3种大孔吸附树脂对黄芩苷的静态饱和吸附量和脱附率

雷燕妮+张小斌

摘要：以黄芩苷含量为考察指标，用高效液相色谱法测定其含量，通过黄芩上柱液的澄清处理方法，比较3种大孔吸附树脂对黄芩苷的吸附量和脱附率。结果表明，3种树脂对黄芩苷的吸附能力大小为AB-8树脂>LSA-40树脂>D101树脂；选用50%乙醇溶液作为洗脱剂效果最好；AB-8树脂纯化黄芩苷效果最好，黄芩苷纯度约90%。

关键词：黄芩苷；大孔树脂；静态饱和吸附量；脱附率；纯分化离工艺

中图分类号：R284.2 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0279-02

黄芩别名土金茶根、山茶根，为唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根^[1-2]，其有效成分为黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩素、汉黄芩苷、β-谷甾醇等^[3]。黄芩苷、黄芩素产品不但可被应用于天然植物药领域，还被应用于人体及动物病防治，恶性疾病防治以及化妆品等众多领域，应用领域非常广泛，市场前景广阔，已成为国内外研究热点。但有关大孔树脂对黄芩苷提取工艺的研究不多^[4]。大孔树脂是一种有机高分子聚合物，不溶于酸、碱及各种有机溶剂，具有较大的孔径与比表面积，内部具有三维空间立体孔结构。大孔树脂具有物理化学稳定性高、选择性好、比表面积大、吸附容量大、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、易构成闭路循环、使用周期长、节省费用等诸多优点，在天然产物的提取分离工作中得到广泛应用^[5-9]。本研究筛选黄芩苷富集与纯化的最佳大孔树脂，以期为进一步研究黄芩苷的纯化分离工艺提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试黄芩采自陕西省柞水县，经西北大学生命科学学院植物教研室鉴定；黄芩苷对照品（批号：0751-9909），由中国药品生物制品检定所提供；大孔树脂AB-8、D101、LSA-40，由西安蓝晓科技开发有限公司提供；盐酸、氢氧化钠、乙醇、硫酸铝钾等均为国产分析纯。

1.2 仪器

日本岛津LC-20A型高效液相色谱系统，包括检测器SPD-20A、高压恒流泵LC-20A、工作站LC Solution；FZ102植物粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；H·H·S21-6C型电热恒温水浴锅，上海医疗器械五厂；ME235S-型电子分析天平，德国赛多利斯；RE-52AA型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；SHB-C型循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；101A-2型鼓风干燥箱，上海市实验仪器总厂；DE-10型蒸馏水器，上海悦丰仪器仪表有限公司；Milli-Q型超纯水制备仪，美国Bedford公司；标准药筛 1-9号，上虞市大亨桥化验仪器厂；THZ-C型摇床，江苏太仓市华美生化仪器厂。

1.3 方法

1.3.1 黄芩上柱液的制备

称取20目黄芩粗粉100 g，用 15倍质量的75%乙醇溶液于85 ℃热回流提取2次，每次 1.5 h，用4层纱布进行粗滤，再进行细滤，滤液用旋转蒸发器进行浓缩至无醇味，加入蒸馏水稀释，过滤除去不溶物得上柱清液。用该上柱清液上柱分离多次，发现树脂吸附效果不佳，其主要原因是该上柱清液中仍含大量果胶类等杂质，严重影响树脂对黄芩苷的吸附能力，因此设计如下上柱清液澄清处理试验。

分别称取5 g黄芩粉末3份，各加入pH值11的水溶液 50 mL，于85 ℃热回流提取2 h。对其中1份样品加入原料质量1%的硫酸铝钾搅拌均匀，保温静置0.5 h后过滤，滤液用水定容至100 mL（A1处理）；对另1份样品过滤后加入滤液等量的95%乙醇溶液进行醇沉，2～3 h后过滤，滤液浓缩至无醇味后用水定容至100 mL（A2处理）；对最后1份样品过滤后直接用水定容至100 mL（A3处理）。

分别称取5 g黄芩粉末3份，各加入10倍质量的75%乙醇溶液于85 ℃热回流提取2 h。对其中1份样品加入原料质量1%的硫酸铝钾搅拌均匀，保温静置0.5 h后过滤，滤液用水定容至100 mL（B1处理）；对另1份样品过滤后浓缩至无醇味，加入滤液等质量的95%乙醇溶液进行醇沉，2～3 h后过滤，滤液浓缩至无醇味后用水定容至100 mL（B2处理）；对最后1份样品过滤后直接用水定容至100 mL（B3处理）。

吸取5 mL提取液，用水定容至50 mL后进行黄芩苷含量测定，并进行澄清度对比分析以及树脂分离试验，确定最佳澄清处理方法。

1.3.2 大孔吸附树脂的预处理

一般来说，极性小的有机化合物适于在非极性树脂上分离，极性较大的有机化合物适于在中极性、极性的树脂上分离。具有酚羟基和糖苷链的黄酮类化合物具有一定的极性、亲水性和较强的氢键生成能力，易被弱极性和极性树脂吸附。黄芩苷是一类有葡萄糖醛酸结构的黄酮类化合物，具有一定的亲水性和亲脂溶性，适于D101、AB-8、LSA-40等弱极性或中极性树脂的吸附。表1是大孔吸附树脂的物理性能。

的纯化试验，结果表明：AB-8树脂吸附量大，解吸率高，最佳解吸乙醇浓度为50%，因此AB-8树脂是一种纯化黄芩苷性能良好的树脂，且该树脂可以再生利用，成本较低，生产周期较短，适宜大规模生产，值得推广应用。

在纯化黄芩苷的生产工艺中，为了充分利用大孔树脂，除选择性能优良的大孔树脂外，还要配合最佳的工艺条件，考虑原液浓度对吸附的影响、上样量对吸附的影响、流速对吸附的影响等，这方面工作还有待进一步完善，以促进大孔树脂在中药制药工业中的应用。

参考文献：

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志：六十五卷第二分册[M]. 北京：科学出版社，1977：136-219.

[2]中国科学院西北植物研究所.秦岭植物志：第一卷第四册[M]. 北京：科学出版社，1983.

[3]高学敏.中药学[M]. 北京：中国中医药出版社，2002：406-407.

[4]刘瑞源，钟 平，戴开金. 大孔吸附树脂提取中草药有效成分的研究进展[J]. 时珍国医国药，2004，15（6）：封3-封4.

[5]周德庆，曾 骆. 黄芩总黄酮的提取工艺研究[J]. 华西药学杂志，2003，18（1）：78-79.

[6]贝伟剑，彭文烈，罗 杰. 柿叶黄酮的大孔吸附树脂分离提纯富集[J]. 中成药，2005，27（3）：257-261.

[7]向海艳，周春山，雷启福，等. 大孔吸附树脂法分离纯化虎杖白藜芦醇苷的研究[J]. 中国药学杂志，2005，40（2）：96-98.

[8]尹蓉莉，江 靖，张淑儒，等. 大孔吸附树脂纯化白芍总苷的工艺研究[J]. 时珍国医国药，2005，16（7）：610-612.

[9]刘友平，鄢 丹，秦春梅. 大孔吸附树脂纯化中药有效成分的影响因素[J]. 中药新药与临床药理，2003，14（3）：212-214.endprint

摘要：以黄芩苷含量为考察指标，用高效液相色谱法测定其含量，通过黄芩上柱液的澄清处理方法，比较3种大孔吸附树脂对黄芩苷的吸附量和脱附率。结果表明，3种树脂对黄芩苷的吸附能力大小为AB-8树脂>LSA-40树脂>D101树脂；选用50%乙醇溶液作为洗脱剂效果最好；AB-8树脂纯化黄芩苷效果最好，黄芩苷纯度约90%。

关键词：黄芩苷；大孔树脂；静态饱和吸附量；脱附率；纯分化离工艺

中图分类号：R284.2 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0279-02

黄芩别名土金茶根、山茶根，为唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根^[1-2]，其有效成分为黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩素、汉黄芩苷、β-谷甾醇等^[3]。黄芩苷、黄芩素产品不但可被应用于天然植物药领域，还被应用于人体及动物病防治，恶性疾病防治以及化妆品等众多领域，应用领域非常广泛，市场前景广阔，已成为国内外研究热点。但有关大孔树脂对黄芩苷提取工艺的研究不多^[4]。大孔树脂是一种有机高分子聚合物，不溶于酸、碱及各种有机溶剂，具有较大的孔径与比表面积，内部具有三维空间立体孔结构。大孔树脂具有物理化学稳定性高、选择性好、比表面积大、吸附容量大、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、易构成闭路循环、使用周期长、节省费用等诸多优点，在天然产物的提取分离工作中得到广泛应用^[5-9]。本研究筛选黄芩苷富集与纯化的最佳大孔树脂，以期为进一步研究黄芩苷的纯化分离工艺提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试黄芩采自陕西省柞水县，经西北大学生命科学学院植物教研室鉴定；黄芩苷对照品（批号：0751-9909），由中国药品生物制品检定所提供；大孔树脂AB-8、D101、LSA-40，由西安蓝晓科技开发有限公司提供；盐酸、氢氧化钠、乙醇、硫酸铝钾等均为国产分析纯。

1.2 仪器

日本岛津LC-20A型高效液相色谱系统，包括检测器SPD-20A、高压恒流泵LC-20A、工作站LC Solution；FZ102植物粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；H·H·S21-6C型电热恒温水浴锅，上海医疗器械五厂；ME235S-型电子分析天平，德国赛多利斯；RE-52AA型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；SHB-C型循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；101A-2型鼓风干燥箱，上海市实验仪器总厂；DE-10型蒸馏水器，上海悦丰仪器仪表有限公司；Milli-Q型超纯水制备仪，美国Bedford公司；标准药筛 1-9号，上虞市大亨桥化验仪器厂；THZ-C型摇床，江苏太仓市华美生化仪器厂。

1.3 方法

1.3.1 黄芩上柱液的制备

称取20目黄芩粗粉100 g，用 15倍质量的75%乙醇溶液于85 ℃热回流提取2次，每次 1.5 h，用4层纱布进行粗滤，再进行细滤，滤液用旋转蒸发器进行浓缩至无醇味，加入蒸馏水稀释，过滤除去不溶物得上柱清液。用该上柱清液上柱分离多次，发现树脂吸附效果不佳，其主要原因是该上柱清液中仍含大量果胶类等杂质，严重影响树脂对黄芩苷的吸附能力，因此设计如下上柱清液澄清处理试验。

分别称取5 g黄芩粉末3份，各加入pH值11的水溶液 50 mL，于85 ℃热回流提取2 h。对其中1份样品加入原料质量1%的硫酸铝钾搅拌均匀，保温静置0.5 h后过滤，滤液用水定容至100 mL（A1处理）；对另1份样品过滤后加入滤液等量的95%乙醇溶液进行醇沉，2～3 h后过滤，滤液浓缩至无醇味后用水定容至100 mL（A2处理）；对最后1份样品过滤后直接用水定容至100 mL（A3处理）。

分别称取5 g黄芩粉末3份，各加入10倍质量的75%乙醇溶液于85 ℃热回流提取2 h。对其中1份样品加入原料质量1%的硫酸铝钾搅拌均匀，保温静置0.5 h后过滤，滤液用水定容至100 mL（B1处理）；对另1份样品过滤后浓缩至无醇味，加入滤液等质量的95%乙醇溶液进行醇沉，2～3 h后过滤，滤液浓缩至无醇味后用水定容至100 mL（B2处理）；对最后1份样品过滤后直接用水定容至100 mL（B3处理）。

吸取5 mL提取液，用水定容至50 mL后进行黄芩苷含量测定，并进行澄清度对比分析以及树脂分离试验，确定最佳澄清处理方法。

1.3.2 大孔吸附树脂的预处理

一般来说，极性小的有机化合物适于在非极性树脂上分离，极性较大的有机化合物适于在中极性、极性的树脂上分离。具有酚羟基和糖苷链的黄酮类化合物具有一定的极性、亲水性和较强的氢键生成能力，易被弱极性和极性树脂吸附。黄芩苷是一类有葡萄糖醛酸结构的黄酮类化合物，具有一定的亲水性和亲脂溶性，适于D101、AB-8、LSA-40等弱极性或中极性树脂的吸附。表1是大孔吸附树脂的物理性能。

的纯化试验，结果表明：AB-8树脂吸附量大，解吸率高，最佳解吸乙醇浓度为50%，因此AB-8树脂是一种纯化黄芩苷性能良好的树脂，且该树脂可以再生利用，成本较低，生产周期较短，适宜大规模生产，值得推广应用。

在纯化黄芩苷的生产工艺中，为了充分利用大孔树脂，除选择性能优良的大孔树脂外，还要配合最佳的工艺条件，考虑原液浓度对吸附的影响、上样量对吸附的影响、流速对吸附的影响等，这方面工作还有待进一步完善，以促进大孔树脂在中药制药工业中的应用。

参考文献：

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志：六十五卷第二分册[M]. 北京：科学出版社，1977：136-219.

[2]中国科学院西北植物研究所.秦岭植物志：第一卷第四册[M]. 北京：科学出版社，1983.

[3]高学敏.中药学[M]. 北京：中国中医药出版社，2002：406-407.

[4]刘瑞源，钟 平，戴开金. 大孔吸附树脂提取中草药有效成分的研究进展[J]. 时珍国医国药，2004，15（6）：封3-封4.

[5]周德庆，曾 骆. 黄芩总黄酮的提取工艺研究[J]. 华西药学杂志，2003，18（1）：78-79.

[6]贝伟剑，彭文烈，罗 杰. 柿叶黄酮的大孔吸附树脂分离提纯富集[J]. 中成药，2005，27（3）：257-261.

[7]向海艳，周春山，雷启福，等. 大孔吸附树脂法分离纯化虎杖白藜芦醇苷的研究[J]. 中国药学杂志，2005，40（2）：96-98.

[8]尹蓉莉，江 靖，张淑儒，等. 大孔吸附树脂纯化白芍总苷的工艺研究[J]. 时珍国医国药，2005，16（7）：610-612.

[9]刘友平，鄢 丹，秦春梅. 大孔吸附树脂纯化中药有效成分的影响因素[J]. 中药新药与临床药理，2003，14（3）：212-214.endprint

摘要：以黄芩苷含量为考察指标，用高效液相色谱法测定其含量，通过黄芩上柱液的澄清处理方法，比较3种大孔吸附树脂对黄芩苷的吸附量和脱附率。结果表明，3种树脂对黄芩苷的吸附能力大小为AB-8树脂>LSA-40树脂>D101树脂；选用50%乙醇溶液作为洗脱剂效果最好；AB-8树脂纯化黄芩苷效果最好，黄芩苷纯度约90%。

关键词：黄芩苷；大孔树脂；静态饱和吸附量；脱附率；纯分化离工艺

中图分类号：R284.2 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0279-02

黄芩别名土金茶根、山茶根，为唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根^[1-2]，其有效成分为黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩素、汉黄芩苷、β-谷甾醇等^[3]。黄芩苷、黄芩素产品不但可被应用于天然植物药领域，还被应用于人体及动物病防治，恶性疾病防治以及化妆品等众多领域，应用领域非常广泛，市场前景广阔，已成为国内外研究热点。但有关大孔树脂对黄芩苷提取工艺的研究不多^[4]。大孔树脂是一种有机高分子聚合物，不溶于酸、碱及各种有机溶剂，具有较大的孔径与比表面积，内部具有三维空间立体孔结构。大孔树脂具有物理化学稳定性高、选择性好、比表面积大、吸附容量大、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、易构成闭路循环、使用周期长、节省费用等诸多优点，在天然产物的提取分离工作中得到广泛应用^[5-9]。本研究筛选黄芩苷富集与纯化的最佳大孔树脂，以期为进一步研究黄芩苷的纯化分离工艺提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试黄芩采自陕西省柞水县，经西北大学生命科学学院植物教研室鉴定；黄芩苷对照品（批号：0751-9909），由中国药品生物制品检定所提供；大孔树脂AB-8、D101、LSA-40，由西安蓝晓科技开发有限公司提供；盐酸、氢氧化钠、乙醇、硫酸铝钾等均为国产分析纯。

1.2 仪器

日本岛津LC-20A型高效液相色谱系统，包括检测器SPD-20A、高压恒流泵LC-20A、工作站LC Solution；FZ102植物粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；H·H·S21-6C型电热恒温水浴锅，上海医疗器械五厂；ME235S-型电子分析天平，德国赛多利斯；RE-52AA型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；SHB-C型循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；101A-2型鼓风干燥箱，上海市实验仪器总厂；DE-10型蒸馏水器，上海悦丰仪器仪表有限公司；Milli-Q型超纯水制备仪，美国Bedford公司；标准药筛 1-9号，上虞市大亨桥化验仪器厂；THZ-C型摇床，江苏太仓市华美生化仪器厂。

1.3 方法

1.3.1 黄芩上柱液的制备

称取20目黄芩粗粉100 g，用 15倍质量的75%乙醇溶液于85 ℃热回流提取2次，每次 1.5 h，用4层纱布进行粗滤，再进行细滤，滤液用旋转蒸发器进行浓缩至无醇味，加入蒸馏水稀释，过滤除去不溶物得上柱清液。用该上柱清液上柱分离多次，发现树脂吸附效果不佳，其主要原因是该上柱清液中仍含大量果胶类等杂质，严重影响树脂对黄芩苷的吸附能力，因此设计如下上柱清液澄清处理试验。

分别称取5 g黄芩粉末3份，各加入pH值11的水溶液 50 mL，于85 ℃热回流提取2 h。对其中1份样品加入原料质量1%的硫酸铝钾搅拌均匀，保温静置0.5 h后过滤，滤液用水定容至100 mL（A1处理）；对另1份样品过滤后加入滤液等量的95%乙醇溶液进行醇沉，2～3 h后过滤，滤液浓缩至无醇味后用水定容至100 mL（A2处理）；对最后1份样品过滤后直接用水定容至100 mL（A3处理）。

分别称取5 g黄芩粉末3份，各加入10倍质量的75%乙醇溶液于85 ℃热回流提取2 h。对其中1份样品加入原料质量1%的硫酸铝钾搅拌均匀，保温静置0.5 h后过滤，滤液用水定容至100 mL（B1处理）；对另1份样品过滤后浓缩至无醇味，加入滤液等质量的95%乙醇溶液进行醇沉，2～3 h后过滤，滤液浓缩至无醇味后用水定容至100 mL（B2处理）；对最后1份样品过滤后直接用水定容至100 mL（B3处理）。

吸取5 mL提取液，用水定容至50 mL后进行黄芩苷含量测定，并进行澄清度对比分析以及树脂分离试验，确定最佳澄清处理方法。

1.3.2 大孔吸附树脂的预处理

一般来说，极性小的有机化合物适于在非极性树脂上分离，极性较大的有机化合物适于在中极性、极性的树脂上分离。具有酚羟基和糖苷链的黄酮类化合物具有一定的极性、亲水性和较强的氢键生成能力，易被弱极性和极性树脂吸附。黄芩苷是一类有葡萄糖醛酸结构的黄酮类化合物，具有一定的亲水性和亲脂溶性，适于D101、AB-8、LSA-40等弱极性或中极性树脂的吸附。表1是大孔吸附树脂的物理性能。

的纯化试验，结果表明：AB-8树脂吸附量大，解吸率高，最佳解吸乙醇浓度为50%，因此AB-8树脂是一种纯化黄芩苷性能良好的树脂，且该树脂可以再生利用，成本较低，生产周期较短，适宜大规模生产，值得推广应用。

在纯化黄芩苷的生产工艺中，为了充分利用大孔树脂，除选择性能优良的大孔树脂外，还要配合最佳的工艺条件，考虑原液浓度对吸附的影响、上样量对吸附的影响、流速对吸附的影响等，这方面工作还有待进一步完善，以促进大孔树脂在中药制药工业中的应用。

参考文献：

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志：六十五卷第二分册[M]. 北京：科学出版社，1977：136-219.

[2]中国科学院西北植物研究所.秦岭植物志：第一卷第四册[M]. 北京：科学出版社，1983.

[3]高学敏.中药学[M]. 北京：中国中医药出版社，2002：406-407.

[4]刘瑞源，钟 平，戴开金. 大孔吸附树脂提取中草药有效成分的研究进展[J]. 时珍国医国药，2004，15（6）：封3-封4.

[5]周德庆，曾 骆. 黄芩总黄酮的提取工艺研究[J]. 华西药学杂志，2003，18（1）：78-79.

[6]贝伟剑，彭文烈，罗 杰. 柿叶黄酮的大孔吸附树脂分离提纯富集[J]. 中成药，2005，27（3）：257-261.

[7]向海艳，周春山，雷启福，等. 大孔吸附树脂法分离纯化虎杖白藜芦醇苷的研究[J]. 中国药学杂志，2005，40（2）：96-98.

[8]尹蓉莉，江 靖，张淑儒，等. 大孔吸附树脂纯化白芍总苷的工艺研究[J]. 时珍国医国药，2005，16（7）：610-612.

[9]刘友平，鄢 丹，秦春梅. 大孔吸附树脂纯化中药有效成分的影响因素[J]. 中药新药与临床药理，2003，14（3）：212-214.endprint