王正军,吕 明,沈 艳,李 羿△
1.湖北医药学院附属太和医院 药学部(十堰 442000);2.成都医学院 药学院(成都 610083)
莪术首载于《药性论》,为姜科植物蓬莪术CurcumaphaeocaulisVal.、广 西 莪 术Curcuma kwangsiensisS.G.Lee et C.F.Liang或温郁金CurcumawenyujinY.H.Chen et C.Ling的干燥根茎,分别习称蓬莪术、广西莪术和温莪术。莪术主要含有挥发油和姜黄素类化合物两大类化学成分,临床用于治疗癥瘕痞块、瘀血经闭、胸痹心痛和食积胀痛[1]。
蓬莪术、广西莪术和温莪术的道地产区分别为四川、广西和浙江[2]。由于基原和产地不同,三种莪术所含化学成分和含量存在差异,不同差异对其临床疗效将产生较大影响。因此,本文结合性状鉴定和理化鉴定的优势,以期建立一种快速简便的综合鉴定方法用于多基原莪术的生药鉴定,确保莪术临床用药的安全有效。
药材为产地采集或购买,经成都医学院生药学教研室李羿教授鉴定为莪术。
Panasonic数码相机、15cm 直尺、刀片、AS5150型超声仪、电热鼓风干燥箱、展开槽、0.3mm点样玻璃管。
薄层层析硅胶G(青岛海洋化工有限公司)、羧甲基纤维素钠(青岛海洋化工有限公司)、石油醚(天津市富宇精细化工有限公司)、丙酮(成都市科龙化工试剂厂)、乙酸乙酯(天津市富宇精细化工有限公司)、98%硫酸(成都市方舟化学试剂厂)、香草醛(天津市科密欧化学试剂有限公司),以上试剂均为分析纯。
通过双目观察判断三种基原莪术的外部形态、颜色、大小、质地和断面特征,用直尺测量其大小;通过嗅觉判断其气味特点[3]。
2.2.1 石油醚超声提取物样品液的制备 分别取三种基原莪术粗粉各0.5g,置于3支具塞离心管中,加石油醚(30~60℃)各10mL,超声处理20min,静置片刻,用漏斗过滤,取滤液于旋转蒸发器中蒸干溶剂,加无水乙醇定容至1mL,待用[4]。
2.2.2 薄层鉴定 分别用点样玻璃管各吸取约10μL的3种莪术石油醚超声提取物样品液,在已活化的硅胶板点上样品,以石油醚、丙酮和醋酸乙酯(94∶5∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸乙醇溶液,于烘箱中105℃加热至斑点显色清晰[5]。
3.1.1 蓬莪术 长圆形或卵圆形,基部钝圆,顶端钝尖,长2~5.5cm,直径1.5~2cm。表面土黄色至灰黄色,粗糙,有明显的环节凸起,中上部较稀,基部较密,两侧各有一列下陷的芽痕和类圆形的侧生根茎痕,有的可见刀削痕。质坚实而重,难折断,击破面黄绿色,稍带粉性,内皮层环明显,皮层与中柱易分离。气微香,味微苦而辛(图1)。
图1 蓬莪术切片
3.1.2 广西莪术 长圆形或卵形,基部钝圆,顶端多钝尖,长3.5~7.5cm,直径1.5~3cm。表面黄棕色至灰色,光滑,环节稍凸起或不见,有点须状根痕或残留须根,有的两侧各有一列下陷的芽痕和类圆形的侧生根茎痕。质坚实,难折断,击破面棕黄色至黄褐色,蜡样光泽,皮层与中柱易分离。气浓香,味微苦而辛(图2)。
图2 广西莪术切片
3.1.3 温莪术 长卵形或卵形、纺锤形,基部钝圆,顶端长尖,长4~8cm,直径2~4.5cm。表面深棕色至灰棕色,粗糙,上部环节凸起,基部有圆点状下陷的须根痕,有刀削痕。质坚实而重,击破面黄褐色至棕褐色,角质状,内皮层环明显,并有点状或条状维管束散在。气香或微香,味苦(图3)。
图3 温莪术切片
3种基原莪术在外观性状上存在差异。通过肉眼观察外部形态特征,发现蓬莪术和广西莪术的基部均为钝圆,而温莪术基部为钝圆或钝尖;3种基原莪术个体的平均大小按从小到大的顺序依次是蓬莪术、广西莪术和温莪术;用手触摸,蓬莪术和温莪术表面均粗糙,而广西莪术表面较为光滑;用鼻嗅气味,广西莪术的气味浓重,而蓬莪术和温莪术的气味均较轻淡。总之,根据性状鉴定可以从3种基原的莪术中初步鉴定出广西莪术,而蓬莪术和温莪术由于性状相似尚难以鉴定区分。
3种基原莪术粉末的石油醚超声提取物均为透明澄清物,但颜色差异突出:广西莪术的石油醚超声提取物颜色最深,显金黄色;蓬莪术的石油醚超声提取物颜色其次,显浅黄色;温莪术的石油醚超声提取物颜色最浅,显浅紫色。通过比较薄层色谱图上的斑点数目可以鉴别出蓬莪术,而通过比较另两个样品的斑点Rf值和颜色可以区分广西莪术和温莪术(图4、表1)。
笔者结合多基原莪术的性状鉴定和理化鉴定的优势,建立了一种多基原莪术的综合鉴定法,可实现对其快速准确地鉴定[6],以凸显不同基原莪术药材的差异,保证其临床用药的安全有效。除了常规的性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定外,一些新的鉴定技术也有望应用于多基原莪术的生药鉴定。目前,电子鼻、DNA分子鉴定等新技术由于其突出的优势,被广泛应用于人参、西洋参和川芎等中药材的鉴定中,并成为生药鉴定的热点[7-10]。 电子鼻、DNA 分子鉴定应用于多基原莪术的鉴定,为建立其快速准确的鉴定方法提供了新的思路。
图4 三种不同基原莪术石油醚超声提取物薄层色谱图
表1 三种不同基原莪术石油醚超声提取物的薄层色谱图比较
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