细胞因子TNF-a、IL-6在输卵管性不孕患者中的表达

王一斌 黄洁贞 林耀华 叶 明 黄 峥

(广州市妇女儿童医疗中心，广东广州510623)

我国不孕症的发病率约为7～10%，其中输卵管性不孕是引起女性不孕的重要因素。通过检测肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)在输卵管性不孕与非输卵管性不孕患者盆腔液中表达的变化，来初步探讨TNF-a、IL-6等细胞因子在输卵管性不孕中作用。现报导如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年9月至2013年8月在本院住院手术治疗的不孕患者。术前子宫输卵管碘油造影提示输卵管堵塞，并排除多囊卵巢、高泌乳素血症等内分泌因素及盆腔子宫内膜异位症、盆腔结核等疾病，无宫腹腔镜手术禁忌证，最后经腹腔镜检查证实为盆腔炎性疾病后遗症所致不孕的患者共50例，年龄25～35岁，中位年龄28岁。对照组选择同期住院手术治疗的子宫肌瘤、卵巢良性肿瘤患者，且术中确认所选患者无合并盆腔炎性疾病后遗症，共50例，年龄25～35岁，中位年龄29.5岁。剔除术中新发现盆腔子宫内膜异位症患者，不孕组入组45例，对照组入组47例，两组一般情况比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2 方法

两组患者均行腹腔镜下手术。在腹腔镜直视下，吸管吸取子宫直肠陷凹及子宫膀胱陷凹腹腔液10 mL，以 2 000 r/min，离心 10 min，取上清液，置－20℃保存待测。采用酶联免疫法(Elisa法)，根据标准曲线计算腹腔液样本中TNF-a和IL-6的含量。

1.3 统计学方法

数据采用SPSS 13.0统计软件进行分析处理。计量资料的统计量用¯x±s表示，采用配对t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

不孕组腹腔液中检测到的TNF-a和IL-6的水平明显高于对照组，两者比较差异有统计学意义(t=2.03，P＜0.05;t=2.13，P＜0.05)，测定结果见表1。

表1 腹腔液中TNF-α和IL-6水平比较(±s，ng/L)

表1 腹腔液中TNF-α和IL-6水平比较(±s，ng/L)

注:与对照组 TNF-a比较，*P＜0.05;与对照组 IL-6 比较，#P＜0.05

组别 n TNF-α IL-6不孕组 45 178±40* 322±161#对照组 47 115±37 203±147

3 讨 论

输卵管微环境是精子卵子运输及其功能发挥、受精和早期胚胎发育等赖以生存的物质基础。输卵管液是输卵管微环境中最重要的组成部分，主要来自血浆渗液、输卵管黏膜上皮分泌物、子宫液、卵泡液等。输卵管液含有细胞因子、黏附分子、特异性糖蛋白、离子、氨基酸等多种物质，其合成、分泌和生物学活性受到体内各种激素，如孕激素、雌激素等影响［1］。输卵管液中各种成分对精子、卵子在输卵管内的迁移、停留和经历受精前的生理、生化改变及受精卵和胚胎的早期发育等都有相当的影响，其中细胞因子成分起到至关重要的作用［2-4］。大量研究表明，输卵管的功能与微环境的周期调节密切相关。任何导致输卵管微环境中物质变化及输卵管结构和功能的异常因素均可引起女性不孕。

TNF-a是由单核细胞、巨噬细胞产生的一种多效能的细胞因子，具有杀伤肿瘤、抗感染、促进细胞增殖及炎症介导的作用，其在生殖免疫中的作用取决于局部含量的高低以及与激素之间的内环境。体外实验研究发现，TNF-a能明显刺激局部合成和释放收缩相关性物质，如前列腺素(PG)、内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)等［5］。这些物质能直接促进血管平滑肌收缩，推测TNF-a很可能在滤泡期和排卵后期通过这些物质间接刺激输卵管平滑肌引发其强烈收缩，使配子迅速地转运到受精部位。在早期胚胎期TNF-a分泌增加，这可能又促进输卵管强烈收缩，从而确保胚胎在最佳时期进入子宫。提示TNF-a分泌异常可能影响配子及胚胎正常运输及发育，从而导致不孕症的发生。TNF-a亦是一种炎症因子，其参与了输卵管炎症过程。Maisey等［6］研究发现输卵管炎时输卵管液中TNF-a及TNF-a受体浓度增高，并级联放大，在抗感染同时造成组织损伤，其损伤程度与TNF-a的浓度成正比，从而影响胚胎的运输、配子及胚胎质量，容易导致不孕。Thorley等［7］研究发现，阻断TNF-a的产生可减轻输卵管炎中的输卵管损伤程度，进一步提示输卵管炎中输卵管的损伤部分由TNF-a介导。

IL-6是炎症反应的主要标志之一，具有多种生物活性，IL-6可能参与慢性炎症自身发展的病理生理过程，最终形成输卵管等局部组织粘连、促进肉芽纤维组织的生长。有研究发现，输卵管炎性不孕的病因不一定只由输卵管阻塞引起，还与IL-2、IL-6、IL-8等炎性介质有密切关系［8］。

本研究显示，输卵管性不孕患者中盆腔液的TNF-α和IL-6的含量明显高于非输卵管性不孕患者盆腔液中表达(P＜0.05)，提示 TNF-a、IL-6 等细胞因子作为一个调节因子参与了输卵管性不孕的发生。其产生机制可能为TNF-a的细胞毒作用及其刺激单核细胞、巨噬细胞和成纤维细胞等合成更多的IL-1、IL-6、IL-8以及 TNF-a等，促进炎症的反应，加重输卵管的损伤和盆腔局部的粘连，同时刺激成纤维细胞增殖，促进胶原酶释放等作用，参与炎症瘢痕形成，造成输卵管狭窄和阻塞等，从而造成不孕。

目前国内外大多学者认为输卵管炎性阻塞是引起不孕的主要原因之一，并通过物理方法、化学方法、生物方法来制作输卵管阻塞的动物模型，使其输卵管发生炎性反应，导致管腔被渗出液及坏死碎片闭塞引起输卵管堵塞［9］。故临床主要是采用腹腔镜联合宫腔镜，通过松解盆腔粘连、疏通输卵管梗阻，治疗因机械性原因造成的不孕。有文献报道，经腹腔镜输卵管整形术后2～3年内正常妊娠率31%～42%，有61.3%的病例经治疗后虽输卵管复通但未妊娠，甚至有5.4%的患者复通后发生异位妊娠。有研究发现，输卵管组织中IL-2和IL-6呈显著上升趋势，提示其在输卵管炎慢性反应阶段是一个重要的介质，在一定程度上反映了IL-2和IL-6与慢性输卵管炎的病变程度及继发不孕有关;研究过程中还发现输卵管内虽然有肉芽组织生成，输卵管管腔却不一定完全阻塞［8］。那么在经腹腔镜联合宫腔镜行输卵管整形复通术解除输卵管机械性不孕的同时，通过抑制对于TNF-a、IL-6等细胞因子的细胞毒性作用引起的不孕以及术后TNF-a、IL-6等细胞因子引起的再发输卵管粘连、梗阻所致不孕进行针对性治疗，可能改善经宫腔镜联合腹腔镜输卵管整形复通术的输卵管性不孕的妊娠结局。

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［9］黄艳娟，严 英，周伟生.生物方法制作输卵管炎性阻塞动物模型的研究进展.中华生物医学工程杂志，2010，16(6):597-599.