毛冬青总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

李洪亮+贺方兴+程齐来

摘要：为研究毛冬青（Ilex pubescens Hook et Arn.）总皂苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用，并初步探讨其保护作用机制，将试验大鼠随机分为假手术组、模型对照组、毛冬青总皂苷高、中、低剂量组及阳性药物对照组，运用大鼠大脑中动脉栓塞，制作脑缺血再灌注损伤模型，缺血10 min后，毛冬青总皂苷给药组及阳性药物组分别于舌下静脉给予高、中、低剂量的毛冬青总皂苷及阳性药物（香丹注射液），假手术组、模型组给予等体积的生理盐水。缺血60 min后再灌注，24 h后，每组取8只大鼠断头取脑，TTC染色，测定脑梗死体积;取血离心后，取血清，比色法测血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性及丙二醛（MDA）的含量;每组取2只大鼠运用病理组织形态学检验，观察毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞损伤的影响。结果表明，毛冬青总皂苷不同剂量组与模型对照组相比，其脑梗死面积减小，病理变化较轻;血清SOD的活性显著升高;毛冬青总皂苷高剂量组与模型对照组相比较，其MDA含量显著降低。说明毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用，其保护机制与毛冬青总皂苷抗氧化作用及增强氧自由基的清除有关。

关键词：毛冬青（Ilex pubescens Hook et Arn.）总皂苷;脑缺血再灌注损伤;保护作用

中图分类号：R285.5        文献标识码：A        文章编号：0439-8114（2014）21-5200-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.21.039

Protective Effects of Total Saponins from Ilex pubescens on Ischemia

Reperfusion Injury of Rats and Its Mechanism

LI Hong-lianga，HE Fang-xingb，CHENG Qi-laia

（a.College of Pharmacy;b. Bascial medical college， Gannan medical College， Ganzhou 341000， Jiangxi， China）

Abstract： To study the protective effect of total saponins from Ilex pubescens Hook et Arn on cerebral ischemia reperfusion injury and the potentially mechanism， the rats were randomly divided into sham operation group， model group， saponins of total saponins from Ilex pubescens Hook （high， middle， low） dose group and positive medicine control group. Same volume solvent or total saponins from Mao Dongqing was given in high， middle and low dosage， or positive medicine such as was given Xiangdan was injected sublingually 10min later of operation. The rats cerebral ischemia reperfusion model was made by middle cerebral artery embolization.  After ischemia for 60 mins and reperfusion for 24 hours， 8 rats were taken from every group and removed brain by decapitation， then dyed by TTC and measured the volume of cerebral infarction， the activity of SOD， the content of GSH-Px and MDA in serum by colorimetry. 2 rats were taken from each group for histopathological examination. The effects of total saponins of Mao Dongqing on brain tissue injury caused by cerebral ischemia reperfusion injury were observed. The results showed that the volumes of cerebral infarction in Mao Dongqin treatment group reduced. Pathological changes were much less. The activity of SOD increased compared with model control group. The content of MDA decreased in the treatment group of high dosage. It is indicated that the total saponins from Mao Dongqing had certain protective effect on cerebral ischemia reperfusion. The mechanism might be related with anti-oxygenation and scavenging strengthen on oxygen free radicals.

Key words：total saponins from Ilex pubescens Hook et Arn （Mao Dongqing）;cerebral ischemia reperfusion injury;Protective effect

毛冬青（Ilex pubescens Hook et Arn.）系冬青科（Aquifoliaceae）冬青属多年生常绿灌木，盛产于广东、广西、福建、湖南、江西等地。毛冬青具有活血通脉、消肿止痛、清热解毒功效，临床上常用于冠心病、心绞痛和脉管炎等的治疗。冬青属全世界有400余种，中国约150种[1]。毛冬青的主要化学成分为毛冬青总皂苷和黄酮苷，毛冬青根主要成分为三萜皂苷类，主要有毛冬青皂苷甲、毛冬青皂苷B1、毛冬青皂苷B、毛冬青酸以及救必应酸等[2]。大量研究表明，毛冬青总皂苷对心血管系统具有良好的保护作用，其能够通过直接和间接作用发挥对心脑血管的保护作用，降低心脑血管疾病的发病率。赣南医学院脑血管重点实验室最近研究表明，毛冬青总皂苷具有良好的抗多因素诱发实验性心律失常疗效，其中对心肌缺血再灌注损伤诱发实验性心律失常疗效十分显著。本试验研究了毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用，并初步探讨了其保护机制，为毛冬青总皂苷的进一步开发利用提供参考。

1  材料与方法

1.1  试剂及药物

毛冬青总皂苷由赣南医学院脑血管重点实验室提供，纯度92%，用注射用水配成所需的浓度;超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;其他试剂均为分析纯。

1.2  试验动物

雄性SD大鼠60只，体重（260+20） g，由江西中医学院实验动物中心提供，合格证号：JZDWNo：2012-0182，许可证号：SCXK（赣）2010-0001。

1.3  方法

1.3.1  试验动物分组与大鼠脑缺血再灌注损伤模型的制备[3]   雄性SD大鼠60只随机均分成6组，即假手术组、脑缺血再灌注损伤模型对照组、毛冬青总皂苷高剂量（20 mg/kg）组、毛冬青总皂苷中剂量（10 mg/kg）组、毛冬青总皂苷低剂量（5 mg/kg）组、阳性药物（香丹注射液）对照组。大鼠用10%水合氯醛溶液（350 mg/kg）麻醉，参照Longa等[3]的方法制备大脑中动脉阻断模型，将一尼龙线（长4 cm，直径0.2 mm）经颈总动脉主干切口缓慢向颈内动脉入颅方向推进，以颈总动脉分叉处为标记，推进18～20 mm感到轻微阻力时，即达到较细大脑前动脉，阻断大脑中动脉的所有血液供应，60 min后，拔出尼龙线并扎紧动脉残端，缝合皮下组织和皮肤，完成脑缺血再灌注损伤模型。假手术组大鼠只暴露和分离出颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，不闭塞大脑中动脉。术中严格控制室温在23～25 ℃。手术结束后药物治疗组分别从舌下静脉注射不同剂量的毛冬青总皂苷及阳性药物（香丹注射液），假手术组和模型组给予同体积的生理盐水。

1.3.2  神经功能缺损评分  采用Zea Longa评分方法，各组SD大鼠按“1.3.1”的方法处理后，使动脉血恢复血流供应后再灌注不同药物，24 h后，采用单盲法进行评分，评分标准如下：0分：无神经系统功能缺失症状，活动正常者;1分：不能完全伸展对侧前肢者;2分：出现左侧Homer征，爬行时出现向右转圈者;3分：行走时身体向右侧偏瘫倾倒者;4分：不能自行行走者，意识丧失者。

1.3.3  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑梗死范围的影响  各组SD大鼠按“1.3.1”的方法处理后，使动脉血恢复血流供应后再灌注不同药物，24 h后，用上述方法麻醉，断头处死大鼠。取脑，将前脑沿冠状面切成厚度基本相同的5片，脑片置于5 mL 2%TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑，Triphenyl tetrazoliu chloride，TTC）染色溶液中，37 ℃避光孵育30 min。经染色后非缺血区呈玫瑰红色，脑梗死区呈灰白色，按下列公式计算梗死率。梗死率=梗死区面积/总面积×100%。

1.3.4  血清生化指标测定  各组SD大鼠按“1.3.1”的方法处理后，使动脉血恢复血流供应后再灌注不同药物，24 h后，所有大鼠麻醉后断头取血，4 ℃、3 000 r/min离心10 min，取血清，-80 ℃保存。严格按试剂盒操作测定血清SOD、GSH-Px活性及MDA含量。

1.4  统计分析

数据均以SPSS14.0进行统计分析，神经学评分进行秩和检验，脑梗死面积比进行t检验，血清SOD、GSH-Px活性、MDA含量均进行单因素方差分析，结果以平均值±标准差表示。

2  结果与分析

2.1  大鼠脑缺血再灌注损伤神经学评分

图1结果显示，与模型对照组比较，毛冬青总皂苷中、高剂量组大鼠的神经功能缺损评分均显著（P<0.05或P<0.01）降低，说明毛冬青总皂苷可有效改善脑缺血对大鼠神经功能的损伤状况。毛冬青总皂苷不同剂量组大鼠神经功能评分与阳性药物对照组相比较差异均不显著（P>0.05）。说明毛冬青总皂苷与香丹注射液相比，其改善脑缺血对大鼠神经功能损伤的疗效并没有明显差异。

2.2  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑梗死范围的影响

图2、图3结果显示，与模型对照组比较，毛冬青总皂苷中、高剂量组大鼠的脑梗死率均显著（P<0.05或P<0.01）降低，说明毛冬青总皂苷可有效改善脑缺血引起的局灶性脑梗死。

2.3  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠血清中SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响

表1结果显示，与假手术组相比较，毛冬青总皂苷不同剂量组、阳性药物对照组及模型对照组大鼠血清SOD、GSH-Px活性均显著（P<0.05或P<0.01）降低，说明脑缺血再灌注损伤模型建立成功，该方法可引起动物血清SOD、GSH-Px活性降低。与模型对照组相比较，毛冬青总皂苷不同剂量组及阳性药物对照组大鼠血清SOD活性显著（P<0.05）增加，说明毛冬青总皂苷和香丹注射液能提高脑缺血再灌注损伤后大鼠血清SOD活性。与模型对照组相比较，毛冬青总皂苷高剂量组可显著降低大鼠血清MDA含量（P<0.05），其他剂量组与模型对照组相比则无明显差异。

2.4  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞损伤的影响

由图4可知，脑缺血再灌注损伤模型组切片神经原、胶质细胞的细胞间隙增宽，神经纤维网呈空泡样变;神经原胞浆及胞膜形态不规则，边界不清，胞核浓缩，部分细胞呈固缩状（图4E）。假手术组神经原、胶质细胞形态正常，结构完整，无间质水肿;神经原胞浆丰富、均匀，胞核呈圆形或椭圆形，核仁清晰（图4F）。毛冬青总皂苷低剂量组出现小血管周围间隙增宽，炎性细胞浸润（图4A）。毛冬青总皂苷中、高剂量组和阳性药物对照组神经原、胶质细胞形态相对正常，结构相对完整，病理变化轻（图4B、图4C、图4D）。

3  讨论

近年来，国内外对毛冬青、毛冬青有效成分及相关衍生物（如毛冬青甲素）的药理及临床研究主要集中在心脑血管及抗炎作用等方面[4]。毛冬青酸具有抑制动、静脉血栓形成的作用[5]。毛冬青甲素管内给药对花生四烯酸（AA）诱导兔血小板聚集和MDA生成的影响试验结果表明，毛冬青甲素在抑制AA诱导血小板聚集的同时，对AA诱导血小板生成MDA也有抑制作用，且两种抑制作用有相关性，表明毛冬青甲素抗血小板作用可能与其抑制过氧化脂质有关[6]。毛冬青甲素体外给药试验能抑制ADP、胶原诱导的人、兔血小板和5-羟色胺释放，剂量与效应相关，给大鼠体内给药，也能明显抑制血小板聚集。毛冬青甲素治疗缺血性脑血管病取得了较好的疗效[7，8]。赣南医学院脑血管重点实验室研究证明毛冬青总皂苷能降低机体氧化应激反应，本试验结果中毛冬青总皂苷可明显增加脑缺血再灌注损伤大鼠血清中SOD的活性，毛冬青总皂苷高剂量组MDA的含量明显降低，这也证明了毛冬青总皂苷具有良好的抗氧化作用。脑梗死范围的大小，常用来衡量脑缺血再灌注损伤的程度。本试验结果表明，不同剂量的毛冬青总皂苷均能减小模型大鼠脑梗死范围，说明毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤导致的脑梗死有一定的抑制作用。

炎性细胞因子在脑缺血再灌注损伤中起着重要作用，炎性细胞因子的过度表达加重脑缺血缺氧损伤。炎性细胞因子在缺血组织的聚集是加重脑缺血缺氧的重要因素。它们调节细胞表面黏附分子的数量和功能，造成白细胞与内皮细胞的黏附，阻断微循环，影响缺血半暗带区血供，并使血浆成分聚集于管壁，导致管壁增厚、狭窄和脑梗死[9]。从病理组织形态学检验结果可以看出，毛冬青总皂苷低剂量组大鼠出现小血管周围间隙增宽，炎性细胞浸润，毛冬青总皂苷中剂量组、高剂量组和阳性药物对照组大鼠神经原、胶质细胞形态相对正常，结构相对完整，病理变化轻，这说明毛冬青总皂苷能够抑制炎性细胞的产生从而减轻脑缺血再灌注导致的脑组织损伤。因此毛冬青总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用，但毛冬青总皂苷的具体作用机制还有待于进一步的研究。

参考文献：

[1] 熊友香，李  昶，罗宪堂.毛冬青的化学成分、药理作用研究进展[J].中药材，2002，25（5）：371.

[2] 秦国伟，陈政雄，徐任生，等.毛冬青化学成分的研究Ⅱ.毛冬青皂苷甲的化学结构[J].化学学报，1987（3）：249.

[3] LONGA E Z， WEINSTEIN P R， CARLSONS S， et al. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J]. Stroke， 1989， 20（1）：84-91.

[4] XU C， LUO L， TAN R X. Antidepressant effect of three traditional Chinese medicines in the learned helplessness model [J]. Journal of Ethnopharmacology，2004，9（1）：345-349.

[5] 张芳林，郭  晟，朱令元.毛冬青酸抗血栓实验研究及机制探讨[J].江西医学院学报，2003，43（2）：33.

[6] 杨  涛，陈桂君，李伍善.毛冬青甲素体外给药对花生四烯酸诱导的兔血小板聚集和丙二醛生成的影响[J].首都医学院学报，1992，13（3）：171.

[7] 汪  钟，杜金香，朱国强.毛冬青甲素对血小板功能和形态的影响[J].中西结合杂志，1985，5（4）：232.

[8] 王志文，陈景华.毛冬青根为主治疗血栓闭塞性脉管炎18例[J].山东中医杂志，1994，13（12）：541.

[9] 张  玲，余绍祖，吴国祥.大鼠脑缺血再灌注后TNF-α、IL-β及细胞间粘附分子-1mRNA的表达[J].卒中与神经疾病，2001（2）：77-79.

2.3  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠血清中SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响

表1结果显示，与假手术组相比较，毛冬青总皂苷不同剂量组、阳性药物对照组及模型对照组大鼠血清SOD、GSH-Px活性均显著（P<0.05或P<0.01）降低，说明脑缺血再灌注损伤模型建立成功，该方法可引起动物血清SOD、GSH-Px活性降低。与模型对照组相比较，毛冬青总皂苷不同剂量组及阳性药物对照组大鼠血清SOD活性显著（P<0.05）增加，说明毛冬青总皂苷和香丹注射液能提高脑缺血再灌注损伤后大鼠血清SOD活性。与模型对照组相比较，毛冬青总皂苷高剂量组可显著降低大鼠血清MDA含量（P<0.05），其他剂量组与模型对照组相比则无明显差异。

2.4  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞损伤的影响

由图4可知，脑缺血再灌注损伤模型组切片神经原、胶质细胞的细胞间隙增宽，神经纤维网呈空泡样变;神经原胞浆及胞膜形态不规则，边界不清，胞核浓缩，部分细胞呈固缩状（图4E）。假手术组神经原、胶质细胞形态正常，结构完整，无间质水肿;神经原胞浆丰富、均匀，胞核呈圆形或椭圆形，核仁清晰（图4F）。毛冬青总皂苷低剂量组出现小血管周围间隙增宽，炎性细胞浸润（图4A）。毛冬青总皂苷中、高剂量组和阳性药物对照组神经原、胶质细胞形态相对正常，结构相对完整，病理变化轻（图4B、图4C、图4D）。

3  讨论

近年来，国内外对毛冬青、毛冬青有效成分及相关衍生物（如毛冬青甲素）的药理及临床研究主要集中在心脑血管及抗炎作用等方面[4]。毛冬青酸具有抑制动、静脉血栓形成的作用[5]。毛冬青甲素管内给药对花生四烯酸（AA）诱导兔血小板聚集和MDA生成的影响试验结果表明，毛冬青甲素在抑制AA诱导血小板聚集的同时，对AA诱导血小板生成MDA也有抑制作用，且两种抑制作用有相关性，表明毛冬青甲素抗血小板作用可能与其抑制过氧化脂质有关[6]。毛冬青甲素体外给药试验能抑制ADP、胶原诱导的人、兔血小板和5-羟色胺释放，剂量与效应相关，给大鼠体内给药，也能明显抑制血小板聚集。毛冬青甲素治疗缺血性脑血管病取得了较好的疗效[7，8]。赣南医学院脑血管重点实验室研究证明毛冬青总皂苷能降低机体氧化应激反应，本试验结果中毛冬青总皂苷可明显增加脑缺血再灌注损伤大鼠血清中SOD的活性，毛冬青总皂苷高剂量组MDA的含量明显降低，这也证明了毛冬青总皂苷具有良好的抗氧化作用。脑梗死范围的大小，常用来衡量脑缺血再灌注损伤的程度。本试验结果表明，不同剂量的毛冬青总皂苷均能减小模型大鼠脑梗死范围，说明毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤导致的脑梗死有一定的抑制作用。

炎性细胞因子在脑缺血再灌注损伤中起着重要作用，炎性细胞因子的过度表达加重脑缺血缺氧损伤。炎性细胞因子在缺血组织的聚集是加重脑缺血缺氧的重要因素。它们调节细胞表面黏附分子的数量和功能，造成白细胞与内皮细胞的黏附，阻断微循环，影响缺血半暗带区血供，并使血浆成分聚集于管壁，导致管壁增厚、狭窄和脑梗死[9]。从病理组织形态学检验结果可以看出，毛冬青总皂苷低剂量组大鼠出现小血管周围间隙增宽，炎性细胞浸润，毛冬青总皂苷中剂量组、高剂量组和阳性药物对照组大鼠神经原、胶质细胞形态相对正常，结构相对完整，病理变化轻，这说明毛冬青总皂苷能够抑制炎性细胞的产生从而减轻脑缺血再灌注导致的脑组织损伤。因此毛冬青总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用，但毛冬青总皂苷的具体作用机制还有待于进一步的研究。

参考文献：

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[2] 秦国伟，陈政雄，徐任生，等.毛冬青化学成分的研究Ⅱ.毛冬青皂苷甲的化学结构[J].化学学报，1987（3）：249.

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[5] 张芳林，郭  晟，朱令元.毛冬青酸抗血栓实验研究及机制探讨[J].江西医学院学报，2003，43（2）：33.

[6] 杨  涛，陈桂君，李伍善.毛冬青甲素体外给药对花生四烯酸诱导的兔血小板聚集和丙二醛生成的影响[J].首都医学院学报，1992，13（3）：171.

[7] 汪  钟，杜金香，朱国强.毛冬青甲素对血小板功能和形态的影响[J].中西结合杂志，1985，5（4）：232.

[8] 王志文，陈景华.毛冬青根为主治疗血栓闭塞性脉管炎18例[J].山东中医杂志，1994，13（12）：541.

[9] 张  玲，余绍祖，吴国祥.大鼠脑缺血再灌注后TNF-α、IL-β及细胞间粘附分子-1mRNA的表达[J].卒中与神经疾病，2001（2）：77-79.

2.3  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠血清中SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响

表1结果显示，与假手术组相比较，毛冬青总皂苷不同剂量组、阳性药物对照组及模型对照组大鼠血清SOD、GSH-Px活性均显著（P<0.05或P<0.01）降低，说明脑缺血再灌注损伤模型建立成功，该方法可引起动物血清SOD、GSH-Px活性降低。与模型对照组相比较，毛冬青总皂苷不同剂量组及阳性药物对照组大鼠血清SOD活性显著（P<0.05）增加，说明毛冬青总皂苷和香丹注射液能提高脑缺血再灌注损伤后大鼠血清SOD活性。与模型对照组相比较，毛冬青总皂苷高剂量组可显著降低大鼠血清MDA含量（P<0.05），其他剂量组与模型对照组相比则无明显差异。

2.4  毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞损伤的影响

由图4可知，脑缺血再灌注损伤模型组切片神经原、胶质细胞的细胞间隙增宽，神经纤维网呈空泡样变;神经原胞浆及胞膜形态不规则，边界不清，胞核浓缩，部分细胞呈固缩状（图4E）。假手术组神经原、胶质细胞形态正常，结构完整，无间质水肿;神经原胞浆丰富、均匀，胞核呈圆形或椭圆形，核仁清晰（图4F）。毛冬青总皂苷低剂量组出现小血管周围间隙增宽，炎性细胞浸润（图4A）。毛冬青总皂苷中、高剂量组和阳性药物对照组神经原、胶质细胞形态相对正常，结构相对完整，病理变化轻（图4B、图4C、图4D）。

3  讨论

近年来，国内外对毛冬青、毛冬青有效成分及相关衍生物（如毛冬青甲素）的药理及临床研究主要集中在心脑血管及抗炎作用等方面[4]。毛冬青酸具有抑制动、静脉血栓形成的作用[5]。毛冬青甲素管内给药对花生四烯酸（AA）诱导兔血小板聚集和MDA生成的影响试验结果表明，毛冬青甲素在抑制AA诱导血小板聚集的同时，对AA诱导血小板生成MDA也有抑制作用，且两种抑制作用有相关性，表明毛冬青甲素抗血小板作用可能与其抑制过氧化脂质有关[6]。毛冬青甲素体外给药试验能抑制ADP、胶原诱导的人、兔血小板和5-羟色胺释放，剂量与效应相关，给大鼠体内给药，也能明显抑制血小板聚集。毛冬青甲素治疗缺血性脑血管病取得了较好的疗效[7，8]。赣南医学院脑血管重点实验室研究证明毛冬青总皂苷能降低机体氧化应激反应，本试验结果中毛冬青总皂苷可明显增加脑缺血再灌注损伤大鼠血清中SOD的活性，毛冬青总皂苷高剂量组MDA的含量明显降低，这也证明了毛冬青总皂苷具有良好的抗氧化作用。脑梗死范围的大小，常用来衡量脑缺血再灌注损伤的程度。本试验结果表明，不同剂量的毛冬青总皂苷均能减小模型大鼠脑梗死范围，说明毛冬青总皂苷对脑缺血再灌注损伤导致的脑梗死有一定的抑制作用。

炎性细胞因子在脑缺血再灌注损伤中起着重要作用，炎性细胞因子的过度表达加重脑缺血缺氧损伤。炎性细胞因子在缺血组织的聚集是加重脑缺血缺氧的重要因素。它们调节细胞表面黏附分子的数量和功能，造成白细胞与内皮细胞的黏附，阻断微循环，影响缺血半暗带区血供，并使血浆成分聚集于管壁，导致管壁增厚、狭窄和脑梗死[9]。从病理组织形态学检验结果可以看出，毛冬青总皂苷低剂量组大鼠出现小血管周围间隙增宽，炎性细胞浸润，毛冬青总皂苷中剂量组、高剂量组和阳性药物对照组大鼠神经原、胶质细胞形态相对正常，结构相对完整，病理变化轻，这说明毛冬青总皂苷能够抑制炎性细胞的产生从而减轻脑缺血再灌注导致的脑组织损伤。因此毛冬青总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用，但毛冬青总皂苷的具体作用机制还有待于进一步的研究。

参考文献：

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[4] XU C， LUO L， TAN R X. Antidepressant effect of three traditional Chinese medicines in the learned helplessness model [J]. Journal of Ethnopharmacology，2004，9（1）：345-349.

[5] 张芳林，郭  晟，朱令元.毛冬青酸抗血栓实验研究及机制探讨[J].江西医学院学报，2003，43（2）：33.

[6] 杨  涛，陈桂君，李伍善.毛冬青甲素体外给药对花生四烯酸诱导的兔血小板聚集和丙二醛生成的影响[J].首都医学院学报，1992，13（3）：171.

[7] 汪  钟，杜金香，朱国强.毛冬青甲素对血小板功能和形态的影响[J].中西结合杂志，1985，5（4）：232.

[8] 王志文，陈景华.毛冬青根为主治疗血栓闭塞性脉管炎18例[J].山东中医杂志，1994，13（12）：541.

[9] 张  玲，余绍祖，吴国祥.大鼠脑缺血再灌注后TNF-α、IL-β及细胞间粘附分子-1mRNA的表达[J].卒中与神经疾病，2001（2）：77-79.