EGF 61A/G基因多态性与结肠癌易感性的Meta分析

叶春翠，谭诗云，王 军，李 明，孙 朋

武汉大学人民医院消化内科，湖北 武汉 430060

结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一，其发病率仅次于胃癌和食管癌[1]。虽然目前其发病机制仍不明确，有流行病学研究显示结肠癌的发生、发展与基因背景和环境因素的相互作用密切相关[2]。表皮细胞生长因子(EGF)是一种内分泌生长因子，其通过与特异性受体表面生长因子(EGFR)结合，在调节细胞增殖、分化及血管生成中发挥重要作用。EGF基因位于人4号染色体上，包含24个外显子和23个内含子[3]。其中位于5'非编码区的G61A位点功能多态性与结肠癌风险的相关性已被大量研究，然而结论不尽相同。本研究收集有关EGF 61A/G基因多态性与结肠癌风险的病例－对照研究进行荟萃分析，综合评价EGF 61A/G基因多态性与结肠癌风险之间的关系。

1 资料与方法

1.1 文献检索 计算机检索 Pubmed、EMABSE、CJFD、CBM、CNKI、VIP 及 WanFang Data，检索时间均为建库至2013年2月28日，研究对象限人类，语言限中、英文。英文检索以“epidermal growth factor or EGF”、“polymorphism or SNP or variant”和“colorectal/colon/rectal carcinoma/cancer”为检索词，中文检索以“表皮细胞生长因子或EGF”、“基因多态性”和“结肠癌”为检索词。同时辅以文献追溯。

1.2 纳入标准与排除标准

1.2.1 纳入标准:① 关于EGF 61A/G基因多态性与结肠癌易感性关系的研究;② 病例－对照研究;③ 文献中数据完整，或者能直接或间接提供统计指标OR及95%CI。

1.2.2 排除标准:① 单纯病例研究、病例报道、综述、述评等文献;②重复发表且信息不全的文献;③ 以结肠腺瘤等癌前病变作为对照组的研究。

1.3 资料提取 由2位研究者独立进行文献筛选和资料提取，意见不一致时通过讨论解决或由第3位研究者协助解决。资料提取内容包括:作者、发表年份、国家、肿瘤组和对照组总数及各基因型分布、对照组H-W平衡(P＜0.05认为不符合H-W平衡)。

1.4 统计学分析 所有分析采用Cochrane协作网的RevMan 5.1和Stata 12.0软件进行。合并效应量选用OR及95%CI。对纳入研究进行异质性检验(采用Q检验和I2统计量)[4]，如 P ＞0.1或 I2＜50%提示各研究间无异质性，采用固定效应模型进行合并分析[5]，反之则采用随机效应模型[6]。敏感性分析为依次排除单个文献后重新进行Meta分析，估计综合效应大小。发表偏倚通过 Begg 秩相关法[7]、Egger回归法[8]进行量化检测(P＜0.05认为存在发表偏倚)。利用在线软件(http://ihg.gsf.de/cgi-bin/hw/hwa1.pl)进行 Hardy-Weinberg(H-W)遗传平衡的计算，检验水准为0.05。

2 结果

2.1 文献检索结果 通过检索共找到相关文献126篇，中文67篇，英文59篇。经阅读文题和摘要，排除119 篇，初纳入 7 篇[9-15]，其中 1 篇[14]无可提取数据，1篇[15]重复发表。因此，本研究最终共纳入文献5篇[9-13]，包括839例患者和844例对照者。5篇文献中3篇为英文文献，2篇为中文文献。纳入的5篇研究对照组的基因型分布均符合H-W遗传平衡定律(见表1)。

表1 纳入文献的基本特征Tab1 Characteristics of studies included in the Meta-analysis

2.2 Meta分析结果 在GG vs AG+AA遗传模型中，各研究间异质性检验差异有统计学意义(P=0.01，I2=69%)，故采用随机效应模型;结果显示，EGF基因61A/G多态性与结肠癌风险的相关性有统计学意义(OR=1.67，95%CI:1.10 ～ 2.53)(见图1b);而在其他3种遗传模型中，各研究间异质性检验差异均无统计学意义(GG+AG vs AA:P=0.73，I2=0;AG vs AA:P=0.89，I2=0;GG vs AA:P=0.23，I2=29%)，故采用固定效应模型。结果显示，EGF基因61A/G多态性与结肠癌风险的相关性有统计学意义(GG+AG vs AA:OR=1.43，95%CI:1.10 ～1.84;GG vs AA:OR=2.17，95%CI:1.54 ～3.06，见图 1a、1d);但在AG vs AA遗传模型中EGF基因61A/G多态性与结肠癌风险的相关性无统计学意义(OR=1.16，95%CI:0.89 ～1.53，见图1c)。

2.3 敏感性分析 依次单独剔除1篇文献后，各遗传模型合并效应量无明显改变。但在GG vs AG+AA遗传模型中，当剔除Wu等[11]后，研究间异质性消失。

2.4 发表偏倚分析 Begg漏斗图结果显示未见发表偏倚(见图2)。Egger回归法、Begg秩相关法量化检测也未见发表偏倚，Egger回归法分析结果显示:AG+GG vs AA:P=0.854;GG vs AG+AA:P=0.080;AG vs AA:P=0.352;GG vs AA:P=0.544。Begg 秩相关法分析结果显示:AG+GG vs AA:P=1.000;GG vs AG+AA:P=0.327;AG vs AA:P=0.142;GG vs AA:P=0.327。

3 讨论

Shahbazi等[16]首先提出 EGF 61A/G基因多态性与皮肤黑色素瘤相关，随后EGF 61A/G基因多态性与肿瘤(如结肠癌)易感性之间的研究被大量报道，然而结论不一。本文共纳入5篇病例－对照研究，其中3篇为国内研究，2篇为国外研究。有2篇文献[10-11]认为EGF 61A/G基因多态性与结肠癌易感性相关，携带GG或G等位基因的人群罹患结肠癌的风险增加;而另外3篇文献[9，12-13]报道EGF 61A/G基因多态性与结肠癌易感性无明显相关性。合并结果显示，3个遗传模型(GG+AG vs AA;GG vs AG+AA;GG vs AA)中EGF基因61A/G多态性与结肠癌风险有明显相关性，携带基因型GG和AG+GG可增加罹患结肠癌的风险。而在AG vs AA遗传模型中，两者之间无明显相关性。

在GG vs AG+AA遗传模型中，经异质性检验发现存在异质性，我们通过敏感性分析寻找异质性，结果发现，当剔除Wu等[11]文献后，研究间异质性消失，提示该文献可能为引起异质性的原因。采用Begg漏斗图和Egger检验分别定性和定量评估发表偏倚，发现均无显著的发表偏倚，说明结论较可靠。

本文存在一定的局限性:纳入的文献较少，且大多数为亚洲人群;纳入的文献均为正式发表的文献，仍有发表偏倚的可能;未考虑性别、饮食及其他基因因素的影响。

综上所述，基于目前研究结果认为，EGF 61A/G基因多态性与结肠癌易感性有明显相关性，携带GG或AG+GG基因型可增加罹患结肠癌风险。以上结论尚需更多设计严谨、样本量大的高质量研究加以证实。

图2 Begg漏斗图分析 a:AG+GG vs AA;b:GG vs AG+AA;c:AG vs AA;d:GG vs AAFig2 Begg’s funnel plot for publication biasa:AG+GG vs AA;b:GG vs AG+AA;c:AG vs AA;d:GG vs AA

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