实验蝗虫精巢的压片及观察实施措施

何生祥

摘 要：本文从蝗虫染色体组成、蝗虫性成熟时间、雌雄蝗虫分辨、解剖方法、精巢的识别和固定、保存等方面对教材进行了详细的补充，有助于实验教师方便、有效地备课和准备实验，有利于推动生物实验的普及和开展。

关键词：实施；措施

中图分类号：G632 文献标识码：B 文章编号：1002-7661（2014）08-226-01

北师大版高中生物教材必修2中的实验“蝗虫精巢的压片及观察”选取性成熟的雄蝗虫为观察减数分裂的实验材料，主要是因为蝗虫精巢取材方便，标本制备方法简单，染色体数目较少，分裂过程清楚。蝗虫初级精母细胞染色体数2n=22+X，经过减数分裂形成四个精细胞，每个精细胞染色体数为n=11+X或n=11，分裂各期图像明显，实在是不可多得的材料（蝗虫的性别决定与人类不同，雌性有两条XX染色体，雄性为XO，即只有一条X染色体，没有Y染色体）。

但此实验却往往难以开展，主要原因在于：1实验时间与雄蝗虫性成熟时间不一致（雄蝗虫性成熟时间为8月—9月，而必修2教材的上课时间为3月—6月），实验材料难以采集；2如想另选材料，则难以找到合适的替代材料；3 北师大版教材配套的教师用书上对此实验没有完善的补充资料，而且在网上查不到北师大版教材的相关资料，不利于实验教师备课和准备实验。

经过两年来的实验探索、参考相关资料和对新教材进行研究，本人找到了解决问题的一些方法，在此详述如下，以供大家探讨，并期待指正。

一、捕捉雄蝗虫

雄蝗虫性成熟时间8月—9月，以8月15日至20日之间捕捉为宜。此时蝗虫精母细胞正处于减数分裂旺期，为利于学生完成实验，可适当延长到9月10日，但此时的减数分裂高峰期已过，处于分裂期的细胞数量相对较少。蝗虫雌雄个体的区别方法：一般雄虫个体较小，其腹部末端为交配器，形似船尾，而雌体较大，腹部末端分叉。

二、蝗虫的解剖和精巢的固定：

要制作清晰、处于分裂期细胞较多的蝗虫精巢减数分裂装片，必须要活体解剖蝗虫：捕捉后将雄虫麻醉，去掉第一对步足及翅，在翅基部后方，用解剖剪将其体壁剪开，可见到在其上部两侧各有一块黄色的团块，这便是蝗虫的精巢（精巢由许多排列在一起的精巢小管组成，这些小管就是精细管），取出精巢，去除脂肪，立即放入CarnoyⅠ固定液（冰醋酸：乙醇=1：3）中固定12小时，用吸水纸吸去固定液，然后分别用95%和85%乙醇脱水各30min（解离、脱水并利于保存组织中的核酸），最后放在70%乙醇中，于4℃冰箱中保存，时间不能超过一年。

固定的目的是采用渗透力强大的固定液能迅速穿透细胞将细胞杀死，使蛋白质沉淀，尽量保持原有的状态并维持染色体结构的完整性，还能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。这样把活细胞固定后，有利于后续的解离和染色。

解决了材料的采集和固定问题，在什么时间进行实验，就可以根据教学进度来安排了。到时按照教材上的实验方法完成实验。

三、实验

1、染色

挑取一段精细管，置染色皿上，洗去保存液并吸干，滴加一滴醋酸洋红染色液，镊子轻轻撕开稍稍捣碎，染色5～15 min。

2、压片

将染了色的精细管，置载玻片上，进一步捣碎，再滴加一滴醋酸洋红染色液，加盖玻片，在酒精灯上快速通过2-3次，盖上吸水纸，用拇指隔着吸水纸将材料适当用力压之，再用带橡皮头的铅笔轻轻敲击盖片，使细胞分散成单层细胞（敲击时勿使盖片移动）。

3、观察

对照教材上图2-8，在低倍镜下找到蝗虫精母细胞减数分裂的各个时期，再转到高倍镜下仔细观察。

通过显微镜，可看到除正在进行凑数分裂的细胞外，还可看到精原细胞的有丝分裂，其细胞肥大，属于体细胞的一般有丝分裂，染色体看上去比减数分裂细胞为多，因此要注意区分。

通过以上方法，既保证了实验效果，又使得实验时间不爱限制，有助于实验教师方便、有效地备课和准备实验，有利于推动生物实验的普及和开展。

参考文献：

[1] 王芸庆 谢荣林《细胞生物学实验手册》第四版.人民教育出版社，1995（1）

[2] 彩万志《普通昆虫学》中国农业大学出版社，2001（7）

[3] 《水稻根尖染色体标本制备》

[4] 《病理制片技术手册》第二章组织固定