清肺化痰丸的质量标准研究

孙蓉+田婷婷+钱进

【摘 要】 目的：建立清肺化痰丸的质量标准。方法：采用薄层色谱法对制剂中的陈皮、枳壳、桔梗、麻黄、黄芩进行定性鉴别，并用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量。结果：定性鉴别方法能检出陈皮、枳壳、桔梗、麻黄、黄芩等药材;黄芩苷在0.1136～1.704μg 范围内，呈良好的线性关系（γ=0.99996），平均回收率为100.56%（RSD=1.91%）;结论：该方法简便、准确，重现性好，可用于清肺化痰丸的质量控制。

【关键词】 清肺化痰丸;质量标准;高效液相色谱法;黄芩苷

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2014）13-0016-03

清肺化痰丸由黄芩、桔梗、麻黄、甘草、枳壳、陈皮、苦杏仁等15味药组成，具有降气化痰、止咳平喘的功效，用于肺热咳嗽，痰多作喘，痰涎壅盛，肺气不畅等症。该制剂载于部颁中药成方制剂第十二册[1]，现行标准中仅有1项薄层鉴别，无含量测定，为了有效控制其内在质量，对处方中陈皮、枳壳、桔梗、麻黄、黄芩进行薄层色谱鉴别，采用高效液相法对黄芩中黄芩苷进行含量测定。经试验证明，该方法简便，结果准确，专属性好，可作为控制该制剂质量的方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器 美国Agilent1100高效液相色谱仪（四元泵），可变紫外检测器（G1314A VWD），TCM柱温控制系统，Agilent色谱工作站。

1.2 试药 黄芩苷（批号：110715-200815）、盐酸麻黄碱（批号：171241-201007）、陈皮（批号：120969-200507）、枳壳（批号：120981-201104）、黄芩苷（批号：110715-200514）、桔梗（批号：121028-200507）等对照品均购于中国药品生物制品检定所。甲醇为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其它试剂为分析纯。清肺化痰丸样品（水蜜丸，批号：111130、110549、110615、111218;大蜜丸，批号：110204、110910、111260）由昆明中药厂有限公司提供。阴性对照样品自制。

2 方法与结果

2.1 薄层鉴别

2.1.1 陈皮、枳壳的鉴别 取本品水蜜丸10g，研细，加水10ml，搅匀;或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土8g、水6ml，研匀，再加水15ml，超声处理15min，加乙酸乙酯30ml，搅匀，超声处理30min，倾出上清液，残渣再加乙酸乙酯15ml，超声处理10min，倾出上清液，合并上清液，用氨试液洗涤2次，每次15ml，再用水洗涤2次，每次15ml，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取陈皮对照药材、枳壳对照药材各0.5g，分别加乙酸乙酯20ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液。另分别取缺陈皮的阴性对照样品、缺枳壳的阴性对照样品、缺陈皮和枳壳的阴性对照样品，同供试品制备方法制得阴性对照溶液。按《中国药典》一部附录VI B进行薄层色谱试验，吸取供试品溶液及阴性对照液8～12μl、对照药材溶液各5μl，分别点于同一以含1%氢氧化钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮-乙酸乙酯（3∶1∶3）为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点，缺陈皮和枳壳的阴性对照无干扰。结果见图1、图2。

2.1.2 麻黄的鉴别 取本品水蜜丸10g，研细;或大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土6g，研匀，加浓氨溶液2ml，乙醚50ml，加热回流30min，滤过，滤液加盐酸乙醇液（1→20）4ml，摇匀，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液。另取缺麻黄的阴性对照样品，同供试品制备方法制得阴性对照溶液。按《中国药典》一部附录VI B进行薄层色谱试验，吸取供试品溶液及阴性对照液10～15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨水（20∶3.5∶0.5）为展开剂，展开，取出晾干，喷以0.5%茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图3。

2.1.3 桔梗的鉴别 取本品水蜜丸10g，研细;或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土4g，研匀，加正丁醇50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加30ml水微热溶解，用石油醚（60～90℃）洗涤2次，每次15ml，弃去醚液，水液加7%硫酸乙醇溶液10ml，加热回流3小时，放冷，用氯仿振摇提取2次，每次30ml，合并氯仿液，加水40ml洗涤，弃去洗液，氯仿液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取桔梗对照药材1g，加7%硫酸乙醇-水（1∶3）混合液20ml，加热回流3h，放冷，滤过，滤液用氯仿振摇提取2次，每次20ml，合并氯仿液，加水20ml洗涤，弃去洗液，氯仿液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。另取缺桔梗的阴性对照样品，同供试品制备方法制得阴性对照溶液。按《中国药典》一部附录VI B进行薄层色谱试验，吸取供试品溶液、阴性对照液、对照药材溶液各15～20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚（1∶1）为展开剂，展开，取出晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图4。

2.1.4 取本品水蜜丸6g，研细;或取大蜜丸9g，剪碎，加硅藻土4g，研匀，加乙醇15ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液。按《中国药典》一部附录VI B进行薄层色谱试验，吸取供试品溶液5～10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）为展开剂，薄层板置展开缸中预饱和15min，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇试液，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图5。endprint

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil ODS C18柱（4.0×250mm，5μm）;流动相：甲醇-0.3%磷酸（39∶61）;流速：1.000ml·min-1;检测波长：278nm;柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算不低于3000。此条件黄芩苷峰与其它组分均能达到较好分离，阴性对照样品对黄芩苷峰无干扰。见图6。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品水蜜丸适量，研细，取约0.3g，精密称定，或取大蜜丸适量，剪碎，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率160w，频率50KHz）30min，取出，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 取处方中除黄芩外的其他药材，按处方比例及制法和工艺要求制备缺黄芩的阴性样品，照含量测定项下供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.2.4 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.568mg的溶液，即得。

2.2.5 线性关系考察 精密取上述对照品溶液分别加甲醇稀释成浓度为11.36、22.72、45.44、113.6、170.4g·ml-1的对照品溶液。分别精密吸取上述溶液各10μl，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积值为纵坐标，黄芩苷（μg）进样量为横坐标作线性回归，绘制标准曲线，得回归方程为：Y=3322.39412X-26.30597（r=0.99996）。结果表明，黄芩苷在0.1136μg～1.704μg之间具有良好的线性关系。

2.2.6 精密度试验 分别精密吸取黄芩苷对照品溶液（45.44μg·ml-1）各10μl，按测定方法连续进样6次，测定黄芩苷峰面积。RSD为0.55%。

2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0、5、9、13h各进样10μl，测定峰面积值，RSD=0.87%，结果表明供试品溶液中黄芩苷在13h内稳定。

2.2.8 重复性试验 取批号为111218的清肺化痰丸，按照供试品制备方法分别制备9份供试品溶液，分别进样，结果测得黄芩苷含量分别为4.1027、4.2397、4.2173、4.0447、4.1742、4.0875、4.1020、4.0910、4.2249mg·g-1，黄芩苷平均含量为4.1427 mg·g-1， RSD为1.73%。

2.2.9 回收率试验 取已知含量的清肺化痰丸样品（批号：111218，黄芩苷含量为4.1427mg·g-1）9份，精密称定，分别添加浓度为0.568mg·ml-1的黄芩苷对照品溶液0.6、1.2、1.8ml，按含量测定方法测定黄芩苷含量，计算回收率，结果（见表1）表明，本方法准确度高。

2.2.10 耐用性试验 取清肺化痰丸同一批样品，照样品测定方法，进行耐用性试验。分别于270nm、278nm、285nm的波长测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.34%;分别于柱温为25℃、30℃、35℃时测定样品中黄芩苷含量，RSD为1.17%;分别于不同的流速（0.900、1.000、1.100ml·min-1）测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.52%;采用不同比例的流动相测定样品中的黄芩苷含量，RSD为0.80%;采用三种不同批号和厂牌的同类型色谱柱测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.96%。测定结果表明，本测定方法耐用性良好。

2.2.11 样品测定 取多个批号清肺化痰丸样品，按上述方法测定，结果见表2。

3 讨论

3.1 在陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别中，由于两者成份较相似，经多次试验，换用不同的提取方法及展开剂，均无法消除陈皮和枳壳的相互干扰，采用本文方法，缺陈皮和枳壳的双阴性对照样品无干扰，有一定质控意义，故采用。陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别，供试品溶液的制备方法曾采用：取本品加乙酸乙酯超声提取2次，提取液合并，加水洗涤，取乙酸乙酯液蒸干，加甲醇溶解作为供试品溶液，结果供试品色谱杂质较多，通道颜色较深，有时会遮住荧光斑点，影响特征斑点的检视;后改为将乙酸乙酯液加氨试液洗涤，结果供试液色谱杂质明显减少，特征斑点清晰、明显。薄层板比较了硅胶G板、和以含1%氢氧化钠溶液为黏合剂的硅胶G板，后者展开效果较好，故选用。

3.2 方中桔梗的薄层色谱鉴别，供试品溶液的制备方法曾比较了多种：曾参照《中国药典》[2]，加水-氯仿-盐酸（10∶10∶3）的混合溶液回流提取，但供试品色谱中目标斑点拖尾严重，不易检视;换用7%硫酸乙醇-水（1∶3）混合溶液回流提取，提取液用氯仿振摇萃取，氯仿液再加水洗涤，结果特征斑点圆整，对应良好，但萃取时溶液乳化严重，难以分层或分层时间很长;采用本文鉴别条件，萃取时易分层，供试品色谱中，对应斑点明显，杂质少，分离效果好，阴性无干扰。

3.3 对黄芩苷的甲醇溶液在190～500nm波长范围内进行扫描，黄芩苷在278nm和315nm处有最大吸收，经试验，清肺化痰丸中黄芩苷峰的分离度、对称性在278nm处较好，故选择278nm作为黄芩苷的检测波长。

3.4 含量测定试验中对供试品溶液的提取溶剂（甲醇、50%甲醇、70%乙醇）进行了研究。结果表明，50%甲醇、70%乙醇提取的黄芩苷含量较高，但以50%甲醇提取的黄芩苷峰分离度和峰形较好。对样品的提取时间进行比较试验，结果表明超声处理30min基本提取完全。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准（中药成方制剂第十二册）[S]. 1997.176.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

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2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil ODS C18柱（4.0×250mm，5μm）;流动相：甲醇-0.3%磷酸（39∶61）;流速：1.000ml·min-1;检测波长：278nm;柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算不低于3000。此条件黄芩苷峰与其它组分均能达到较好分离，阴性对照样品对黄芩苷峰无干扰。见图6。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品水蜜丸适量，研细，取约0.3g，精密称定，或取大蜜丸适量，剪碎，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率160w，频率50KHz）30min，取出，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 取处方中除黄芩外的其他药材，按处方比例及制法和工艺要求制备缺黄芩的阴性样品，照含量测定项下供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.2.4 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.568mg的溶液，即得。

2.2.5 线性关系考察 精密取上述对照品溶液分别加甲醇稀释成浓度为11.36、22.72、45.44、113.6、170.4g·ml-1的对照品溶液。分别精密吸取上述溶液各10μl，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积值为纵坐标，黄芩苷（μg）进样量为横坐标作线性回归，绘制标准曲线，得回归方程为：Y=3322.39412X-26.30597（r=0.99996）。结果表明，黄芩苷在0.1136μg～1.704μg之间具有良好的线性关系。

2.2.6 精密度试验 分别精密吸取黄芩苷对照品溶液（45.44μg·ml-1）各10μl，按测定方法连续进样6次，测定黄芩苷峰面积。RSD为0.55%。

2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0、5、9、13h各进样10μl，测定峰面积值，RSD=0.87%，结果表明供试品溶液中黄芩苷在13h内稳定。

2.2.8 重复性试验 取批号为111218的清肺化痰丸，按照供试品制备方法分别制备9份供试品溶液，分别进样，结果测得黄芩苷含量分别为4.1027、4.2397、4.2173、4.0447、4.1742、4.0875、4.1020、4.0910、4.2249mg·g-1，黄芩苷平均含量为4.1427 mg·g-1， RSD为1.73%。

2.2.9 回收率试验 取已知含量的清肺化痰丸样品（批号：111218，黄芩苷含量为4.1427mg·g-1）9份，精密称定，分别添加浓度为0.568mg·ml-1的黄芩苷对照品溶液0.6、1.2、1.8ml，按含量测定方法测定黄芩苷含量，计算回收率，结果（见表1）表明，本方法准确度高。

2.2.10 耐用性试验 取清肺化痰丸同一批样品，照样品测定方法，进行耐用性试验。分别于270nm、278nm、285nm的波长测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.34%;分别于柱温为25℃、30℃、35℃时测定样品中黄芩苷含量，RSD为1.17%;分别于不同的流速（0.900、1.000、1.100ml·min-1）测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.52%;采用不同比例的流动相测定样品中的黄芩苷含量，RSD为0.80%;采用三种不同批号和厂牌的同类型色谱柱测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.96%。测定结果表明，本测定方法耐用性良好。

2.2.11 样品测定 取多个批号清肺化痰丸样品，按上述方法测定，结果见表2。

3 讨论

3.1 在陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别中，由于两者成份较相似，经多次试验，换用不同的提取方法及展开剂，均无法消除陈皮和枳壳的相互干扰，采用本文方法，缺陈皮和枳壳的双阴性对照样品无干扰，有一定质控意义，故采用。陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别，供试品溶液的制备方法曾采用：取本品加乙酸乙酯超声提取2次，提取液合并，加水洗涤，取乙酸乙酯液蒸干，加甲醇溶解作为供试品溶液，结果供试品色谱杂质较多，通道颜色较深，有时会遮住荧光斑点，影响特征斑点的检视;后改为将乙酸乙酯液加氨试液洗涤，结果供试液色谱杂质明显减少，特征斑点清晰、明显。薄层板比较了硅胶G板、和以含1%氢氧化钠溶液为黏合剂的硅胶G板，后者展开效果较好，故选用。

3.2 方中桔梗的薄层色谱鉴别，供试品溶液的制备方法曾比较了多种：曾参照《中国药典》[2]，加水-氯仿-盐酸（10∶10∶3）的混合溶液回流提取，但供试品色谱中目标斑点拖尾严重，不易检视;换用7%硫酸乙醇-水（1∶3）混合溶液回流提取，提取液用氯仿振摇萃取，氯仿液再加水洗涤，结果特征斑点圆整，对应良好，但萃取时溶液乳化严重，难以分层或分层时间很长;采用本文鉴别条件，萃取时易分层，供试品色谱中，对应斑点明显，杂质少，分离效果好，阴性无干扰。

3.3 对黄芩苷的甲醇溶液在190～500nm波长范围内进行扫描，黄芩苷在278nm和315nm处有最大吸收，经试验，清肺化痰丸中黄芩苷峰的分离度、对称性在278nm处较好，故选择278nm作为黄芩苷的检测波长。

3.4 含量测定试验中对供试品溶液的提取溶剂（甲醇、50%甲醇、70%乙醇）进行了研究。结果表明，50%甲醇、70%乙醇提取的黄芩苷含量较高，但以50%甲醇提取的黄芩苷峰分离度和峰形较好。对样品的提取时间进行比较试验，结果表明超声处理30min基本提取完全。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准（中药成方制剂第十二册）[S]. 1997.176.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

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2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil ODS C18柱（4.0×250mm，5μm）;流动相：甲醇-0.3%磷酸（39∶61）;流速：1.000ml·min-1;检测波长：278nm;柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计算不低于3000。此条件黄芩苷峰与其它组分均能达到较好分离，阴性对照样品对黄芩苷峰无干扰。见图6。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品水蜜丸适量，研细，取约0.3g，精密称定，或取大蜜丸适量，剪碎，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率160w，频率50KHz）30min，取出，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 取处方中除黄芩外的其他药材，按处方比例及制法和工艺要求制备缺黄芩的阴性样品，照含量测定项下供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.2.4 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.568mg的溶液，即得。

2.2.5 线性关系考察 精密取上述对照品溶液分别加甲醇稀释成浓度为11.36、22.72、45.44、113.6、170.4g·ml-1的对照品溶液。分别精密吸取上述溶液各10μl，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积值为纵坐标，黄芩苷（μg）进样量为横坐标作线性回归，绘制标准曲线，得回归方程为：Y=3322.39412X-26.30597（r=0.99996）。结果表明，黄芩苷在0.1136μg～1.704μg之间具有良好的线性关系。

2.2.6 精密度试验 分别精密吸取黄芩苷对照品溶液（45.44μg·ml-1）各10μl，按测定方法连续进样6次，测定黄芩苷峰面积。RSD为0.55%。

2.2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0、5、9、13h各进样10μl，测定峰面积值，RSD=0.87%，结果表明供试品溶液中黄芩苷在13h内稳定。

2.2.8 重复性试验 取批号为111218的清肺化痰丸，按照供试品制备方法分别制备9份供试品溶液，分别进样，结果测得黄芩苷含量分别为4.1027、4.2397、4.2173、4.0447、4.1742、4.0875、4.1020、4.0910、4.2249mg·g-1，黄芩苷平均含量为4.1427 mg·g-1， RSD为1.73%。

2.2.9 回收率试验 取已知含量的清肺化痰丸样品（批号：111218，黄芩苷含量为4.1427mg·g-1）9份，精密称定，分别添加浓度为0.568mg·ml-1的黄芩苷对照品溶液0.6、1.2、1.8ml，按含量测定方法测定黄芩苷含量，计算回收率，结果（见表1）表明，本方法准确度高。

2.2.10 耐用性试验 取清肺化痰丸同一批样品，照样品测定方法，进行耐用性试验。分别于270nm、278nm、285nm的波长测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.34%;分别于柱温为25℃、30℃、35℃时测定样品中黄芩苷含量，RSD为1.17%;分别于不同的流速（0.900、1.000、1.100ml·min-1）测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.52%;采用不同比例的流动相测定样品中的黄芩苷含量，RSD为0.80%;采用三种不同批号和厂牌的同类型色谱柱测定样品中黄芩苷含量，RSD为0.96%。测定结果表明，本测定方法耐用性良好。

2.2.11 样品测定 取多个批号清肺化痰丸样品，按上述方法测定，结果见表2。

3 讨论

3.1 在陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别中，由于两者成份较相似，经多次试验，换用不同的提取方法及展开剂，均无法消除陈皮和枳壳的相互干扰，采用本文方法，缺陈皮和枳壳的双阴性对照样品无干扰，有一定质控意义，故采用。陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别，供试品溶液的制备方法曾采用：取本品加乙酸乙酯超声提取2次，提取液合并，加水洗涤，取乙酸乙酯液蒸干，加甲醇溶解作为供试品溶液，结果供试品色谱杂质较多，通道颜色较深，有时会遮住荧光斑点，影响特征斑点的检视;后改为将乙酸乙酯液加氨试液洗涤，结果供试液色谱杂质明显减少，特征斑点清晰、明显。薄层板比较了硅胶G板、和以含1%氢氧化钠溶液为黏合剂的硅胶G板，后者展开效果较好，故选用。

3.2 方中桔梗的薄层色谱鉴别，供试品溶液的制备方法曾比较了多种：曾参照《中国药典》[2]，加水-氯仿-盐酸（10∶10∶3）的混合溶液回流提取，但供试品色谱中目标斑点拖尾严重，不易检视;换用7%硫酸乙醇-水（1∶3）混合溶液回流提取，提取液用氯仿振摇萃取，氯仿液再加水洗涤，结果特征斑点圆整，对应良好，但萃取时溶液乳化严重，难以分层或分层时间很长;采用本文鉴别条件，萃取时易分层，供试品色谱中，对应斑点明显，杂质少，分离效果好，阴性无干扰。

3.3 对黄芩苷的甲醇溶液在190～500nm波长范围内进行扫描，黄芩苷在278nm和315nm处有最大吸收，经试验，清肺化痰丸中黄芩苷峰的分离度、对称性在278nm处较好，故选择278nm作为黄芩苷的检测波长。

3.4 含量测定试验中对供试品溶液的提取溶剂（甲醇、50%甲醇、70%乙醇）进行了研究。结果表明，50%甲醇、70%乙醇提取的黄芩苷含量较高，但以50%甲醇提取的黄芩苷峰分离度和峰形较好。对样品的提取时间进行比较试验，结果表明超声处理30min基本提取完全。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准（中药成方制剂第十二册）[S]. 1997.176.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

（收稿日期：2014.04.26）endprint