胆胃通颗粒剂制备工艺研究

关志宇，罗晓健，黄 潇，杨 辉，杨华生，朱继孝，程虹毓

(江西中医药大学，江西南昌 330004)

现代社会人们生活节奏快，饮食不规律，胆、胃疾病患者数量不断增多。胆胃通方源自临床经验方，以醋柴胡、麸炒枳实为主要成分，配以陈皮、香附子等，可用于治疗胃炎、胆囊炎疾病，临床疗效较好。为更好的使用和推广本复方，进行新药开发，满足临床需要，本实验探讨了其制备工艺，为其进一步研究与生产提供实验依据。

1 试药与仪器

1.1 试药 醋柴胡、麸炒枳实、陈皮、香附子 (江西樟树药材公司，经江西中医学院诸小兰教授鉴定为正品药材)，柚皮苷对照品 (中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号110722-200309)，葡萄糖 (中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号110833-200904)，重蒸水 (自制)，其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器 UV-2100型紫外分光光度计 (日本日立公司)，真空干燥箱-DZF6020(上海一恒科学仪器有限公司)，RESZD旋转蒸发器 (上海青浦沪西仪器厂)，PGL-5B喷雾制粒机 (常州市震华干燥设备有限公司)，KQ 5200-DA型数控超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司)。

2 方法与结果

2.1 提取工艺研究

2.1.1 提取方法 每次按照处方量称取药材共46.5 g，按照正交试验设计因素水平表进行试验，加入水回流提取，滤过，合并提取液，定容至300 mL。

2.1.2 总黄酮的测定［1］

2.1.2.1 对照品溶液的制备 精密称取柚皮苷对照品5.0 mg，置50 mL量瓶中，甲醇定容至刻度，即得。

2.1.2.2 最大波长的选择 精密量取复方提取液适量，置于25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液在200～600 nm条件下进行扫描，结果提取液与柚皮苷对照品试液在283 nm处均有最大吸收峰，故选择为测定波长。

2.1.2.3 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL置于10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，以甲醇为空白，分别在283 nm处测定吸光度，绘制标准曲线，回归方程为:Y=0.0304 X－0.022，r2=0.9998。表明柚皮苷在5.0～30.0 μg/mL范围内线性关系良好。

2.1.2.4 供试品溶液的测定 精密量取提取液适量，置于25 mL量瓶中，加甲醇适量，混匀，定容至刻度，过滤，取续滤液在规定波长处测定。

2.1.2.5 精密度试验 取同一对照品溶液连续测定6次，测得吸光度的RSD为0.09%(n=6)。

2.1.2.6 重复性试验 取同一提取液，按“2.1.2.4”项方法处理6份，测定吸收度，RSD为1.5%(n=6)。

2.1.2.7 稳定性试验 同一供试品溶液分别于0、1、2、3、6 h测定吸光度，结果表明供试品在6 h内吸光度稳定，RSD为1.4%(n=5)。

2.1.2.8 加样回收率试验 精密吸取提取液6份，精密加柚皮苷对照品溶液0.15 mL，依法制备供试品溶液，测定吸光度。结果加样回收率RSD为2.1%(n=6)。

2.1.3 总多糖的测定［2］

2.1.3.1 溶液的配制 精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品10 mg，置于50 mL量瓶中，加重蒸水稀释至刻度，摇匀，制得0.2 m g/mL葡萄糖贮备液。精密称取蒽酮100 mg，加80%的硫酸溶液100 mL溶解，即得硫酸蒽酮溶液。

2.1.3.2 最大波长的选择 将提取液与葡萄糖对照品试液与硫酸蒽酮进行显色反应后，在400～700 nm条件下进行扫描，结果提取液与葡萄糖对照品试液在622 nm处均有最大吸收峰。故选择622 nm为测定波长。

2.1.3.3 标准曲线的绘制 分别吸取葡萄糖贮备液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL置于10 mL量瓶中，加蒸馏水补足至3.0 mL，摇匀，分别加硫酸-蒽酮试剂5.0 mL，混匀后于沸水域中加热15 min，冰域冷却，同时以相应空白试液，在622 nm处测吸光度，以吸光度为纵坐标，质量浓度为横坐标，标准曲线为 Y=1.7011 X－0.1372，r2=0.9995，表明葡萄糖在2.5～15 μg/mL范围内线性关系良好。

2.1.3.4 供试品的制备 精密量取提取液10 mL，置于烧杯中，加入乙醇适量，使乙醇体积分数为70%，静置2 h，过滤，药渣加适量水提取，并浓缩至10 mL，再重复前述操作1次，静置过夜，过滤取其沉淀并于40℃减压干燥后，用适量蒸馏水溶解，精密量取2 mL加入硫酸-蒽酮试剂，按“2.1.3.3”项下操作，测定总多糖。

2.1.3.5 精密度试验 取同一对照品溶液连续测定6次，测得吸光度的RSD为0.11%(n=6)。

2.1.3.6 重复性试验 取同一提取液，按“2.1.3.4”项方法分别显色6份，测定吸收度，RSD为1.8%(n=6)。

2.1.3.7 稳定性试验 取显色后同一供试品溶液分别于0、1、2、3、6 h测定吸光度，结果表明供试品在6 h内吸光度稳定，RSD为1.2%(n=5)。

2.1.3.8 加样回收率试验 精密吸取提取液10 mL 6份，精密加入葡萄糖贮备液0.2 mL，依法制备供试品溶液，测定吸光度。结果加样回收率RSD为2.4%(n=6)。

2.1.4 浸膏得率测定 取“2.1.1”项下提取液30 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，称定质量，计算浸膏得率。

2.1.5 正交设计 按照L9(34)正交设计表设定加水量(A)、提取时间 (B)、提取次数 (C)三因素及其各水平划分，详见表1，正交设计安排与结果见表2。

表1 胆胃通方水提因素水平

表2 正交设计安排与结果

2.1.6 信息熵权重系数计算 采用信息熵权重分析法［3-5］，按照公式:

计算确定总黄酮量 (X)、总多糖量 (Y)和浸膏得率(Z)的权重系数分别为0.444、0.359、0.197。根据各指标的权重，计算多指标综合评分，对正交试验数据进行分析。

综合评分 =0.444X/5.06+0.359Y/62.90+0.197Z/26.43

2.1.7 正交设计结果分析 对综合评分进行直观分析、极差分析和方差分析，各因素影响大小为A＞B＞C，因素A各水平间具有显著性差异，因素B、C各水平间没有显著性差异，方差分析见表3，确定最佳提取工艺为A3B3C2，即加10倍的水，提取2次，每次提取1.5 h。

表3 综合评分方差分析

2.1.8 验证试验 按照最佳提取工艺进行3批验证试验，结果3次试验综合评分结果见表4，表明该提取工艺稳定可靠。

表4 验证试验结果

2.2 喷雾制粒工艺［6-8］

2.2.1 喷雾制粒方法 经过处方优选，通过预实验确定采用蔗糖-糊精 (3∶1)为稀释剂，并作为喷雾制粒底料，设定物料温度为 (60±5)℃，将本复方提取液浓缩到一定密度后喷入，流化制粒一定时间，以合格颗粒得率 (1号筛和5号筛之间的颗粒质量)、外观和制粒时间为指标比较浸膏 (80℃)在不同工艺参数条件下的喷雾制粒效果。

2.2.2 浸膏相对密度选择 根据设备性能预设初始进风温度115℃、蠕动泵转速60 r/min，考察浸膏相对密度对制粒效果的影响，浸膏相对密度设置和实验结果见表5，确定最佳浸膏相对密度为1.15(80℃)。

表5 浸膏相对密度优选实验安排与结果

2.2.3 进风温度的选择［9］设定浸膏相对密度1.15(80℃)、蠕动泵转速60 r/min，考察进风温度对制粒效果的影响，进风温度设置和实验结果见表6，确定最佳进风温度为120℃。

表6 进风温度优选试验安排与结果

2.2.4 蠕动泵转速的选择［10］设定浸膏相对密度1.15(80℃)、进风温度120℃，考察蠕动泵转速对制粒效果的影响，蠕动泵转速设置和实验结果见表7，确定最佳蠕动泵转速为60 r/min。

表7 蠕动泵转速优选试验安排与结果

2.2.5 制粒工艺验证试验 按照浸膏相对密度1.15(80℃)、进风温度120℃，蠕动泵转速为60 r/min条件制备颗粒，进行3批验证试验，产品颗粒外观良好，制粒时间3 h，成品颗粒得率分别为 97%、96%、96%，RSD为0.58%。

3 讨论

本实验采用信息熵综合评分方法计算各因素权重系数，避免人为因素对实验结果的干扰，相比于平衡评分、比例评分［11］等方法更具客观性［5］，可较好地解决各因素所占总分比例设置改变，导致实验优化结果变化的问题。

目前，喷雾制粒方法主要应用于中药颗粒的制备，其产品外观、圆整度较好，粒径分布均匀。但影响喷雾制粒效果的因素较多［12］，且各因素间可能存在交互作用，所用设备在由实验机型向中试型、生产型设备转换时，参数设置变化较大，可能需进行多次验证试验或参数优化试验，投料量大，实验成本高。本实验采用中试型生产设备探讨制粒工艺，并以节约成本、降低能耗、提高生产效率为目的设置考察指标，从生产实际出发优化各主要影响因素的工艺参数，以满足实际生产过程对工艺参数设置的实际需要。

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