中药材黄药子质量标准研究

江苏省盐城市药品检验所（224002）支荣荣 周会芹 谢斌

江苏省盐城市中医院（224001）左莹莹

附图1 黄药子块茎横切面

中药材黄药子为薯蓣科（Dioscoreaceae）植物黄独Dioscorea bulbifera L.的干燥块茎，是江苏省地方中药材，收载于《江苏省中药材标准》1989年版，历代本草均有记载，具有散结消瘿、清热解毒、凉血降火之功效[1]。黄药子中薯蓣皂苷、黄药子甲素、乙素等均具有抗肿瘤作用，尤其对治疗甲状腺肿瘤有独特的疗效[2][3]，但由于有一定的肝、肾毒性[4]，在应用上有一定的限制。其中，薯蓣皂苷是其主要成分，目前没有对其测定的报道。现行标准中只有性状、理化鉴别、水分等一般检查项目，为了完善该标准，笔者对黄药子的药材标准进行了研究。在原标准的基础上，增加了显微鉴别、浸出物测定、高效液相色谱法测定薯蓣皂苷含量。

附图2 石细胞（×400）

附图3 针晶（×400）

附图4 空白溶剂色谱图

附图5 薯蓣皂苷对照品色谱图

附图6 黄药子药材色谱图

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent高效液相色谱仪（安捷伦）；BP211D电子天平（德国Sartorius）；BT224S电子天平（德国Sartorius）；OLYMPUS BX51显微成像系统。

1.2 试药 薯蓣皂苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：111707-200501）；甲醇（江苏汉邦科技有限公司，色谱纯）；乙醇（国药控股集团有限公司）；水（二次重蒸馏水）等；其他试剂均为分析纯。黄药子样品为10批次，购自江苏各地。

2 实验方法与结果

2.1 定性鉴别 本品块茎横切片：木栓细胞数列，石细胞靠木栓层内侧，类长方形，切向延长，常连续成环；基本薄壁组织中外韧型维管束较少；黏液细胞多分布于基本薄壁组织外侧，内含针晶束，树脂细胞众多，内含棕黄色分泌物。见附图1。其中，黏液细胞及石细胞在横切面上不清楚，在图中未标出，笔者做了放大处理见附图2～3。

2.2 浸出物 分别用水、稀乙醇、70%乙醇、乙醇作为浸出溶剂，并分别以冷浸法、热浸法对浸出结果进行了比较，结果表明，以水热浸法浸出物最高。依法测定样品10批，最低测定值为19.7%，以最低测定值的80%设限，为15.8%，故暂规定本品水溶性浸出物不得少于15.0%。

2.3 薯蓣皂苷的含量测定

2.3.1 对照品溶液的制备 精密称取薯蓣皂苷对照品适量，用甲醇溶解成每1ml含97.9μg薯蓣皂苷的溶液，供线性关系考察的母液（对照品溶液-1）； 将对照品溶液-1用甲醇稀释成每1ml含9.79μg薯蓣皂苷的溶液（对照品溶液-2），作为分析进样用。

2.3.2 供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入65%乙醇50ml，称定重量，超声处理（功率120W，频率40kHz）30min，滤过，取续滤液，即得。

2.3.3 色谱条件 十八烷基键和硅胶柱CAPCELL C18柱（4.6mm×150mm，5μm）；流动相为乙腈-水（55∶45），检测波长为203nm，柱温为30℃；流速为1.0ml/ml。进样量均为10μl。在该色谱条件下，薯蓣皂苷元可达到基线分离，其他成分对测定无干扰，结果见附图4～6。

附表 回收率试验结果（n＝6）

薯蓣皂苷对照品保留时间为16.847min；供试品中薯蓣皂苷保留时间为16.160min，保留时间一致，因为药材无法制备阴性对照，故未附阴性对照色谱图。

2.3.4 线性关系考察 精密量取对照品溶液-1（97.9μg/ml）0.2ml、0.5ml、1ml、2ml、4ml分别加入到10ml的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀得对照品工作液系列。分别吸取10μl进样，测定峰面积。以峰面积Y为纵坐标，对照品的质量X（μg）为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程：Y＝4442564.114X－11252.914，R＝1.000；薯蓣皂苷在0.01958μg～0.3916μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2.3.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液（9.79μg/ml），连续进样6次，测定峰面积积分值，RSD为0.3%＜2.0%，结果表明精密度良好。

2.3.6 稳定性考察 取同一供试品溶液，分别于0，6，12，24，48h进样10μl，按上述条件测定峰面积，RSD为0.5%（n＝5）。结果表明：供试品溶液在48h内稳定。

2.3.7 重复性试验 精密称取同一样品，按供试品溶液制备方法平行制备6份，依次测定，计算得薯蓣皂苷的含量， RSD为0.6%。

2.3.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品（平均含量1.9850mg/g）0.25g，六份，分别精密吸取97.9μg/ml的对照品溶液5ml （即0.4895mg），依法制得供试品溶液。分别吸取上述溶液各10μl测定回收率，结果见附表。

2.3.9 样品测定及限度拟定 依法测定10批样品，结果含薯蓣皂苷分别为0.18%，0.16%，0.24%，0.20%，0.18%，0.21%，0.19%，0.17%，0.20%，0.22%，最低0.16%，以最低测定值80%为下限，即不得少于0.12%；最高0.24%，以最高测定值120%为上限，即不得高于0.29%；故暂规定本品干燥品计算，含薯蓣皂苷（C15H10O7）应为0.12%～0.29%。

3 讨论

3.1 由于近年来中药材及饮片质量存在一定的问题，甚至存在一些不法分子将药材或饮片提取有效成分后再进行销售，延误了患者病情，甚至造成严重后果，针对这种现状，笔者增加了浸出物的检查，在浸出物检查方法选择过程中，考虑了两方面因素：环保经济的原则；主要成分的极性，因为黄药子中主要成分为薯蓣皂苷，易溶解于水。因此，笔者选择以水为溶剂，实验表明方法简便且切实可行。

3.2 在含量测定中方法，笔者比较了55%乙醇、65%乙醇、75%乙醇三种浓度提取方法，结果表明65%乙醇含量最高，同时比较了超声20min、30min、40min的测定结果，表明30min与40min含量测定值一致，20min略低，因此选择超声30min。此外，在限度的制定上，笔者考虑了近期有关报道，黄药子中薯蓣皂苷、黄药子甲素、乙素、丙素以及鞣质等均能够引起急性中毒。因此，制定了上限已确保用药安全。