鸡内金的不同炮制品中多糖含量比较※

2015-01-12 01:09:57金伶佳贾天柱
中国中医药现代远程教育 2015年20期
关键词:生品鸡内金苯酚

金伶佳 贾天柱

鸡内金的不同炮制品中多糖含量比较※

金伶佳 贾天柱*

(辽宁省大连市卫生计生培训中心,大连1 1 6021)

目的对鸡内金中的多糖测定方法进行研究,比较不同炮制品中多糖含量。方法通过苯酚-硫酸比色法对鸡内金不同炮制中的多糖含量结果进行了分析比较。结果鸡内金不同炮制品总多糖含量,砂烫鸡内金>生品鸡内金>微波鸡内金。结论生品鸡内金经炮制后的砂烫炮制品中的总多糖含量要比生品及微波炮制品都高。

鸡内金;多糖;苯酚-硫酸比色法;中药炮制

鸡内金为雉科(Phasianidae)家禽多种鸡Gallus-gallusdomesticus Brisson的干燥胃内壁皮层,是一常用中药。临床上主要用于治疗消化不良、小儿遗尿等。据有关报道,鸡内金中含有多糖,鸡内金提取物与碱性酒石酸铜试液反应,显蓝紫色;与浓硫酸和蒽酮反应,溶液呈蓝绿色。说明提取物中含多糖。现就针对鸡内金中含有多糖,进行含量测定,讨论不同炮制品中的多糖含量,并比较它们之间的变化。

1 实验部分

1.1 仪器与材料

1.1.1 仪器UV-3000紫外-可见分光光度计(日本岛津);型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);800型离心沉淀器(上海手术器械厂);KW-200B型高速药物粉碎机(天津泰斯特仪器厂)。

1.1.2 试剂鸡内金(购于辽宁省大连市瓦房店连城食品有限公司),乙醇、硫酸等试剂均为分析纯,苯酚(AR.重蒸后使用),实验用水为蒸馏水。

1.1.3 样品制备生品鸡内金:鸡内金(购于辽宁省大连市瓦房店连城食品有限公司),按05版药典鉴定为雉科动物家鸡(Gallus gallus domesticus Brisson)的砂囊内壁。

砂烫品:取鸡内金生品30 g,向锅内加入砂量1200 G,在锅底温度为210℃时,分别炒制60 S后出锅,放凉,取生品鸡内金15 g,粉碎,过40目筛,加到至圆底烧瓶内,再加入100 FL蒸馏水,在温度90℃,回流,2 H后取出,放凉,用抽滤器过滤,后定容到100 FL容量瓶中,备用。

微波品:先将药材鸡内金30 G净选,拣去杂质,然后置于不锈钢托盘上(不用大小分档),均匀摊开,厚度2~3 cm。然后将微波炉的温度定位于高火档当温度指针升至规定的温度时,把摊好鸡内金的不锈钢托盘置于烤箱中,1.5 FIN即可关掉电源,取出不锈钢托盘。此时鸡内金已呈黄白色至焦黄色并鼓起,具有焦香气。

1.4 鸡内金样品处理精密称定鸡内金三种样品各1 g,置10 ml具容试管中,加纯净水至5 ml,放到振摇器中,振摇10分钟,使其药物与溶液充分混合,然后将其具容试管于可调节温度的电热炉上加热,加速反应10分钟,取出,离心20分钟,取出,取其三种样品的上清液,加入一定量的蛋白质降解剂,摇匀,加入冰袋,放置冰箱,备用。

2 方法与结果

2.1 苯酚试液的配制使用精密天枰称取苯酚10 mL,加水190 ml溶解后,置于棕色试剂瓶中,得5%苯酚液,备用。

2.2 标准曲线的制备吸取1000 mg/L葡萄糖溶液2 mL,4 mL,6 mL,8 mL,10 mL置于50 mL容量瓶定容至50 mL。精密吸取该溶液各2 ml,分别置于具塞刻度试管中,分别加入1 ml苯酚溶液,摇匀,加98%浓硫酸5.0 mL,摇匀,放置5分钟,置70℃水浴锅中保温10分钟。取出后迅速冷却至室温。在490 nm波长处测定吸收度,以体积为横坐标,以吸收度为纵坐标,将上述数据作回归方程:Y=1.005X,r=0.9993。结果见表1。

表1 鸡内金在不同多糖加入量下的蛋白质含量

2.3 稳定性试验采用苯酚-硫酸法测定,1 h之内鸡内金同一样品液吸收度值无明显变化,RSD= 2.798424%,实验结果说明此实验条件下样品显色稳定性较好。

2.4 精密度试验采用苯酚-硫酸法测定,鸡内金1 mL同一样品液在490 nm处吸收度测定,RSD= 2.798424%,实验结果说明此实验条件下样品精密度较好。

2.5 重复性试验采用苯酚-硫酸法测定,10份1 mL鸡内金同一样品液在490 nm处吸收度测定,RSD=0.277315%。实验结果说明此实验条件下样品重复性较好。

2.6 加样回收率试验采用10份1 mL鸡内金同一样品液,分别加入葡萄糖标准液0.01 mL,按照上述方法进行测定,测得加样回收率为102.04%(n=6)。实验结果说明此实验条件下样品回收率高。

2.7 鸡内金不同炮制品总多糖含量测定采用鸡内金不同炮制品提取液各1.00 mL,按标准曲线项下方法操作测定总多糖含量。结果见表2。

表2 鸡内金不同炮制品中总多糖含量测定

3 结论

苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,是根据多糖在硫酸的作用下先水解成单糖分子,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后和苯酚作用生成橙黄色的化合物,再以比色法测定,在测定多糖含量时。以葡萄糖等单糖作为标准品,测定结果也是以单糖表示多糖的含量。该方法操作简单,快捷,可以客观考察药物中总多糖含量的变化。为总糖分测定提供一定的科学依据。鸡内金不同炮制品中的总多糖含量测定的结果显示不同炮制品中的总多糖含量存在一定的差异;有上述图表所知:鸡内金不同炮制品总多糖含量,砂烫鸡内金>生品鸡内金>微波鸡内金;从结果可见,生品鸡内金经炮制后的砂烫炮制品中的总多糖含量要比生品及微波炮制品都高。在一定程度上可以说明:经砂烫炮制后,鸡内金中的总多糖含量增加。这也可为下一步的药效学研究提供一定的研究基础。

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JIN Lingjia, JIA Tianzhu(Health Family Planning Training Center, Liaoning Province, Dalian 116021, China)

ObjectiveTo study the determination method ofpolysaccharide of inner membrane of chicken gizzard,and to compare polysaccharide content in different processed products.MethodsThe polysaccharide content in different processed products of inner membrane of chicken gizzard was analyzed and compared by phenol-sulfuric acid colorimetry.ResultsThe total polysaccharide content of different processed products of inner membrane of chicken gizzard of heated with sand was more than raw products which was more than microwave processed products.ConclusionThe total polysaccharide content of sand hot processed products was more than raw product and microwave processed products.

inner membrane of chicken gizzard;polysaccharide;phenol-sulfuric acid colorimetry;processing

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.20.076

1672-2779(2015)-20-0146-02

:杨杰本文校对:贾天柱

2015-08-13)

国家“十一五”科技支撑课题(No:2010ZX 09401-105A)

*通讯作者:jinlingjia19841003@126.com

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