脱毒苹果苗木应用效果研究

姜中武 宋来庆 赵玲玲 刘美英 唐 岩 孙燕霞

山东省烟台市农科院果树研究分院·265500

富士苹果花脸型锈果病、花叶病等病毒病的发生呈逐年加重趋势，目前尚无化学药剂能有效预防病毒病的发生，植株感病后，只能将感病植株刨除。对良砧和良种进行脱毒，繁育推广脱毒苗木是控制病毒病发生和蔓延的唯一有效措施。本研究重点对无病毒植株与带毒植株在树体营养、果实品质、产量和经济效益等方面的差异进行了测定分析，为苹果无毒化栽培提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 供试材料 供试品种为不同树龄的带毒烟富3和脱毒烟富3。烟富3所带病毒病种类为ACLSV、ASGV和ASPV。砧木为八棱海棠，试验园株行距3 m×4 m，生长势基本一致，果园管理水平中等。

1.2 试验处理 试验于2010年6月至2012年3月在蓬莱市大辛店镇刘家沟村和烟台市农业科学研究院果树育种试验室进行。试验设2个处理，每处理重复3次，每处理5株。取树冠外围中部东、西、南、北4个不同方位的果实，进行品质指标测定。

每处理植株从不同方位树冠外围随机选取30个当年生新梢，用游标卡尺测量新梢粗度（据新梢基部5 cm处），用米尺测量新梢长度。叶绿素含量采用分光光度法测定 （赵世杰等，1998），可溶性固形物采用手持糖量计测定，果实硬度采用手持硬度计，果实可溶性糖含量采用蒽酮法测定，维生素C含量采用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定，可滴定酸含量采用0.1 M NaOH滴定法。

枝、叶中N、P、K含量测定：在树冠中部四个不同方位各取2条1年生新梢，在新梢样品中各取2～3片中部的叶片，带回实验室洗净、烘干、研磨、过60目样品筛备用，N、P、K含量的测定参照鲍士旦方法。

2 结果与分析

2.1 病毒病对富士苹果树体生长的影响 对1～4年生脱毒富士和带毒烟富3的干周、冠径等指标进行了测定（表1）。结果表明，脱毒处理对树体生长各项指标影响较大。1～4年生脱毒处理的干周分别是带毒烟富3的1.77倍、1.58倍、1.43倍和1.33倍，树高分别比对照高25.75%、22.17%、11.07%和6.07%；冠径分别是对照的1.32倍、1.17倍、1.11倍和1.05倍；同时，脱毒烟富3的成枝力明显高于对照，1～4年生脱毒烟富3的长、中、短枝数量分别是对照的1.87倍、1.85倍、1.74倍和2.03倍。表明脱毒处理能促进富士苹果的树体的生长，增加枝条数量。

2.2 病毒病对苹果叶片含水量和可溶性蛋白含量的影响 测定了8月中旬营养枝和短枝叶片含水量和可溶性蛋白含量。结果表明，脱毒烟富3营养枝和短枝的含水量均显著高于对照，分别比对照高14.5%和17.25%。不同处理之间可溶性蛋白含量也存在差异，脱毒处理的营养枝和短枝叶片的可溶性蛋白含量显著高于对照，分别比对照高9.86%和14.99%（图1）。

图1 苹果病毒病对叶片含水量和可溶性蛋白的影响

2.3 病毒病对苹果叶片叶绿素含量及光合作用的影响 从表2可以看出，脱毒烟富3苹果叶片中的叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总量显著高于带毒烟富3叶片，分别是带毒烟富3的3.42倍、3.29倍和2.65倍；而类胡萝卜素含量脱毒烟富3显著低于带毒烟富3处理，其含量仅为带毒烟富3处理的41.28%；不同处理对净光合速率和蒸腾速率的影响差异显著，脱毒烟富3的净光合速率和蒸腾速率分别比带毒的高9.73%和14.88%，差异显著；气孔导度和胞间CO2浓度两者之间也存在差异，但差异不显著。试验结果表明，脱毒处理能显著提高叶片叶绿素含量，进而影响了植株的光合性能。

2.4 病毒病对苹果枝条和叶片贮藏营养的影响 测定了10月中旬不同处理不同类型枝条和叶片的贮藏营养水平（图2）。结果表明，病毒病能影响树体的贮藏营养水平。脱毒处理后枝条和叶片的贮藏淀粉含量均显著高于对照。从可溶性糖含量来看，脱毒烟富3营养枝和短枝叶片中可溶性糖含量显著高于带毒烟富3，而短枝和营养枝枝条中的含量低于带毒烟富3。这可能与病毒病能影响光合产物的转化有关。

表2 苹果病毒病对苹果叶片光合作用的影响

图2 苹果病毒病对苹果贮藏营养的影响

2.5 病毒病对苹果枝条和叶片矿质营养的影响 对不同处理的枝条和叶片中的矿质元素含量进行了测定，结果如表3所示。脱毒烟富3的短枝、营养枝叶片和短枝叶片中的N元素含量均显著高于带毒烟富3，分别比对照高34.3%、52.1%和15.5%；脱毒烟富3营养枝、短枝、短枝叶片中P元素含量均高于带毒烟富3，其中营养枝和短枝中的含量二者差异显著；脱毒烟富3短枝中的K含量显著低于带毒烟富3，而短枝叶中的K含量显著高于带毒烟富3。营养枝和营养枝叶片中K元素含量二者差异不显著。

脱毒烟富3短枝和短枝叶片中Fe元素含量显著高于带毒烟富3，而营养枝和营养枝叶中Fe元素含量则显著低于带毒烟富3；脱毒烟富3营养枝、短枝和短枝叶片中Zn元素含量显著高于带毒烟富3，而营养枝叶中Zn元素含量二者差异不显著。以上结果表明，苹果病毒病能影响苹果对矿质营养的吸收以及矿质营养在树体各器官间的转移，脱毒处理能显著提高树体对矿质营养的吸收和利用率。

表3 苹果病毒病对苹果矿质营养的影响

2.6 病毒病对苹果果实品质的影响 2010～2012年连续3年测定了苹果病毒病对富士苹果品质相关指标的影响（图3）。结果表明，除2010年外，脱毒烟富3的果实硬度连续2年均低于带毒烟富3，二者差异不显著；2010年脱毒烟富3的果实硬度显著高于带毒烟富3，可能与样品的成熟度有关。连续3年脱毒植株的果实Vc含量均高于带毒烟富3，其中2011和2012年脱毒烟富3显著高于带毒烟富3，表明脱毒处理能显著增加果实Vc含量。除2010年外，脱毒烟富3果实可溶性糖含量连续2年高于带毒烟富3，分别比带毒烟富3高3.79%和1.41%，差异不显著。连续3年脱毒处理的果实可滴定酸含量显著低于带毒烟富3，分别比带毒烟富3低13.55%、10.9%和11.69%。与带毒烟富3相比，脱毒烟富3的糖酸比值显著高于带毒烟富3。以上结果表明，脱毒处理能降低富士果实的可滴定酸度，增加果实Vc含量，提高果实的糖酸比值，而对果实硬度、可溶性糖含量无显著影响。

图3 苹果病毒病对果实品质相关指标的影响

2.7 脱毒烟富3和带毒烟富3的产量和效益分析 对不同结果树龄的脱毒和常规植株苹果的产量进行了测定结果表明，脱毒植株的单株结果量、果实质量、单株产量和667 m2产量均显著高于同龄常规富士。4年生脱毒烟富3果园667m2产量平均700 kg，而带毒烟富3仅为352.8 kg，脱毒烟富3植株较比带毒烟富3植株增产98.4%；8年生进入盛果期的脱毒烟富3果园667 m2产量为4535.7 kg，而带毒烟富3苹果园为3513.8kg。对调查测试果园的667 m2产量，一级果、二级果、三级果以及残次果等，分别进行称量统计，脱毒烟富3果实着色好、果形端正，一、二级果实的总产量显著高于带毒烟富3果园。2012年，一级果、二级果、三级果以及残次果的销售价格分别为 5.8 元/kg、4.4 元/kg、3.4 元/kg和 0.9 元/kg，4 年生、5年生、6年生和8年生脱毒烟富3苹果园的667m2收入分别比带毒烟富3增加了1835.1元、3194元、1879.5元和5677.9元，销售收入增加显著。