丹参-红花配伍比例对血瘀证大鼠血流变学和血流动力学的影响

杨文潮，王小平，白吉庆

(陕西中医学院，陕西 咸阳 712046)

丹参-红花配伍比例对血瘀证大鼠血流变学和血流动力学的影响

杨文潮，王小平，白吉庆

(陕西中医学院，陕西 咸阳 712046)

【目的】 比较不同比例配伍的丹参-红花药对对急性血瘀证大鼠血液流变学和血流动力学的影响。【方法】 分别制备丹参-红花配比(质量比)为3∶1、2∶1和1∶1的药液(以生药计药物的质量浓度为0.6 g/mL)。取SD雄性大鼠60只，随机分为6组，即丹参-红花3∶1、2∶1、1∶1组和阳性药物对照组、模型对照组、空白组。除空白组外，其余各组大鼠采用皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg/kg和冰水浴复制急性血瘀证模型，然后禁食，自由饮水，12 h后采血，测血液流变学指标，确定造模成功后，对丹参-红花3∶1、2∶1、1∶1组大鼠灌服给药3 g/(kg·d)，阳性药物对照组给予丹红注射液9 mL/(kg·d)，模型对照组和空白组灌服蒸馏水，每日1次，连续8 d。于第8天给药后的30 min，麻醉大鼠，取血，测血液流变学相关指标(全血黏度、血浆黏度、血沉、红细胞压积)和血流动力学指标(左心室收缩压、左室舒张末期压力、左心室最大上升速率、左心室最大下降速率、ST段)。【结果】 与空白组比较，模型对照组大鼠全血黏度、血浆黏度、血沉等血液流变学指标均极显著升高，表明急性血瘀证模型构建成功。与模型对照组比较，丹参-红花不同比例配伍均能降低大鼠全血黏度、血浆黏度、血沉，并可抑制缺血导致的大鼠左心室收缩压、左心室最大上升速率和下降速率的降低及左室舒张末期压力、ST段的升高，其中以丹参-红花3∶1配伍效果最好。【结论】 丹参-红花药对以3∶1配伍对急性血瘀证大鼠血液流变学和血流动力学有显著的改善作用。

丹参-红花；血瘀证；血液流变学；血流动力学

中药药对是中药复方配伍的最小单位，在中药和方剂的历史发展中有着起承与过渡的作用。中药药对的出现不仅拓展了单味中药的应用范围，更是奠定了方剂学的基础[1]。丹参-红花是经典代表性活血化瘀相须药对，从中医方剂数据库中检索出同时含有丹参-红花药对的方剂共有 2 630首；在复方专利中同时含有丹参-红花药对的方剂共有16首[2]。丹参(Salviamiltiorrhiza)为沉降之物，红花(Carthamustinctorius)为升浮之品。两药同用，一升一降，内外通和，使行气活血之功尤为显著；二药合用祛瘀生新，除邪而不伤正，共奏活血通络、祛瘀生新之功。本试验根据该药对在不同方剂中的常用比例，选取丹参-红花药对不同配比(质量比为3∶1，2∶1，1∶1)，研究其对急性血瘀证大鼠血液流变学和血流动力学指标的影响，以期为血瘀证方剂的配伍研究奠定基础，为阐明丹参-红花药对配伍使用的科学性与合理性提供依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 仪 器 LG-R-80型全自动血液流变仪(北京中勤世帝科技仪器公司)，Anke LXJ-IIB 离心机(上海安亭科学仪器厂)，DW-2000型小动物呼吸机(上海嘉鹏科技有限公司)，BL-420E生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司)，ECG-6511型心电图机(上海光电医用电子仪器有限公司)。

1.1.2 药 品 丹参为唇形科植物丹参的干燥根和根茎，红花为菊科植物红花的干燥花，上述药材均经陕西中医学院中药鉴定教研室白吉庆副教授鉴定；盐酸肾上腺素注射液(西安利君制药有限责任公司，批号：131106)；肝素钠注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司，批号：100903)；戊巴比妥钠(德国Merok分装)。

1.1.3 动 物 SD大鼠60只，雌、雄各半，体质量250～300 g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，许可证：SCXK(陕)2007-001，合格证：0003240。

1.2 方 法

1.2.1 药材提取 分别按丹参-红花质量比3∶1、2∶1和1∶1称取丹参、红花饮片适量，8倍量水浸泡30 min，煎煮2 次，每次1.5 h，过滤，合并滤液，浓缩成每mL含0.6 g药材的药液，冷藏备用。

1.2.2 试验方法 参照文献[3-4]的方法，建立SD大鼠急性血瘀证模型。取SD大鼠60只，雌、雄各半，平均分为6组，即丹参-红花3∶1组、丹参-红花2∶1组、丹参-红花1∶1组、阳性药物对照组、模型对照组和空白组。除空白组外，其余各组大鼠均皮下注射肾上腺素0.8 mg/kg，2 h后将大鼠置于冰水浴中游泳4 min，4 h后再次皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg/kg，2 h后将大鼠置冰水浴中游泳4 min，然后禁食，自由饮水，12 h后采血，测血液流变学相关指标确定造模成功后，模型对照组和空白组大鼠灌服蒸馏水，丹参-红花3∶1组、丹参-红花2∶1组、丹参-红花1∶1组均灌服药液3 g/(kg·d)，阳性药物对照组给予丹红注射液9 mL/(kg·d)，每日1次，连续8 d。

1.2.3 血液流变学指标检测 各组大鼠于第8天给药30 min后，静脉注射30 g/L戊巴比妥钠45 mg/kg，麻醉，颈总动脉插管取血，以10 g/L肝素钠抗凝，分别测定血沉(ESR)、红细胞压积(HCT)及低切(10/s)、中切(40/s)、高切(120/s)3个切变率下的全血黏度(WBV)；全血以3 000 r/min离心10 min，取上层血浆加入黏度计测120/s切变率下血浆黏度(PV)。

1.2.4 血流动力学指标检测 各组大鼠于第8天给药30 min后，静脉注射30 g/L戊巴比妥钠45 mg/kg，麻醉，切开气管连接呼吸机，剪开胸骨左侧皮肤，钝性分离肌肉层，剪断第3肋，剥离心包暴露心脏，在动脉圆锥和左心耳之间下方2 mm处结扎冠脉左前降支，立即缝合胸壁，空白组穿线不结扎。采用BL-420 生物信号采集系统连续记录结扎前后左心室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压力(LVEDP)、左心室最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室最大下降速率(-dp/dtmax)等血流动力学指标及大鼠Ⅱ导联心电图(ST)段的值。

1.2.5 数据统计与分析 试验数据采用SPSS 16.0 软件进行统计分析，数据以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 丹参-红花配伍比例对大鼠血液流变学指标的影响

由表1可知，与空白组比较，模型对照组大鼠全血黏度、血浆黏度和血沉均极显著升高(P<0.01)，表明造模成功。与模型对照组比较，丹参-红花药对3∶1、2∶1、1∶1配伍对急性血瘀证大鼠血液流变学指标均有不同程度的改善作用，其中以丹参-红花3∶1组的效果最好。

表1 丹参-红花不同比例配伍对血瘀证大鼠血液流变学指标的影响(n=10)Table 1 Effects of Salvia miltiorrhiza-Carthamus tinctorius ratio on hemorheology of rats with blood stasis (n=10)

注：与空白组比较，数据后标#表示差异显著(P<0.05)，标##表示差异极显著(P<0.01)； 与模型对照组比较，数据后标*表示差异显著(P<0.05)，标**表示差异极显著(P<0.01)。下表同。

Note:# shows significant difference (P<0.05) and ## shows extremely significant difference (P<0.01) compared to blank group.* indicates significant difference (P<0.05) and ** indicates extremely significant difference (P<0.01) compared to the model group.The same below.

2.2 丹参-红花配伍比例对大鼠血流动力学指标的影响

由表2可知，与空白组相比，结扎后模型对照组大鼠的LVSP、±dp/dtmax极显著降低(P<0.01)，LVEDP、ST段极显著升高(P<0.01)，提示大鼠心脏功能损伤。与模型对照组相比，丹参-红花不同比例(3∶1，2∶1，1∶1)配伍均能抑制缺血导致的大鼠LVEDP、ST段升高和LVSP、±dp/dtmax降低，其中以丹参-红花3∶1处理组效果最好。

表2 丹参-红花不同比例配伍对血瘀证大鼠血流动力学指标的影响(n=10)Table 2 Effects of Salvia miltiorrhiza-Carthamus tinctorius ratio on hemodynamics of rats with blood stasis (n=10)

续表2 Continued table 2

3 讨 论

血液流变研究的是血液、血细胞、血浆的流动性和变形性以及这种特性对循环乃至全身功能和代谢的影响，血液流变学异常与中医血瘀证理论“脉不通则血不流”和“血行失度”的理念相似[5]。血瘀证是指血液离开经脉，未能及时排出或消散，而停留于某处；或血液运行受阻，壅积于经脉或器官之内所出现的证候。现代研究认为，血液流变性的改变为血瘀证发生的原因和基础[6]。血液流变性主要为血液“浓”、“黏”、“凝”、“聚”状态。“浓”，红细胞压积增加，球蛋白、β-脂蛋白、胆固醇、甘油三酯含量明显增加；“黏”，全血黏度、血浆黏度、还原黏度增加；“凝”，血液凝固性增加，纤维蛋白原含量增加，纤溶活性降低，血浆复钙时间缩短；“聚”，红细胞及血小板在血浆中电泳速度减慢，血小板对ADP 类诱导物质的聚集性增加。血液流变学指标的改变多早于临床表现，恢复正常又晚于临床症状和体征的消失，许多心血管疾病都会发生血流异常，表现为血液成分、血流及血液黏滞性改变[7]，因此药物治疗血瘀证的疗效确定是以血液流变学指标为标准的[8-16]。本试验采用血液流变学相关指标， 来考察丹参-红花药对不同比例配伍对血瘀证大鼠的活血祛瘀功效，结果显示丹参-红花不同配比使用均可不同程度改善急性血瘀证大鼠的血液流变学指标。说明临床上在对“血瘀”证的治疗中，将丹参与红花配对使用具有一定的科学性。

丹参-红花药对是心血管类疾病临床治疗的主要药对之一，而血流动力学是研究药物对心血管功能影响时较常用的一种手段。LVSP在一定程度上可以反映心肌收缩力，是用于描述左室收缩功能的指标；±dp/dtmax是评价心肌收缩性能和舒张性能的常用指标，当心功能不全时，该指标就会降低[17]，给药后观察其变化可说明受试药物对心肌收缩功能和舒张功能的影响。因此本试验采用血流动力学指标来评价药物治疗心血管疾病的疗效[18-20]，结果提示，丹参-红花不同比例配伍均有增加心肌收缩力和改善心肌舒张功能的作用。说明临床上在对心血管疾病的治疗中，将丹参与红花配对使用具有一定的科学性。

前期研究表明，丹参-红花配伍后的活血化瘀作用明显优于丹参、红花的单味药[21]，这可能与丹参-红花药对产生协同增效作用有关，但对于协同增效的机理有待进一步研究。

4 结 论

丹参-红花不同比例配伍均能改善血瘀大鼠的血液流变学及血流动力学异常，本试验中，丹参-红花3∶1配伍水提物给药组对血瘀大鼠的血液流变学及血流动力学异常的改善效果最好。

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Impact ofSalviamiltiorrhiza-Carthamustinctoriusratio on hemorheology and hemodynamics of acute blood stasis rats

YANG Wen-chao,WANG Xiao-ping,BAI Ji-qing

(ShaanxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Xianyang,Shaanxi712046,China)

【Objective】 This study aimed to comparatively assess the effects of differentSalviamiltiorrhiza-Carthamustinctoriusratios on the hemorheology and hemodynamics of acute blood stasis rats. 【Method】 The test solutions withS.miltiorrhiza-C.tinctoriusratios of 3∶1,2∶1,and 1∶1 were prepared with the drug concentrations of 0.6 g original medicinal materials per mL.A total of 60 SD rats were randomly divided into blank group,model group as well asS.miltiorrhiza-C.tinctorius3∶1,2∶1,and 1∶1 groups.Ubcutaneous injection of adrenaline hydrochloride (0.8 mg/kg) and ice water bath were used to establish the acute blood stasis rat model for all groups except the blank group.After 12 h of fasting and free water drinking,blood sample were taken and blood rheology indicators were tested to determine the success of model establishment.Then,S.miltiorrhiza-C.tinctoriusgroups were given corresponding drugs(3 g/(kg·d)) orally,positive drug control group was given Danhong injection of 9 mL/(kg/d),while model control group and blank group were given distilled water once per day for 8 days.30 min after the treatment on day 8,rats were anesthetized before blood samples were taken to determine blood rheology related indicators (whole blood viscosity,plasma viscosity,blood sedimentation,and red blood cells hematocrit) and hemodynamic indexes (left ventricular systolic blood pressure,left ventricular end-diastolic pressure and left ventricular maximum rising rate,left ventricular maximum decline rate,and ST segment).【Result】 Compared with the blank group, all hemorheology indexes of model group were significantly increased,indicating that the model was established successfully.Compared with model group,S.miltiorrhiza-C.tinctoriuswith different ratios reduced the values of whole blood viscosity,plasma viscosity and blood sedimentation,and inhibited left ventricular systolic blood pressure and left ventricular maximum rising rate and falling rate and the left ventricular end-diastolic pressure as well as the rise of ST segment of acute blood stasis rats.TheS.miltiorrhiza-C.tinctoriuswith ratio of 3∶1 was the best.【Conclusion】S.miltiorrhiza-C.tinctoriuswith ratio of 3∶1 could significantly improve hemorheology and hemodynamics of acute blood stasis rats.

Salviamiltiorrhiza-Carthamustinctorius;blood stasis;hemorheology;hemodynamics

时间:2015-11-11 16:16

10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.12.007

2014-05-04

国家自然科学基金项目(81573624)；陕西省教育厅科学研究计划项目(2013JK0835)

杨文潮(1966-),男，陕西三原人，副教授，主要从事中医药物复方及配伍研究。E-mail:yangkunwu1211@163.com

王小平(1976-),女，陕西凤翔人，教授，硕士生导师，主要从事中药分析与药对研究。 E-mail:wangxiaoping323@126.com

R285.5

A

1671-9387(2015)12-0035-06

网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1390.S.20151111.1616.014.html