以患者新鲜血清标本制备室内控品的应用研究＊

崔 婷，马建锋（南京医科大学第一附属医院医学检验科，南京 210029）

依据《医疗机构临床实验室管理办法》，临床检测项目都需进行室内质量控制（简称室内质控），而在实际工作中经常遇到某些检验项目的质控品供应不足，不能满足正常的质控需求［1-2］。本研究尝试用患者新鲜血清进行室内质控，与商品化的质控血清进行室内质控的效果比较，评估其可行性，现报道如下。

1材料与方法

1.1 材料来源选择本院20份当日临床新鲜血清，其中胱抑素C（Cys-C）浓度不超过0.6mg／L 4份，＞0.6～1.0mg／L 6份，＞1.0～2.0mg／L 4份，＞2.0～4.0mg／L 4份，大于4.0 mg／L 2份。使用仪器为Olympus AU 5400公司生化分析仪，试剂为北京利德曼股份有限公司生产的Cys-C检测试剂，批号212251；标准品批号：205111C；质控品采用Bio-RAD公司质控品，批号14431和14432。

1.2 方法

1.2.1 标本稳定性验证 在标本采集当日，对20份临床新鲜血清进行2次Cys-C检测，计算并记录均值及标准差（SD），2次检测均未发现离群值。标本检测后加盖保存于普通冰箱冷藏，以后在第3、5、8天分别对每份标本检测2次，计算并记录和SD，以第1天的结果为比较靶值，随后的结果分别与第1天结果进行配对t检验和回归分析，计算在正常参考区间两端的误差，以确定该项目的标本稳定时间［3-4］。

1.2.2 室内质控的实施 以高浓度质控物的变异系数（CV%）作为自制质控品的质量控制目标，取浓度在正常参考区间两端处（0.50～0.70mg／L、1.0～1.4mg／L）的患者新鲜血清标本各一份作为自制质控品，同时使用购买的Bio-RAD质控品进行常规室内质控，比较两种质控方法的分析结果［5-6］。

1.3 统计学处理使用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析，所有结果以±s表示，将第3、5、8天的结果与第1天结果采用配对t检验进行比较，以P＜0.05为差异有统计学意义；以第1天的结果为Y，第3、5、8天的结果为X，通过回归分析计算回归方程Y=bX+a，并分别计算在正常参考区间两端（0.60mg／L和1.20mg／L）的误差。

2 结 果

2.1 自制控制品稳定性结果新鲜血清样品第1天检测结果为（1.81±1.96）mg／L，第3、5、8天结果分别为（1.82±1.96）、（1.82±2.02）、（1.79±1.95）mg／L，检测结果与第1天检测结果差异无统计学意义（P＞0.05），说明新鲜血清样品在实验室常规冷藏条件下至少可以稳定8d。回归分析同样显示新鲜血清样品在实验室常规冷藏条件下至少稳定8d。见表1。

表1 稳定性检测回归分析

2.2 Bio-RAD质控品和自制品控物的室内质控检测结果第1个月不同浓度室内质控品检测结果比较，Bio-RAD质控品和自制质控品的图形基本相似，说明质控效果相近。见图1、2。

图1 第1个月低浓度质控品检测结果

图2 第1个月高浓度质控品检测结果

图3 第2个月低浓度质控品检测结果

图4 第2个月高浓度质控品检测结果

图5 第3个月低浓度质控品检测结果

当第1个月后，根据统计得到的x、SD制订后续室内质控的控制线，以13S，22S为质控规则进行质量控制。第2个月未检测出失控结果。第3个月在第13质控批次，两个浓度水平的质控品均检出失控结果，但两种质控物的效果相似，见图3～6。

图6 第3个月高浓度质控品检测结果

3 讨 论

室内质控检测旨在监控实验室常规检测工作的精密度，提高实验室工作中批内、批间标本检测的一致性，保障向临床提供准确的实验数据，从而帮助正确判断疾病类型、发展趋势及决定治疗方案［7-8］。在采用切实可行的室内质控工作方案中，使用基质与临床标本接近的质控品是最理想的，其优势在于与实际检测标本有相同的基质，能真正体现标本检测过程中的状况，但同时也存在质控品存放稳定时间的问题，如果使用不稳定的质控品进行质控，结果将毫无意义［9-10］。本研究结果中，第3个月在同一点高、低浓度Bio-RAD质控品各有1次超过2SD，而用自制质控品也能检出该失控点，符合22S规则而判为失控结果，经查为当天试剂装载错误所致。从本研究结果中也发现，每周一的结果普遍低于周二，回顾稳定性试验结果发现，1天结果差异无统计学意义（P＞0.05）。原因可能是周末工作量小，分析仪中试剂剩余量较多，周一加入新试剂量少，而本研究中Cys-C检测采用颗粒增加免疫比浊法，试剂由于长时间放置，导致其中致敏抗体的颗粒沉淀，从而影响检测结果。因此，应降低周六试剂加载量上限，同时在周一加入新试剂后增加混匀次数。以此作为预防性措施未发生上述现象。本研究结果显示，Cys-C的浓度在临床新鲜血清标本冷藏于普通冰箱时，至少可以稳定8d，说明新鲜血清标本可以代替商品化的质控用于常规室内质控［11］。

通过验证并确定新鲜血清标本的稳定时间，发现在其稳定期内作为质控品进行室内质控是完全可行的。这对没有商品化质控品的检测项目，提供了一种可行的室内质控方式，同时对于降低实验室成本也有一定意义。除节省购买质控品所需资金外，由于以新鲜血清标本制备的质控品与临床检测标本具有相同的特性，减少了基质效应的影响，使该方法可更加准确地反应实际情况，更能有效检出失控事件。而且商品化质控品浓度不可以选择，而临床新鲜血清标本则可以选择，这样便能保证临床关注点的标本检测结果准确性，保障检测结果的质量。

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