黄文丽 李 强 李小林 陈祖琴 郑林用
(1.四川省农业科学院生物技术核技术研究所,成都 610066;2.四川大学生命科学学院,成都 610064;3.四川省农业科学院土壤肥料研究所,成都 610066;4.四川省农业科学院,成都 610066)
随着社会经济的发展,人民生活水平的提高,因热量、营养成分摄取过剩或膳食不平衡致肥胖症患者越来越多。肥胖不仅影响人们的日常工作和生活,且严重危害身心健康,易发高脂血症、高血压、糖尿病、肾脏病、心脑血管疾病。面对这一社会现实,加强优质减肥降脂食品的研发,具有积极深远的社会意义和广阔的市场前景。
毛木耳[Auricularia polytricha(Mont.)Sacc.]又称黄背木耳,属木耳科(Auriculariaceae)木耳属。其营养丰富,富含纤维素和多种生物活性物质[1],脂肪含量低[2],具广泛的药用价值[3-6]。研究表明,毛木耳具有补气血、降血液黏度、降血脂、清肺润燥、清涤胃肠、通便降压、化结石、抗血栓、预防动脉粥样硬化、中风和心肌梗死等功效[7-8]。清源等[9]从毛木耳子实体中提取出了活性多糖APPⅡA,并探讨了它的结构;毛木耳多糖是毛木耳的主要活性成分[10-12],具有抗凝血和降血脂的作用[13];毛木耳多糖及糖蛋白能显著降低老鼠血液中胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量[14-15]。原材料若经超微粉碎可增大粉体的比表面积,促进活性成分的溶出,提高功效[16]。但是毛木耳的粒径与功效活性之间关系的研究未见报道。本研究旨在考察不同剂量、粒径(300~400目和>400目)的毛木耳细粉对SD大鼠高脂性饮食诱发肥胖的减肥功效,为进一步开发毛木耳营养食品提供参考依据。
毛木耳(川耳6号)干品,主要成分有粗蛋白质(6.10%)、粗脂肪(0.15%)、粗纤维(32.20%)、粗灰分(1.61%)、水分(9.02%)、碳水化合物(50.90%)、钙 (0.25%)、镁 (0.14%)、铁(43.10 mg/kg)、钾(0.22%),经超微粉碎,再分别过300和400目筛得到300~400目和>400目的毛木耳细粉。
1.2.1 动物
清洁级雄性 SD大鼠 138只,体重 180~220 g。分笼饲养,每笼3~4只。饲养地点:成都中医药大学附属医院试验动物房,控制室温(22±2)℃,相对湿度(60±10)%。
1.2.2 饲料
空白对照组:基础饲料(购于成都达硕生物科技有限公司,粗蛋白质>18%,粗脂肪>4%,粗纤维<5%,赖氨酸>1.32%)。
模型对照组和毛木耳细粉组:营养饲料组成为15.0%蔗糖、15.0%猪油和70%基础饲料。
1.3.1 适应期
将大鼠饲喂基础饲料观察5 d。
1.3.2 造模筛选期
适应期后,按体重随机分成2组,12只大鼠给予基础饲料作为空白对照组,126只给予营养饲料作为模型组。每周记录给食量、剩食量,称量体重1次。喂养2周后,给予营养饲料的大鼠按体重增重排序,淘汰体重增重较低的1/3肥胖抵抗大鼠。
1.3.3 受试样品给予
将筛选出的84只肥胖敏感大鼠随机分成7组,每组12只,分别为模型对照组和6个毛木耳细粉组(300~400目及>400目毛木耳细粉高、中、低剂量组)。模型对照组和6个毛木耳细粉组给予营养饲料,空白对照组给予基础饲料。各毛木耳细粉组灌胃给予不同剂量(1 250、1 000和750 mg/kg)的受试样品,模型对照组和空白对照组给予等量的纯化水,受试样品给予6周。每周记录给食量、剩食量,称量体重1次。
试验结束时,给各鼠腹腔注射10%水合氯醛(每100 g体重0.2 mL)麻醉,腹主静脉取血后解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪,并称重,计算脂/体比。
1.3.4 检测指标
体重、体增重、摄食总量、摄入总热量(摄食量×每千克饲料热量)、食物利用率、脂重(睾丸及肾周围脂肪垫)、脂/体比。
数据以平均值±标准差表示,采用SPSS 19.0,首先进行正态分布与方差齐性检验,在服从正态分布以及方差齐性的条件下,采用一般线性模型下的单变量多因素方差分析(one-way ANOVA,LSD),分析不同时间、不同粒径、不同剂量对体重增重与降脂功效的影响。
试验所用基础饲料和营养饲料的总能分别为14.16 和 17.06 kJ/kg,模型对照组雄性 SD 大鼠经过 2 周饲喂,体重增长(59.6±21.7)g,显著高于饲喂基础饲料的空白对照组[(38.0±7.3)g](P<0.05),筛选出的肥胖敏感大鼠体重在(70.5±14.0)g,与空白对照组比较有极显著差异(P<0.01)。
毛木耳细粉经口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后,各组试组大鼠每周的摄食总量和摄入总热量如表1所示,各组大鼠的摄食总量无显著差异(P>0.05),摄入总热量空白对照组与模型对照组有显著差异(P<0.05),其他试验组的摄入总热量与模型对照组无显著差异(P>0.05)。毛木耳细粉经口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后,食物利用率结果见表2,结果显示各组的食物利用率无显著性差异(P>0.05)。
毛木耳细粉经口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后,体重及体增重结果见表3,模型对照组大鼠食用营养饲料后体重一直高于空白对照组,差异极显著(P<0.01)。300~400目和>400目高剂量(1 250 mg/kg)毛木耳细粉组大鼠体重较模型对照组大鼠体重更轻,且从第2周持续到第6周,都有极显著差异(P<0.01),300~400目和>400目中剂量(1 000 mg/kg)毛木耳细粉组大鼠体重从第4周开始与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)。300~400目和>400 目高、中剂量毛木耳细粉组大鼠的体增重均比模型对照组低(P<0.05或 P<0.01)。
表1 不同剂量毛木耳细粉对大鼠摄食总量和摄入总热量的影响Table 1 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on total food and calorie intake of rats
表2 不同剂量毛木耳细粉对大鼠食物利用率的影响Table 2 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on food utilization rate of rats %
毛木耳细粉经口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后,腹主静脉取血测血清总胆固醇(total cholestrol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量,结果见表 4。模型对照组大鼠食用高脂营养饲料后血清TC和LDL-C含量显著高于空白对照组大鼠(P<0.05),表明高脂模型成功。300~400目、>400目高剂量的毛木耳细粉可降低肥胖模型大鼠的血清TC、LDL-C 含量 (P<0.05 或 P<0.01),300~400目中剂量的毛木耳细粉可降低肥胖模型大鼠的血清TC含量(P<0.05)。
表3 毛木耳细粉对肥胖大鼠体重和体增重的影响Table 3 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on body weight and body weight gain of rats g
毛木耳细粉经口灌胃至肥胖敏感的雄性SD大鼠42 d后,放血处死,解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪,并称重,计算脂/体比,结果见表5。模型对照组大鼠食用高脂营养饲料后脂重和脂/体比均高于空白对照组(P<0.01),表明模型建立成功。300~400目高、中剂量,>400目高剂量的毛木耳细粉可降低肥胖模型大鼠的脂重(P<0.05或P<0.01)。
表5 不同剂量毛木耳细粉对大鼠脂/体比的影响Table 5 Effects of Auricularia polytricha powder with different doses on fat body ratio of rats
肥胖是糖尿病、心血管疾病等多种疾病的危险因素[2]。减肥是一个世界性话题,对于肥胖人群来说,减肥是一个艰难的历程,如果能开发出功效显著的减肥产品,那将是肥胖者的福音。毛木耳是一种食药兼用的蕈菌,具有多种药用功效。在我国分布广、易栽培,来源广泛,价格低廉,是不可多得的食品加工材料。目前已有毛木耳有减肥降脂功效的报道,若将其开发成保健品,则市场潜力巨大。
本次试验结果显示,模型对照组大鼠体重、体增重、脂/体比等指标均显著高于空白对照组,表明肥胖模型成功建立;同时,模型对照组大鼠血清TC、LDL-C含量均显著高于空白对照组,表明高脂血症模型也成立。在各试验组大鼠食物摄入量及利用率无显著差异的情况下,300~400目和>400目1 250和1 000 mg/kg毛木耳细粉可降低肥胖模型大鼠的体重,同时可降低肥胖模型大鼠的体增重,说明毛木耳细粉具有减肥的功效。此外,结果还发现毛木耳细粉可降低肥胖模型大鼠的脂重、脂/体比以及血清 TC、LDL-C含量,且剂量越高降脂效果越明显。早在1999年,吴春敏等[13]就证明了毛木耳浸提物具有降血脂的功能,后来恩威药业将毛木耳子实体烘干研成细粉,制成“活血降脂颗粒”[17]。本试验证实了毛木耳细粉对高脂营养饲料诱导的肥胖大鼠有降血脂功效,与前人研究相符。本研究在前人的基础上,系统的研究300~400目和>400目毛木耳细粉的减肥降脂功效,确实得出毛木耳可减肥降脂。
研究发现毛木耳多糖是毛木耳主要活性成分[18],将其经超微粉碎可增大粉体的比表面积,促进活性成分的溶出,但粉碎得过细导致杂质物质溶出,影响活性物质吸收。本试验中虽然300目以上的毛木耳细粉均有减肥降脂功效,但300~400目毛木耳细粉的减肥降脂功效略优于>400目的,而且剂量越高减肥降脂功效越好,300~400目高剂量组的减肥降脂功效最好。其原因可能是>400目的毛木耳细粉过细,影响活性物质吸收,影响了其减肥降脂效果。
综合来看,300~400目和>400目毛木耳细粉均有减肥降脂功效,且功效与剂量呈正相关,300~400目高剂量毛木耳细粉的减肥降脂功效最好。本研究为毛木耳减肥产品的开发提供参考依据,为毛木耳精深加工奠定基础。但在保健品开发中,如何平衡摄入量与减肥降脂效果之间的关系,摄入适当量的毛木耳细粉,有待进一步的试验。
不同剂量的毛木耳细粉的减肥降脂功效差异显著,300目以上毛木耳细粉的动物减肥功能试验结果阳性,300~400目高剂量毛木耳细粉的减肥降脂功效最好。
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