广东省和海南省致倦库蚊对常用杀虫剂抗药性的调查研究*

冉 鑫 赵明惠 李春晓 赵彤言**

(1. 安徽医科大学，合肥 230032；2. 军事医学科学院微生物流行病研究所，病原微生物生物安全国家重点实验室，北京100071)

致倦库蚊Culexpipiensquinquefasciatus是广东省和海南省常见的优势蚊种，与人的关系密切，是夜晚入侵室内骚扰吸血的主要卫生害虫(曾林海等，2008)；并且是我国班氏丝虫病和淋巴丝虫病的主要传播媒介，而且是乙型脑炎的传播媒介之一，因此是病媒生物预防控制的主要靶标生物(吴中华等，2009；张金光和霍新北，2011)。杀虫剂的化学防控是蚊虫防控的主要措施之一，有机磷类，氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类杀虫剂目前在生产生活中仍在大量使用。这些杀虫剂的使用导致蚊虫抗药性的产生和持续发展(Pimenteletal.， 1992；孟凤霞等，2011)。为了解我国广东省和海南省不同地区致倦库蚊对常用杀虫剂的抗药性水平，指导杀虫剂的合理使用，笔者于2013年8～9月对广东省和海南省4个不同城市致倦库蚊对常用杀虫剂毒死蜱和克百威的抗性水平进行了测定，现将测定结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1供试蚊虫：敏感品系蚊虫选用采自广东广州，在实验室常规饲养10年以上，未接触任何杀虫剂的致倦库蚊。

自然种群致倦库蚊于2013年8月和9月分别采自广东省湛江市(E110°23′53.05″, N21°11′30.19″)和雷州市(E110°5′48.30″, N20°54′51.40″)以及海南省海口市(E110°21′8.66″, N20°3′17.23″)和陵水市(E110°2′15.01″, N18°30′21.77″)。采集方法选用幼虫勺舀法，采集Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫用于后续的实验。

1.1.2实验用药：杀虫剂选用常用的有机磷类杀虫剂毒死蜱和氨基甲酸酯类杀虫剂克百威，杀虫剂原药(浓度99%)购自北京世纪奥科生物技术有限公司。丙酮为分析纯，由军事医学科学院微生物流行病研究所媒介生物学与防治实验室提供。

1.2 实验方法

采用WHO幼虫浸渍法(Cetinetal.，2005)，具体操作步骤：首先将杀虫剂原液用丙酮配制成5至10个浓度梯度。每个容器(纸杯)中加99 mL过夜脱氯水，之后加1 mL不同浓度梯度的药液，对照组加入1 mL丙酮。其次，挑选30条Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫，连同脱氯水共量取100 mL加入药液杯中。最后，将蚊虫放到温度(26±1)℃，相对湿度75%的实验室中。实验重复3次。

1.3 结果处理

24 h后观察实验结果，并且记录死亡数(以幼虫不能逃避机械刺激为死亡)。如果对照组死亡率>20%时，则实验失败。结果用SPSS软件进行数据分析，获得致死中浓度LC50值和95% 置信区间。

2 结果

不同地理株致倦库蚊幼虫对毒死蜱和克百威抗性检测结果见表1和图1。通过表1和图1可以看出，四个城市致倦库蚊对毒死蜱和克百威均产生了一定程度的抗性，对毒死蜱抗性倍数差异比较显著，和实验室株相比，由1.91到5.40倍不等；对克百威的抗性倍数差异比较小，由1.12到1.95倍不等。

表1 致倦库蚊对毒死蜱和克百威的抗性水平Tab.1 Levels of chlorpyrifos and carbofuran resistance in Cx. pipiens quinquefasciatus

1SL：实验室; GZ：广东湛江; GL：广东雷州; HH：海南海口; HL：海南陵水。

1SL：Lab; GZ：Zhanjiang, Guangdong; GL：Leizhou, Guangdong; HH：Haikou; Hainan; HL：Lingshui; Hainan.

图1 不同地区致倦库蚊对毒死蜱和克百威的抗性水平对比Fig.1 Resistance spectrum of Cx. pipiens quinquefasciatus to chlorpyrifos and carbofuran insecticides in four cities

3 讨论

本次抗性调查发现，广东省和海南省不同城市致倦库蚊对常用杀虫剂毒死蜱和克百威均产生了一定程度的抗性。其中，对毒死蜱抗性最高，达到5.40倍。对克百威抗性只有1到2倍之间。蚊虫对杀虫剂产生抗性的原因主要是由于杀虫剂的选择压力而形成的。而抗性发展的速度及程度则受到诸多因素的影响，如昆虫本身的遗传特性，这些是人类难以控制的。但是一些其他因素，如杀虫剂的轮用、换用、停用、混用、镶嵌式使用、间断使用等等是可以延缓抗性发展的(任樟尧等，2003)。Zhao等(2014)研究发现广东和海南两省市致倦库蚊对有机磷类杀虫剂敌敌畏和氨基甲酸酯类杀虫剂残杀威的抗性均分别达到17倍和11倍。说明这两种杀虫剂在当地已经导致蚊虫抗性的大幅度增加。而毒死蜱是农业部推荐的用于稻飞虱防治的重要杀虫剂之一，田间抗性检测表明，灰飞虱对毒死蜱已产生了低到中等水平的抗性(张月亮等，2013)。另外，2006年起，农业部将丁硫克百威作为防治棉蚜的高毒农药替代在我国推广使用(王娜，2013)。本研究表明，致倦库蚊对这两种杀虫剂的抗性水平均属于低水平抗性。因此，在此地的病媒生物防制工作中，要充分考虑各种因素，选择适宜的杀虫剂种类、剂型和剂量及准确的使用方法。同时加强对抗性机制的探索研究，加强新型杀虫剂及剂型的开发，以延缓抗药性的进一步发展(宋丽华等，2012)。