基层医院TPPA与RPR联合检测对梅毒患者的诊治价值

金淑芳

(蓟县人民医院检验科,天津 蓟县301900)

梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的慢性全身性性传播疾病。近年来，在全球范围内发病率逐年提高，且有不断蔓延的趋势，尤其在东南亚等发展中国家发病率更高[1]。梅毒早期的临床表现比较复杂，呈多样性，再加上有些患者陈述的病史缺乏真实性及不正当的使用抗生素，给医生的诊断造成困扰，容易造成漏诊或误诊。因此，血清学检查就成了梅毒诊断的重要依据。梅毒螺旋体感染人体后，体内能产生两种类型的抗体，一类是针对梅毒螺旋体产生的特异性抗体-IgG和IgM；另一类是非特异性抗体-反应素，是梅毒螺旋体感染后宿主细胞释放的类脂质和螺旋体表面脂质的抗体。本组对370例疑似梅毒患者的血清分别进行梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 (treponema pallidum particle assay，TPPA)和快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma reagin circle card test，RPR)， 以探讨二者联合检测在梅毒的诊断、疗效观察和判断预后方面的价值。

1 资料与方法

1.1 标本来源 370份血清标本采自2012年1月至2013年3月首次来本院皮肤性病科、泌尿外科和妇科门诊就诊的疑似梅毒患者。其中男179例，年龄 18～59岁，女 191例，年龄 17～60岁。

1.2 仪器与试剂 微量震荡仪，RPR旋转仪，TPPA试剂为日本富士瑞必欧株式会社生产，RPR试剂为上海科华生物技术有限公司产品，所有试剂均在有效期内使用。

1.3 方法 所有试验均严格按照厂家试剂说明书进行操作，每次试验均设阴阳性对照。

1.3.1 TPPA试验 室温条件下，在U形板上用稀释液将每份血清样本倍比稀释，分别形成1:5、1:10、1:20、1:40共4种稀释度，再将未致敏与致敏明胶颗粒试剂分别加入1:20和1:40的稀释血清中，震荡混匀30s，静置2h后观察结果，加致敏粒子孔凝集而加未致敏粒子孔不凝集判断为阳性。

1.3.2 RPR试验 RPR定性试验：分别吸取50μl梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中，另吸取50μl待检血清均匀铺加在纸卡的另一圆圈中，用试剂盒中的专用针头、滴管吸取RPR试剂，分别垂直滴加1滴于上述血清和对照中，用RPR旋转仪水平转动纸卡8min，l00r／min，然后3min内在光线充足处判断结果。RPR定量试验：对检测样本进行倍比稀释，然后按定性试验方法进行检测，以最大稀释倍数凝集处作为最终滴度。

2 结果

370例疑似梅毒患者的血清标本中，TPPA阳性129例，阳性率为34.86%(129/370)；RPR阳性80例，阳性率为21.62%(80/370)。见表1。

表1 TPPA法与RPR法检测结果比较

3 讨论

梅毒螺旋体感染人体后，特异性抗体IgM产生最早，约在感染后2周即可出现，随着疾病发展，lgG抗体才慢慢上升，经过有效治疗后IgM抗体消失，而IgG抗体则持续存在，甚至终身不消失，血清反应持续阳性。而非特异性抗体的出现较特异性抗体约晚 2～3周[2]。TPPA用梅毒螺旋体Nichols株的精制菌体成分包被在明胶粒子上作抗原，能同时检测IgG型和IgM型抗体，敏感度高，其发生的非特异性凝集可通过作吸收试验后复检排除，特异性好，感染早期(2～4周)即可检出，是目前公认的梅毒血清确认试验。RPR试验操作简单、快速，抗体效价随着病情的变化而变化，与梅毒的活动性和患者的临床症状密切相关，当梅毒患者接受治疗或疾病处于非梅毒活动期时，RPR水平会迅速下降或消失，容易出现假阴性反应，造成漏检。在某些自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等，RPR还容易出现假阳性反应[3]。因此，RPR不适合作为梅毒的筛选试验。

本组资料中，TPPA阳性的129例患者经临床综合分析最后均诊断为梅毒现症感染者或既往梅毒感染者。而RPR试验的阳性率(21.62%)明显低于TPPA(34.86%)。在TPPA阳性RPR阴性的49例患者中，有19例为梅毒感染的早期，在之后复诊时RPR出现阳性，并且随着病情发展，RPR的滴度呈现上升的趋势；有24例为治疗后转阴；还有6例为以前感染过梅毒，近期又有不洁性接触史而来复诊。有1例29岁女性患者，在治疗过程中，RPR 滴度依次出现 1:2，1:4，1:8，1:32，1:16，1:4，1:2这样明显的峰值变化，又过2个月后RPR滴度却出现了1:16这样的变化，临床分析可能为再感染或复发。可见RPR及滴度的检测适用于梅毒患者的疗效观察以及判断是否复发或再感染。在检测中未发现RPR阳性而TPPA阴性的患者，可能与本组选择的患者人群有关。

文献报道，用ELISA方法检测梅毒患者血清中的特异性抗体与TPPA法结果有较好的一致性，且试剂成本较低、操作简便，可使用全自动酶标仪实现自动化操作，适合大批量标本梅毒的筛查，但ELISA方法存在假阴性反应。TPPA法由于试剂成本高、操作烦琐、耗时较长不适合大量标本的筛查，主要用于确诊试验[4]。正是由于TPPA的敏感度高，特异性好，试剂稳定，不需要专门仪器，肉眼观察判断结果等特点，更适用于标本量较少的基层医院对梅毒患者的直接筛选和确认。

RPR和TPPA同时检出阳性的患者往往是梅毒现症感染者，是临床上可开展治疗的指标之一，本组资料也证明了这一点。但还需要根据临床症状、体征及不洁性行为史综合确诊。尤其是老年患者，由于可能存在基础性疾病，诱导机体产生抗梅毒螺旋体的特异性或非特异性抗体，造成TPPA和RPR试验出现假阳性反应。因此，在否认发病史和疾病接触史的老年人中，梅毒抗体试验阳性不能用正在或曾经感染梅毒解释，阳性结果不能作为患者感染梅毒螺旋体的绝对依据，应结合临床综合分析。梅毒的治疗需要患者的性伴侣同时检测同时进行足剂量、足疗程治疗，才能达到真正的治愈。本组资料中1例29岁女性患者的治疗过程就说明了这一点。

综上所述，由于基层医院门诊患者数量相对较少，对疑似梅毒患者血清直接做TPPA和RPR试验，减少了ELISA法的筛查步骤，可以缩短检测时间方便患者就诊。TPPA和RPR同时阳性有助于梅毒患者的诊断，RPR滴度测定有助于梅毒患者疗效观察和判断预后。

[1]Srisupanant M，Wiwanitkit V.Screening for syphilis by serology of Thai workers going abroad[J].Travel Med Infect Dis,2009,7(3)：169-170．

[2]陈刚.梅毒血清学试验中特异性抗体与非特异性抗体检测的临床应用[J].临床和实验医学杂志,2008,7(2):59.

[3]李爱民,刘斌,蔡峰.3种梅毒血清学检测方法的应用评价[J].国际检验医学杂志,2011,32(15):1718-1719.

[4]黎新桂,周红翠,尹承祥.三种梅毒血清试验方法的应用评估[J].实验与检验医学,2012,30(3):276-277.