胃癌组织中趋化因子受体CXCR7的表达变化及意义

辛 琪，张 娜，张传山，杨 艳，刘 炜

(1天津市第三中心医院天津市人工细胞重点实验室，天津300170;2天津市大港医院)

胃癌是人类常见的消化道肿瘤之一，胃癌患者的预后与肿瘤的侵袭、转移密切相关。远处转移已成为提高患者生存率的主要障碍，因此研究胃癌转移的分子机制，探寻能够治疗胃癌的潜在靶点具有重要的现实意义。近来研究表明，基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体在肿瘤的生长、侵袭、转移过程中发挥重要的调控作用，而SDF-1被认为是通过其惟一受体CXCR4起作用。近来研究却发现，SDF-1还存在另一趋化因子受体CXCR7，并认为其对肿瘤进程也有潜在作用［1，2］，但目前对于 CXCR7在胃癌中的作用国内未见报道。本研究利用免疫组化及免疫荧光染色法检测胃癌组织中CXCR7的阳性表达率及部位，并探讨其意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2009～2011年在天津市肿瘤医院行胃癌根治手术的160例患者的石蜡标本作为观察组，均经HE切片复读确认，患者术前未经任何针对肿瘤的治疗。按照Lauren's分型法分为肠型胃癌120例(包括高中分化管状腺癌78例，低分化管状腺癌42例)，弥漫型胃癌40例(均为印戒细胞癌)。同时选取天津市大港医院因胃良性病变行胃次全切除术的30例患者的石蜡标本作为对照组，两组性别、年龄均具有可比性(P均＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 组织CXCR7表达水平及部位检测 所有标本均经10%中性甲醛固定，常规石蜡包膜，4 μm连续切片。CXCR7稀释浓度为1∶100，采用免疫组化法检测组织CXCR7表达，严格按照说明书操作。CXCR7阳性着色主要定位于细胞质，阳性信号呈淡黄色或棕黄色颗粒。随机选取5个高倍视野(×400)，根据阳性细胞百分比计分:无阳性细胞为0分，1%～29%为1分，30%～59%为2分，≥60%为3分;染色强度:阴性为0分，轻度淡黄色为1分，中度棕黄色为2分，深棕黄色为3分;按阳性细胞百分比计分×染色强度计分，＜2计为阴性，≥2为阳性。

采用免疫荧光双染法检测组织CXCR7表达部位，红色代表CXCR7阳性部位，绿色代表CD31血管内皮阳性部位，黄色代表CXCR7与CD31共同阳性表达部位。

1.2.2 资料收集方法 记录观察组的临床病理资料，包括性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度、肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移和肿瘤临床分期等。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS16.0统计软件。率的比较采用 χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CXCR7阳性表达率及表达部位比较 观察组CXCR7阳性表达率为78.75%(126/160)，对照组为6.67%(2/30)，P ＜0.01。观察组 CXCR7 在间质纤维母细胞和血管内皮的阳性表达率分别为81.88%(131/160)、88.75%(142/160)，对照组分别为 23.33%(7/30)、33.33%(10/30)，P 均 ＜0.01。

2.2 观察组CXCR7表达与临床病理参数的关系见表1。

表1 观察组CXCR7表达与临床病理特征的关系(例)

3 讨论

近年来，趋化因子及其受体在肿瘤的发生、发展及转移过程中发挥着极其重要的作用，其中以CXCL12/CXCR4反应轴研究较为突出。CXCL12与CXCR4结合能促进癌细胞迁移、侵袭、黏附、增殖以及肿瘤新生血管生成，介导乳腺癌、前列腺癌等恶性肿瘤靶向转移。近来发现，新受体CXCR7可与趋化因子 CXCL12、CXCL11高亲和力结合，从而使得CXCL12只能与CXCR4这个惟一受体结合而发挥生物学效应的观点发生改变。已有研究表明，本研究中，观察组CXCR7阳性表达率明显高于对照组(P＜0.05)，提示CXCR7在胃癌发生发展过程中起着重要作用。

CXCR7 在多种肿瘤细胞［3～9］中参与了肿瘤的黏附、侵袭及转移等重要过程，然而对于不同类型的肿瘤，研究结果存在差异［10～12］。在乳腺癌的研究中发现，CXCR7和CXCR4都能够促进乳腺癌的远处转移，但是CXCR4在乳腺的浸润和转移中起主要作用;CXCR7主要刺激VEGF的表达及微血管生长，进而促进原始肿瘤的生长［13］。本研究观察组中，肿块直径≥5 cm、肠型胃癌、浸润深度达T3～T4层、临床分期Ⅲ～Ⅳ期者CXCR7阳性表达率明显升高(P均＜0.05)。提示在胃癌中，CXCR7的高表达可能促进原始肿瘤的生长及远处转移。以往认为，弥漫型胃癌更容易发生转移，其侵袭性更强。但本研究中肠型患者CXCR7表达却明显高于弥漫型，这一结论是否准确以及其相关机制，仍有待进一步证实。

恶性肿瘤细胞在肿瘤宿主微环境的诱导下迅速生长，通过产生和分泌细胞因子而刺激血管和间质增生，逐步导致肿瘤细胞增殖和侵袭。Orimo等［14］研究表明，从人乳腺癌中分离的肿瘤相关性成纤维细胞较从同一患者正常乳腺部位分离的成纤维细胞能显著地促进乳腺肿瘤细胞的生长，原因是其分泌CXCL12与受体结合而刺激肿瘤细胞生长。本研究中，观察组CXCR7在间质纤维母细胞的阳性表达率明显高于对照组，说明在胃癌组织中的成纤维细胞分泌SDF-1与受体CXCR7结合刺激肿瘤细胞的生长，而不是与CXCR4结合发挥作用。同时本研究发现，观察组血管内皮的阳性表达率明显升高，提示CXCR7在胃腺癌中具有促进新生瘤性血管发生的作用。Miao等［3］通过免疫组化法检测发现，97%的人类乳腺癌血管内皮细胞中CXCR7表达为强阳性，而在正常乳腺组织血管内皮细胞中几乎检测不到，与本研究结果一致。

因此，胃癌组织中CXCR7表达升高，并促进肿瘤微环境中间质纤维母细胞和血管内皮的生成，营造肿瘤生长和转移的微环境;同时，检测胃癌组织中CXCR7的表达有助于判断病情与预后。然而，关于CXCR7在胃癌中转移的作用机制及其信号通路，则有待进一步研究。

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