土茯苓及其单体落新妇苷的免疫抑制作用

孟庆芳　李衍滨

摘要：土茯苓性甘、淡，平和，归肝、胃经，有解毒、除湿、通利关节之功，在临床上应用广泛。近代药理研究表明土茯苓及单体落新妇苷具有选择性免疫抑制作用，这一特性对于细胞免疫依赖的自身免疫性疾病和变态反应性疾病的治疗具有重要意义。

关键词：土茯苓；落新妇苷；选择性免疫抑制

中图分类号：R28文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）10-0094-02

土茯苓为百合科植物光叶菝葜（Smilax glabra Roxb）的干燥块茎，是中医临床治疗中的常用药物，其性甘、淡，平和，归肝、胃经，有解毒、除湿、通利关节之功。历代古籍记载，如《本草纲目》：“土茯苓……健脾胃，强筋骨，去风湿，利关节，止泄泻，治拘挛骨痛，恶疮痈肿。解汞粉、银朱毒。”《滇南本草》：“治五淋白浊，兼治杨梅疮毒、丹毒”。《本草备要》：“治杨梅疮毒，瘰疬疮肿。”

土茯苓临床上常用来治疗梅毒和淋病，还可见于风湿热、类风湿性关节炎、其它多种结缔组织疾病[1]及银屑病、慢性肝炎、肾炎等免疫性疾病的治疗应用中[2]。现代药理研究也表明，土茯苓除具有抗心肌缺血和对心脏缺血-再灌注损伤的保护作用，β-受体阻滞作用，抗动脉粥样硬化和抗血栓作用，利尿、镇痛作用，抗肿瘤、抗胃溃疡、抗菌作用，及对棉酚的解毒作用以外，还具有选择性免疫抑制作用[3]。自发现土茯苓具有选择性免疫抑制作用以来，研究者们已开展一系列实验对其免疫调节机制进行探讨，并期望将其应用于自身免疫性疾病及变态反应性疾病中。目前，各文献中所提到的土茯苓及其有效成分落新妇苷对免疫应答的抑制作用涉及到以下几个方面：（1）抑制活化的T淋巴细胞的功能并降低其增殖能力；（2）调节Th细胞相关的细胞因子之间的平衡；（3）上调具有免疫负向调控作用的Treg细胞数量；（4）抑制机体免疫系统中最强有力的抗原呈递细胞—树突细胞的成熟及其抗原呈递能力，从而影响免疫应答的启动、调控和维持。为系统全面认识土茯苓的免疫抑制机制，现将目前对土茯苓及其有效成分落新妇苷免疫抑制作用的研究现状概述如下。

1土茯苓的免疫抑制作用

南京大学徐强教授带领的课题组最初为探究土茯苓的免疫药理作用，将土茯苓水提取物对迟发型超敏反应（DTH）模型，即2，4，6-三硝基氯苯（PC）诱导的接触性皮炎小鼠和绵羊红细胞（SRBC）诱导的足跖反应小鼠，分不同时效进行灌胃干预，发现土茯苓水提取物可显著抑制DTH，且攻击后给药时其抑制作用更强。同时，对小鼠脾脏空斑形成细胞（PFC）数及血中溶血素水平进行测定来分析对机体体液免疫的影响，发现土茯苓水提取物对小鼠抗SRBC抗体形成的细胞数（IgM-及IgG-PFC数）无明显影响，但其溶血空斑明显较环磷酰胺对照组大，血清溶血素水平呈增高趋势。此外，与环磷酰胺对照组相比，土茯苓对脾重和脾指数无影响。以上结果表明，土茯苓对体液免疫反应无抑制作用，但可选择性地抑制细胞免疫反应，从而首次发现土茯苓具有选择性免疫抑制作用，并且其毒副作用较低[4]。

为进一步验证土茯苓选择性免疫抑制的特性，又将土茯苓水提取物应用于角叉菜胶诱导的炎性水肿、棉球诱导的肉芽肿形成及类风湿性关节炎的动物模型—大鼠佐剂性关节炎的试验中，发现土茯苓水提取物对这些免疫疾病均有治疗作用，通过抑制PGE2的合成和释放来发挥其抗炎活性，明显下调过分活跃的巨噬细胞的功能活性，抑制IL-1，TNF 和 NO的产生，并上调T淋巴细胞的功能、增加IL-2的产生[5～6]。

2落新妇苷的免疫抑制作用

徐强教授为探索土茯苓选择性免疫抑制作用的物质基础，其对土茯苓的水提取物进行分离、提取，发现土茯苓中所含的主要黄酮类化合物——落新妇苷同样具有选择性免疫抑制作用。徐强教授大量研究证明落新妇苷对免疫性肝损伤[7]，胶原诱导的关节炎[8]和接触性过敏反应[9]均具有免疫抑制作用。其免疫抑制机制包括诱导浸润至肝脏的CD4+T淋巴细胞[7]和植物凝集素（PHA）活化的Jurkat T细胞的凋亡[10]；通过下调MMP活性而抑制活化T细胞的迁移[8，11]；诱导内源性IL-10的产生，并明显提高IL-10下游的信号分子SOCS-1和SOCS-3的表达[9]；抑制活化的T淋巴细胞CD44的表达以降低脾细胞的粘附能力，纯化从刀豆蛋白A诱导的肝损伤小鼠中分离出来的T淋巴细胞，同时降低TNF-α的分泌[12～13]。这些结果表明落新妇苷具有独特的免疫抑制模式，即选择性地抑制活化的T细胞，这不同于其他免疫抑制剂的免疫抑制机制。落新妇苷的该特性提示其更适用于慢性免疫性疾病的长期治疗，且毒副作用更少。如，落新妇苷治疗组的胸腺和脾脏重量几乎未受到影响，而地塞米松则显著降低了器官的重量[11]。经过该系列研究，徐强教授总结，落新妇苷选择性免疫抑制作用的特点包括：选择性地抑制疾病的效应阶段而不影响诱导阶段；选择性地抑制活化T细胞而不影响正常T细胞及其他组织细胞；选择性抑制活化的Th1细胞而不影响Th2细胞[14]。

陈等在心脏移植术后的抗排异反应的研究中，发现落新妇苷通过抑制IL-2、γ-IFN、IL-12、IL-18等Th1型细胞因子的表达，促进Th2型细胞因子IL-4、IL-10的表达，使免疫反应由Th1型向Th2型偏移，从而明显延长术后移植物的存活时间[15～16]。

对于自身免疫疾病及变态反应疾病的治疗，除上述提到的对Th细胞及其分泌的细胞因子紊乱状态有平衡调节作用以外，落新妇苷对树突细胞、Treg细胞亦有影响，落新妇苷能剂量依赖性地抑制DC细胞表面MHC-Ⅰa和共刺激分子CD40、CD80和CD86的表达，抑制DC的成熟，明显提高DC抗原吞噬能力，刺激DC分泌IL-10、TGF-β，抑制DC分泌IL-1β、IL-12 p40；同时下调DC刺激同种反应性T细胞增殖的能力[17～19]。此外，落新妇苷还能上调CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量，从而增强对T细胞活性的抑制效应，调整过度免疫状态[19]。endprint

3展望

现今，为治疗自身免疫性疾病和变态反应性疾病，临床上广泛应用免疫抑制剂，如糖皮质激素、环磷酰胺、环孢素A等，但由于其对免疫应答的全面抑制，导致诸多毒副作用，如胃肠道反应、免疫力下降、体液平衡紊乱等等，这就需要寻求选择性高、毒副作用小的新型免疫抑制剂，而从目前研究现状来看，土茯苓及其单体落新妇苷对此选择条件的符合程度较高。但土茯苓及落新妇苷对免疫系统具体的调节机制，尤其是其选择性免疫抑制机制，尚未得到全面的阐释，仍需进一步深入探究。在选择性免疫调控的理念指导下，土茯苓及其单体落新妇苷在细胞免疫依赖的免疫疾病治疗上拥有着广阔的开发前景。

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（收稿日期：2014-06-28）endprint