1、4、5 胸椎上凹正中处。

1.3.3 实验方法

1.3.3.1 空白组：不给予任何处理，至第30 天开始予蒸馏水2ml/只灌胃。

1.3.3.2 阳性对照组(模型组)：制备哮喘气道重建模型，使大鼠处于致敏状态14 天。自第15 天起幵始雾化吸入1%卵清蛋白生理盐水溶液以激发支气管哮喘，隔日1 次，每次激发时间为20 分钟。

1.3.3.3 治疗组(温针组)：哮喘气道重塑模型大鼠，于注射抗原液第15 天开始温针刺激，每次温针治疗均在雾化前进行。穴位选取“赫依穴”“母肺穴”“子肺穴”，将大鼠固定后，用特制银针(直径0.5mm，长度3 cm)斜刺后，再接蒙医温针仪，电流强度为100mA，温度为40℃，留针15min 隔日1 次，7 次1 疗程，2 疗程后取材检验。

1.3.3.4 西药组(地塞米松组)：每次雾化前30 分钟给予地塞米松0.5 mg/kg 腹腔内注射，其佘均同模型组。

1.3.4 取材：实验结束后以10%水合氯醛(30mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，每组均迅速解剖截取上肺部组织进行固定后送病理科做切片。

2 结 果

各组大鼠支气管肺组织石蜡切片病理观察结果表明［3］：光学显微镜下观察发现，正常组(空白组)大鼠支气管-肺组织各层结构清晰，黏膜层下未见明显炎症细胞和嗜酸性粒细胞浸润。阳性对照组(模型组)［4］支气管-肺组织黏膜层下有明显炎症细胞浸润及嗜酸性粒细胞浸润，黏膜层及黏膜下有水肿，少量充血。治疗组(温针组)和西药组(地塞米松组)大鼠支气管一肺组织结构较清晰，黏膜及黏膜下层充血、水肿明显减轻，黏膜层下可见少量炎症细胞及嗜酸性粒细胞浸润。

3 讨 论

支气管哮喘从症侯分析属于蒙医“赫依”性疾病范畴内［5］。是由于长期环境污染及气候的骤变等诱因导致三素失去自有的生理平衡，既而、赫依(气)的功能紊乱而发本病。治宜以调体素，行赫依(气)为总则。以蒙医学理论赫依(气)具有主司心灵开窍、五官清晰、促发欲望，具有调节希拉与巴达干的功能活动的作用。而赫依(气)的正常生理功能失调是本病的主要致病因素。

蒙医温针疗术是一种行之有效的外治方法［6］，其结合现代电子技术研制而成的温针仪，可以达到传统蒙医温针的作用。通过体外穴位刺激后相关脏腑功能得以恢复。具有改善气血循行、调节赫依、提高机体免疫功能，激发调动和增强机体的抗病能力很好的抗炎等作用。阿古拉［7］等研究的蒙医温针可对足肿胀炎症模型大鼠明显减轻作用，表明蒙医温针可明显抗炎作用。

通过实验，温针组和西药组大鼠支气管一肺组织和模型组比较结构较清晰，黏膜及黏膜下层充血、水肿明显减轻，黏膜层下面可见少量炎症细胞和嗜酸性粒细胞浸润，而温针组的炎性细胞浸润情况较西药组(地塞米松组)更为减轻。说明我们釆用的温针、及地塞米松(西药)干预后均能使EOS(嗜酸性粒细胞)的浸润明显减轻，而温针的作用更为明显。目前认为地塞米松类影药物响Eos(嗜酸性粒细胞)浸润的主要机制为抑制Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化和诱导嗜酸性粒细胞凋亡。地塞米松可作为多种炎症介质释放的抑制剂，而其中许多介质可诱导Eos(嗜酸性粒细胞)的趋化，如PAF(血小板活性因子)和IL-5(白介素-5)等。上皮细胞是Eos(嗜酸性粒细胞)趋化因子的主要来源，亦是激素的主要IE 细胞，其可使上皮细胞因子的表达明显下调。而温针治疗支气管哮喘机理有可能与激素治疗哮喘相似，尚待今后进一步的研究。

［1］孙滨.哮喘的发病机理与治疗进展［J］. 中华结核和呼吸杂志，1994，(4)：197

［2］刘旭，张爱玲. 血小板活化因子病理、生理学研究进展［J］.国际检验医学杂志，2008，8，29(8)：710-712.

［3］陈永辉，王民集. 支气管哮喘的中西医诊断与治疗［M］.北京：中国医药科技出版社，2008，34.

［4］马萍，邪杰，闫玉文. 过敏性支气管哮喘动物模型研究现状［J］.武警医学院学报，2010，19 (8)：677-680.

［5］安官布，金玉等.蒙医学概述［M］.赤峰：内蒙古科学技术出版社，1995，11：13-14.

［6］博·阿古拉. 蒙医传统疗法大成〔M〕. 赤峰：内蒙古科学技术出版社，2000.62.

［7］阿古拉、吴七柱，等. 蒙医温针对炎症大鼠抗炎镇痛作用研究〔J〕中国民族医药杂志，2010，11(11)：41-43