绿色养殖仪（臭氧发生仪）在犊牛圈舍空气的消毒试验研究

（新疆兵团第八师133团机关，石河子市，832064） 刘东军

高新技术产品--“畜禽绿色养殖仪”，对养殖环境、饮用水采取高科技等离子体活氧技术处理，可以有效杀灭空气中的病原微生物，减少疾病的发生。为实现禽畜高效养殖、有效防治疾病、消除药物残留，为养殖户节约成本，增产增收提供了一整套切实可行的先进技术方案，开创了国内禽畜绿色养殖之先河。

臭氧的作用是降低空气和饮水中的有害的病原菌；提高水中不溶性氧气含量；限制有害消毒剂的副产物：DBPS的产生。使用后圈舍空气感到清新，臭氧可以降解圈舍的氨气和硫化氢等气体，减少有害气体的浓度。

1 材料

1.1 主要设备

臭氧发生仪，风冷臭氧发生仪；XKH-OZ15G型

DHG-9076A型电热恒温培养箱（上海精宏试验设备有限公司）、Sw-cj-2F无菌操作台（苏净集团安泰公司）、CX21光学显微镜（OLMPUS）、PHSF-4A型酸度仪（上海）。CTH1000澳洲新仪器AIKE氨气检测仪。JD-60便携型泵吸式臭氧检测报警仪。

1.2 主要试剂

普通营养琼脂培养基、亚硒酸钠增菌培养基、革兰氏染液（草酸铵结晶紫溶液，95%酒精溶液，沙黄溶液，鲁格氏碘溶液）。

2 方法

2.1 培养基制备

2.1.1 普通营养琼脂培养基

取普通营养琼脂培养基45g，加入1 000mL蒸馏水中，加热溶解。用氢氧化钠调节PH值为7.2～7.6。121℃15min高压灭菌，高压灭菌后的培养基置于超净工作台内分装培养皿，静止凝固后，短期放置在4℃冰箱中备用。

2.1.2 亚硒酸钠增菌培养基

取亚硒酸钠增菌培养基36g，加入1 000ml蒸馏水中，加热溶解。用氢氧化钠调节PH值为7.2～7.6。121℃15min高压灭菌，高压灭菌后的培养基置于超净工作台内分装培养皿，静止凝固后，短期放置在4℃冰箱中备用。

2.1.3 普通羊血琼脂平板

牛肉膏0.30g，蛋白胨1.00g，氯化钠0.50g，磷酸二氢钾0.10g，琼脂1.5g蒸馏水100mL，将上述成分混匀，加热溶解，调PH7.2～7.6左右。121℃高压灭菌15min，冷却至45℃后加入10%的无菌脱纤维绵羊血，置于超净工作台内分装培养皿，静止凝固后，短期放置在4℃冰箱中备用。

2.2 犊牛圈舍消毒前后微生物检测

2012年12月，试验地点选择在石河子133团红光牧业奶牛场2号犊牛舍。2号犊牛舍空间400m3，室温20℃时空气密度1.205kg/m2。安装一台XKH-OZ15G型风冷臭氧发生仪，臭氧发生仪每小时生产15g臭氧，每次消毒时间2h，总共产生30g臭氧，理论上圈舍中臭氧浓度62.24PPM，实际检测中，用JD-60便携型泵吸式臭氧检测报警仪检测，臭氧浓度为3～6PPM。这与圈舍空气流动有关和臭氧分子的稳定性差有关。

选择圈舍四周和中央总共6个点，分别在消毒前和消毒后各放置上述3种培养基（培养基选择普通营养琼脂、亚硒酸钠增菌培养基和普通羊血琼脂平板）培养皿各6个，平皿直径13cm。培养皿开盖10s后，盖上培养皿的上盖，放置在培养箱中37℃培养24s后，观察结果，计算菌落总数。

2.3 菌落计数

培养箱中37℃培养24小时后的培养皿菌落计数，分别计数个培养基上的菌落总数，并计算出消毒前后每平方米圈舍中微生物的总数。

2.4 涂片镜检

无菌操作选择培养皿中典型的菌落，涂片、火焰固定、染色、干燥后用显微镜观察。

3 结果

上述试验在早晨和傍晚各进行一次，共进行3天，将6次的试验结果计算平均数值。

3.1 普通营养培养基试验结果

早晨消毒前每个培养皿中有菌落429.4个，消毒后215.6个，消毒后每个平皿菌落减少了213.8个，减少率为49.79%。傍晚消毒前每个培养皿中有菌落446.7个，消毒后231.4个，消毒后每个平皿菌落减少了215.3个，减少率为48.19%。每个平皿面积：0.0 132 665m2。圈舍消毒前后的菌落总数分别为：33 019.3个/m2，16 846.9个/m2，消毒后圈舍菌落减少16 172.4个/m2。详见表1。

表1 普通营养琼脂培养基试验结果（臭氧发生仪使用前后圈舍菌落计数结果）

表2 亚硒酸钠增菌培养基试验结果

3.2 亚硒酸钠增菌培养基试验结果

早晨消毒前每个培养皿中有菌落342.1个，消毒后219.4个，消毒后每个平皿菌落减少122.7个，减少率为35.87%。傍晚消毒前每个培养皿中有菌落446.5个，消毒后227.3个，消毒后每个平皿菌落减少219.2个，减少率为49.09%。每个平皿面积：0.0 132 665m2。圈舍消毒前后的菌落总数分别为：29 721.5个/m2，16 835.6个/m2。详见表2.

3.3 普通羊血培养基试验结果

早晨消毒前每个培养皿中有菌落461.3个，消毒后206.4个，消毒后每个平皿菌落减少254.9个，减少率为55.26%。傍晚消毒前每个培养皿中有菌落489.1个，消毒后197.3个，消毒后每个平皿菌落减少291.8个，减少率为59.66%。每个平皿面积：0.0 132 665m2。圈舍消毒前后的菌落总数分别为：35 819.5个/m2，15 215个/m2。详见表3。

表3 普通羊血培养基试验结果

3.4 犊牛圈舍臭氧消毒试验前后呼吸道病发病率和死亡率的变化

2012年12月到2013年1月，石河子133团红光牧业奶牛场犊牛2号舍中主要的呼吸道病原体有支原体、巴氏杆菌、肺炎双球菌。呼吸道发病的犊牛日龄集中在20～30日龄的犊牛，发病急，病程长，症状明显，死亡率高。治疗不及时或治疗不当死亡率较高。2012年12月间犊牛舍有呼吸道病症状的犊牛117头，通过治疗治愈74头，死亡26头，治疗后失去饲养价值的17头。2012年12月到2013年1月通过使用臭氧消毒机净化空气，使用粘膜病疫苗和肺炎支原体、肺炎双球菌和巴氏杆菌三联灭活疫苗等措施有效控制犊牛呼吸道病的发病，发病率和死亡率明显下降。2013年1月呼吸道病的发病38头，经治疗后死亡9头，淘汰2头，有效控制犊牛呼吸道病的发生。

4 讨论

4.1 臭氧净化空气的作用

臭氧在净化空气方面主要作用为空气消毒灭菌，并有效降解由粪便中所产生的氨气和硫化氢等气体。净化空气创建一个清新的饲养环境。减少饲养环境中的病原浓度，阻断空气中的病原微生物的传播，使畜禽健康的生长。试验中由于条件的限制没有检测空气中支原体的浓度，但通过检测空气中菌落总数的变化可以间接说明，臭氧在空气消毒方面的作用。消毒后空气中菌落总数明显减少，病原菌减少，可以有效降低病原传播的风险，降低发病率。

臭氧充注到养殖圈舍内，首先与粪便所散发的异臭进行分解反应去除异臭，当异臭去除到一定程度稍闻到活氧味时，圈舍内空间的细菌、病毒、真菌等病原微生物基本随之杀灭。应用臭氧技术之后，有效地达到净化空气作用，进入应用臭氧技术的养殖圈舍内很直观地让人感觉到空气明显清新。

4.2 臭氧在疾病预防控制方面作用

“畜禽绿色养殖仪”采用低温等离子体高新技术，突破常规饲养模式，在畜禽的饲养过程中可以有效地遏制畜禽疫病的发生，促进饲料转化率，保证畜禽的成活率并促进健康生长。使用“畜禽绿色养殖仪”后，臭氧可以有效杀灭圈舍中的微生物，减少细菌性疾病的发生，畜禽发病率、死亡率降低，用药量减少。畜禽生长、生产性能大为改善。用药减少，药残必然达标，这样就提高了畜禽产品的质量。提供大量优质、无药残、安全的畜禽产品，具有重大的社会效益。

4.3 用臭氧净化消毒水质

臭氧净化消毒饮水比传统使用化学消毒的方法来得快速度与有效率。臭氧具有摧毁所有已知的细菌、病毒，它不但能摧毁水中的微生物，同时亦可使水中的金属与矿物质沉淀，金属与矿物质沉淀后则可经简单过滤而从水中清除掉。

随着畜牧业的发展，畜禽养殖向着集约化发展，养殖密度不断增加，畜禽生产中产生大量的氨气、硫化氢的有害气体严重威胁畜禽健康。“畜禽绿色养殖仪”，对养殖环境、饮用水采取高科技等离子体活氧技术处理，实现了禽畜高效养殖、有效防治疾病、消除药物残留，为养殖户节约成本。