利奈唑胺注射液含量测定方法验证

张婷

【摘 要】 目的：考察利奈唑胺注射液的含量检验方法是否能准确、可靠，并获得客观实际的数据或结果。方法：按照利奈唑胺注射液质量标准及中国药典的要求对利奈唑胺注射液含量检验方法进行验证，本次验证的项目包括系统适用性、专属性、线性、准确度、重复性及范围、耐用性。结论：从分析的结果看，使用高效液相色谱法检测利奈唑胺注射液的含量具有很高的准确性，值得推广。

【关键词】 利奈唑胺注射液；方法学考察；含量测定

【中图分类号】R927 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）24-0017-02

利奈唑胺为恶唑烷酮类的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治疗由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐万古霉素的屎肠球菌引起的感染，包括并发的菌血症；获得性肺炎，致病菌为金黄色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）或肺炎链球菌（包括多药耐药的菌株MDRSP）；复杂性皮肤和皮肤软组织感染，包括未并发骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黄色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）、化脓链球菌或无乳链球菌引起[1-2]。因注射剂质量标准的严格要求，需按照规定的标准对其含量测定方法进行验证。

1 仪器与材料

11 仪器 高效液相色谱仪、容量瓶、电子天平、移液管。

12 试药与试剂 利奈唑胺对照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、异丙醇为色谱纯。

2 方法与结果

21 方法[3] 用十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相A为三氟醋酸水溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中），流动相B为三氟醋酸乙腈溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中），按表1进行线性梯度洗脱；检测波长为254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利奈唑胺对照品10mg，精密称定，用10%乙腈溶液制成每1ml中约含利奈唑胺01mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

22 结果

221 系统适用性试验 取系统适应性溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。出峰顺序依次为5-羟甲基糠醛、杂质A、Z4d、杂质B和利奈唑胺，利奈唑胺与相邻杂质峰的分离度符合要求。

222 方法专属性 精密量取溶剂、空白辅料溶液、对照品溶液、样品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；要求溶剂、空白辅料不干扰利奈唑胺含量的测定，供试品溶液主峰的保留时间应与利奈唑胺对照品一致。实验结果见表2。

表2 专属性实验结果

专属性标准要求试验结果

溶剂溶剂在利奈唑胺及其杂质峰位置应无干扰空白溶剂在利奈唑胺及其杂质峰位置无干扰

空白辅料空白辅料在利奈唑胺及其杂质峰位置应无干扰空白辅料在利奈唑胺及其杂质峰位置无干扰

利奈唑胺对照品——

利奈唑胺注射液各杂质与主峰应分离良好各杂质与主峰的分离度符合要求

结论检验方法的专属性符合要求

223 线性 精密称取利奈唑胺对照品005064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别精密量取对照品贮备液25、40、50、60、75ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀释至刻度，摇匀，配制成浓度分别为50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相当于供试品含量测定浓度线性范围的50%～150%的溶液。实验结果见表3。

结论：样品峰面积与浓度的相关系数均大于0999；样品峰面积与浓度作图为一条直线。

224 精密度 精密称取利奈唑胺对照品010048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超声溶解并定容摇匀，作为对照品贮备液；称取与处方量相应比例的辅料，置50ml容量瓶中，然后分别加入对照品贮备液40、50、60ml（每个浓度制备三份），加10%乙腈溶液适量，超声并稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液（相当于含量测试浓度的80%，100%，120%）。精密量取对照品贮备液50ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别精密量取上述供试品溶液和对照品溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。实验结果见表4。[FL）]

225 重复性及范围 取本品同一批样品9份，（约相当于含量供试品浓度的80%，100%，120%各3份），依含量测定方法进行测定。

226 耐用性 取含量测定项下的对照品溶液和供试品溶液置容量瓶中，室温放置，分别于0、2、4、8、24h取样，按上述色谱条件进样10μl，记录色谱图。结果见表6。

3 讨论

通过系统适用性试验、方法专属性、线性、准确度、重复性及范围和耐用性等六个方面对利奈唑胺注射液含量测定方法进行了研究。从验证结果来看，利奈唑胺与相邻杂质峰的分离度符合要求，检验方法的专属性良好。在50～150μg/ml浓度范围内呈良好线性关系（r=09999），在测试浓度的80%～120%范围内平均回收率为100%，基本完全回收。样品溶液在室温条件下放置24h稳定。综上证明：在我们的实验室条件下能达到方法规定的系统适用性要求；该方法对我公司生产的利奈唑胺注射液产品含量检测具有良好的专属性；我们实验条件下的能满足检测要求，对产品质量进行控制。

参考文献

[1] 王建国，陈建.临床治疗中利奈唑胺的药效学和药动学研究进展[J].中国抗生素杂志，2013，38（10）：730-736.

[2] 崔向丽，赵志刚.新型噁唑烷酮类抗生素利奈唑胺[J].中国新药杂志，2008，17（6）：530-533.

[3] 蔡剑秋.中华人民共和国药典[M].北京：化学工业出版社，1995.

【摘 要】 目的：考察利奈唑胺注射液的含量检验方法是否能准确、可靠，并获得客观实际的数据或结果。方法：按照利奈唑胺注射液质量标准及中国药典的要求对利奈唑胺注射液含量检验方法进行验证，本次验证的项目包括系统适用性、专属性、线性、准确度、重复性及范围、耐用性。结论：从分析的结果看，使用高效液相色谱法检测利奈唑胺注射液的含量具有很高的准确性，值得推广。

【关键词】 利奈唑胺注射液；方法学考察；含量测定

【中图分类号】R927 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）24-0017-02

利奈唑胺为恶唑烷酮类的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治疗由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐万古霉素的屎肠球菌引起的感染，包括并发的菌血症；获得性肺炎，致病菌为金黄色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）或肺炎链球菌（包括多药耐药的菌株MDRSP）；复杂性皮肤和皮肤软组织感染，包括未并发骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黄色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）、化脓链球菌或无乳链球菌引起[1-2]。因注射剂质量标准的严格要求，需按照规定的标准对其含量测定方法进行验证。

1 仪器与材料

11 仪器 高效液相色谱仪、容量瓶、电子天平、移液管。

12 试药与试剂 利奈唑胺对照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、异丙醇为色谱纯。

2 方法与结果

21 方法[3] 用十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相A为三氟醋酸水溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中），流动相B为三氟醋酸乙腈溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中），按表1进行线性梯度洗脱；检测波长为254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利奈唑胺对照品10mg，精密称定，用10%乙腈溶液制成每1ml中约含利奈唑胺01mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

22 结果

221 系统适用性试验 取系统适应性溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。出峰顺序依次为5-羟甲基糠醛、杂质A、Z4d、杂质B和利奈唑胺，利奈唑胺与相邻杂质峰的分离度符合要求。

222 方法专属性 精密量取溶剂、空白辅料溶液、对照品溶液、样品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；要求溶剂、空白辅料不干扰利奈唑胺含量的测定，供试品溶液主峰的保留时间应与利奈唑胺对照品一致。实验结果见表2。

表2 专属性实验结果

专属性标准要求试验结果

溶剂溶剂在利奈唑胺及其杂质峰位置应无干扰空白溶剂在利奈唑胺及其杂质峰位置无干扰

空白辅料空白辅料在利奈唑胺及其杂质峰位置应无干扰空白辅料在利奈唑胺及其杂质峰位置无干扰

利奈唑胺对照品——

利奈唑胺注射液各杂质与主峰应分离良好各杂质与主峰的分离度符合要求

结论检验方法的专属性符合要求

223 线性 精密称取利奈唑胺对照品005064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别精密量取对照品贮备液25、40、50、60、75ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀释至刻度，摇匀，配制成浓度分别为50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相当于供试品含量测定浓度线性范围的50%～150%的溶液。实验结果见表3。

结论：样品峰面积与浓度的相关系数均大于0999；样品峰面积与浓度作图为一条直线。

224 精密度 精密称取利奈唑胺对照品010048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超声溶解并定容摇匀，作为对照品贮备液；称取与处方量相应比例的辅料，置50ml容量瓶中，然后分别加入对照品贮备液40、50、60ml（每个浓度制备三份），加10%乙腈溶液适量，超声并稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液（相当于含量测试浓度的80%，100%，120%）。精密量取对照品贮备液50ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别精密量取上述供试品溶液和对照品溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。实验结果见表4。[FL）]

225 重复性及范围 取本品同一批样品9份，（约相当于含量供试品浓度的80%，100%，120%各3份），依含量测定方法进行测定。

226 耐用性 取含量测定项下的对照品溶液和供试品溶液置容量瓶中，室温放置，分别于0、2、4、8、24h取样，按上述色谱条件进样10μl，记录色谱图。结果见表6。

3 讨论

通过系统适用性试验、方法专属性、线性、准确度、重复性及范围和耐用性等六个方面对利奈唑胺注射液含量测定方法进行了研究。从验证结果来看，利奈唑胺与相邻杂质峰的分离度符合要求，检验方法的专属性良好。在50～150μg/ml浓度范围内呈良好线性关系（r=09999），在测试浓度的80%～120%范围内平均回收率为100%，基本完全回收。样品溶液在室温条件下放置24h稳定。综上证明：在我们的实验室条件下能达到方法规定的系统适用性要求；该方法对我公司生产的利奈唑胺注射液产品含量检测具有良好的专属性；我们实验条件下的能满足检测要求，对产品质量进行控制。

参考文献

[1] 王建国，陈建.临床治疗中利奈唑胺的药效学和药动学研究进展[J].中国抗生素杂志，2013，38（10）：730-736.

[2] 崔向丽，赵志刚.新型噁唑烷酮类抗生素利奈唑胺[J].中国新药杂志，2008，17（6）：530-533.

[3] 蔡剑秋.中华人民共和国药典[M].北京：化学工业出版社，1995.

【摘 要】 目的：考察利奈唑胺注射液的含量检验方法是否能准确、可靠，并获得客观实际的数据或结果。方法：按照利奈唑胺注射液质量标准及中国药典的要求对利奈唑胺注射液含量检验方法进行验证，本次验证的项目包括系统适用性、专属性、线性、准确度、重复性及范围、耐用性。结论：从分析的结果看，使用高效液相色谱法检测利奈唑胺注射液的含量具有很高的准确性，值得推广。

【关键词】 利奈唑胺注射液；方法学考察；含量测定

【中图分类号】R927 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）24-0017-02

利奈唑胺为恶唑烷酮类的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治疗由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐万古霉素的屎肠球菌引起的感染，包括并发的菌血症；获得性肺炎，致病菌为金黄色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）或肺炎链球菌（包括多药耐药的菌株MDRSP）；复杂性皮肤和皮肤软组织感染，包括未并发骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黄色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）、化脓链球菌或无乳链球菌引起[1-2]。因注射剂质量标准的严格要求，需按照规定的标准对其含量测定方法进行验证。

1 仪器与材料

11 仪器 高效液相色谱仪、容量瓶、电子天平、移液管。

12 试药与试剂 利奈唑胺对照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、异丙醇为色谱纯。

2 方法与结果

21 方法[3] 用十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相A为三氟醋酸水溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中），流动相B为三氟醋酸乙腈溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中），按表1进行线性梯度洗脱；检测波长为254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利奈唑胺对照品10mg，精密称定，用10%乙腈溶液制成每1ml中约含利奈唑胺01mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

22 结果

221 系统适用性试验 取系统适应性溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。出峰顺序依次为5-羟甲基糠醛、杂质A、Z4d、杂质B和利奈唑胺，利奈唑胺与相邻杂质峰的分离度符合要求。

222 方法专属性 精密量取溶剂、空白辅料溶液、对照品溶液、样品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；要求溶剂、空白辅料不干扰利奈唑胺含量的测定，供试品溶液主峰的保留时间应与利奈唑胺对照品一致。实验结果见表2。

表2 专属性实验结果

专属性标准要求试验结果

溶剂溶剂在利奈唑胺及其杂质峰位置应无干扰空白溶剂在利奈唑胺及其杂质峰位置无干扰

空白辅料空白辅料在利奈唑胺及其杂质峰位置应无干扰空白辅料在利奈唑胺及其杂质峰位置无干扰

利奈唑胺对照品——

利奈唑胺注射液各杂质与主峰应分离良好各杂质与主峰的分离度符合要求

结论检验方法的专属性符合要求

223 线性 精密称取利奈唑胺对照品005064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别精密量取对照品贮备液25、40、50、60、75ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀释至刻度，摇匀，配制成浓度分别为50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相当于供试品含量测定浓度线性范围的50%～150%的溶液。实验结果见表3。

结论：样品峰面积与浓度的相关系数均大于0999；样品峰面积与浓度作图为一条直线。

224 精密度 精密称取利奈唑胺对照品010048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超声溶解并定容摇匀，作为对照品贮备液；称取与处方量相应比例的辅料，置50ml容量瓶中，然后分别加入对照品贮备液40、50、60ml（每个浓度制备三份），加10%乙腈溶液适量，超声并稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液（相当于含量测试浓度的80%，100%，120%）。精密量取对照品贮备液50ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别精密量取上述供试品溶液和对照品溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。实验结果见表4。[FL）]

225 重复性及范围 取本品同一批样品9份，（约相当于含量供试品浓度的80%，100%，120%各3份），依含量测定方法进行测定。

226 耐用性 取含量测定项下的对照品溶液和供试品溶液置容量瓶中，室温放置，分别于0、2、4、8、24h取样，按上述色谱条件进样10μl，记录色谱图。结果见表6。

3 讨论

通过系统适用性试验、方法专属性、线性、准确度、重复性及范围和耐用性等六个方面对利奈唑胺注射液含量测定方法进行了研究。从验证结果来看，利奈唑胺与相邻杂质峰的分离度符合要求，检验方法的专属性良好。在50～150μg/ml浓度范围内呈良好线性关系（r=09999），在测试浓度的80%～120%范围内平均回收率为100%，基本完全回收。样品溶液在室温条件下放置24h稳定。综上证明：在我们的实验室条件下能达到方法规定的系统适用性要求；该方法对我公司生产的利奈唑胺注射液产品含量检测具有良好的专属性；我们实验条件下的能满足检测要求，对产品质量进行控制。

参考文献

[1] 王建国，陈建.临床治疗中利奈唑胺的药效学和药动学研究进展[J].中国抗生素杂志，2013，38（10）：730-736.

[2] 崔向丽，赵志刚.新型噁唑烷酮类抗生素利奈唑胺[J].中国新药杂志，2008，17（6）：530-533.

[3] 蔡剑秋.中华人民共和国药典[M].北京：化学工业出版社，1995.