男性不育患者精浆弹性硬蛋白酶与精子密度及动力的关系研究＊

邴晏如，莫和国，黄健云，欧水连，黎泳仪，蔡锦梅，陆小琴（南方医科大学附属小榄医院检验科，广东中山 528415）

随着社会的发展，不育症的发病率呈明显上升趋势，育龄夫妇不育症的发病率己从20世纪60年代的7%～8%上升到近年来的15%～20%［1］。不育原因中20%是单独由男性因素引起，其余还有30%～40%与男性因素有关［2－3］。因此，有关精子质量与男性不育原因的研究越来越引起临床的重视。在影响男性生育功能的众多因素中。有研究认为男性生殖道感染是导致男性不育的主要原因之一［4－5］。本文研究男性不育患者精浆弹性硬蛋白酶与精子密度及动力的关系，为进一步探讨精浆弹性硬蛋白酶对于男性生育力的评估价值，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年5月至2013年11月在本院男科门诊就诊的不育男性患者230例，且精液检查至少有1项参数结果异常，年龄23～50岁，平均32.5岁，分别根据年龄段（21～25、＞25～30、＞30～35、＞35～40、＞40～50岁）和精浆弹性硬蛋白酶浓度（大于1 000 ng／mL、290～1 000 ng／mL、小于290ng／mL）进行检测。纳入标准：同居1年及以上；性生活正常，无其他系统疾病；未采用任何避孕措施；女方各项检查均正常。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集与保存 检查前禁欲3～7d，手淫法取精液于干燥无菌广口杯内，37℃液化，液化后进行精液常规检测。精浆弹性硬蛋白酶浓度测定：新鲜标本液化后立即取部分标本3 000 r／min离心10min，留取精浆测精浆弹性硬蛋白酶浓度。标本离心后，用Eppendorf管分装数支后，－20℃保存。

1.2.2 主要仪器试剂及检测方法 精液常规采用北京伟力WLJY－9000型彩色精子分析仪检测；精浆弹性硬蛋白酶采用酶联免疫吸附试验测定，定量试剂盒均购自深圳华康公司；全自动酶标仪为美国Bio－Tek ELx800。

1.2.3 精液常规指标和精浆弹性硬蛋白酶的正常参考值 精液常规按《世界卫生组织人类精液及精子－宫颈粘液相互作用实验室检测手册》（第4版）进行分析，精液量大于或等于1.5 mL，pH≥7.2，精子活动率大于或等于40%，精子前向运动百分比大于或等于32%，精子密度大于或等于15×106／mL，总精子数大于或等于39×106。精浆弹性硬蛋白酶正常参考值为小于290ng／mL。

1.2.4 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行分析处理，计量资料以表示，组间比较采用方差分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同年龄段患者精浆弹性硬蛋白酶浓度、精子密度和精子动力检测结果 各年龄段患者的精浆弹性硬蛋白酶浓度、精子密度和精子活动率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 不同年龄段患者精浆弹性硬蛋白酶与精子密度和精子活力检测结果（）

表1 不同年龄段患者精浆弹性硬蛋白酶与精子密度和精子活力检测结果（）

年龄（岁） n 弹性硬蛋白酶（ng／mL）精子密度（106／mL）精子活动率（%）21～25 40 1594 .3±658.6 57 .44±20.34 56 .50±21.19＞25～30 52 1653 .2±715.6 61 .36±23.36 61 .35±25.39＞30～35 49 1640 .7±710.6 57 .88±22.67 58 .45±24.35＞35～40 48 1704 .7±753.2 58 .35±23.18 56 .59±23.49＞40～50 41 1604 .4±698.5 57 .58±22.56 55 .23±22.59

2.2 患者精浆水平弹性蛋白酶与精子密度关系分析 在不同精浆弹性硬蛋白酶浓度的患者中，前向运动精子密度、非前向运动精子密度和不动精子密度比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），且前向运动精子密度均值均大于30.0×106／mL。见表2。

2.3 患者精浆弹性硬蛋白酶浓度与精子动力关系分析 在不同精浆弹性硬蛋白酶浓度的患者中，前向运动精子百分比、非前向运动精子百分比、精子曲线速度和直线速度比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），且前向运动精子百分比均值均大于42.0%。见表3。

表2 患者精浆弹性硬蛋白酶与精子密度的关系分析（，×106／mL）

表2 患者精浆弹性硬蛋白酶与精子密度的关系分析（，×106／mL）

（ng／mL） n 前向运动精子密度弹性硬蛋白酶不动1 000 102 33 .15±12.35 13 .42±5.12 24 .46±8.92 290～1 000 78 30 .51±11.26 12 .18±4.56 22 .29±8.69＜精子密度＞非前向运动精子密度290 50 31 .26±12.06 14 .21±5.13 24 .23±9.05

表3 患者精浆弹性硬蛋白酶与精子动力的关系分析（）

表3 患者精浆弹性硬蛋白酶与精子动力的关系分析（）

（ng／mL） n 前向运动精子（%）弹性硬蛋白酶 非前向运动精子（%）曲线速度（μm／s）直线速度（μm／s）＞1 000 102 43 .8±15.3 15 .24±5.2 43 .6±9.2 28 .3±9.2 290～1 000 78 42 .64±14.9 13 .91±4.8 42 .5±8.9 26 .9±8.1＜290 50 42 .69±14.7 15 .86±4.9 42 .8±8.8 27 .8±7.9

3 讨 论

男性不育症是许多疾病或多种因素造成，而不是一种独立的疾病。对于男性不育的病因并不十分明确。对于精浆弹性硬蛋白酶是否与精液中各项指标具有相关性存在广泛争议。王贺等［6］通过对患者精浆弹性硬蛋白酶的检测发现，精浆弹性硬蛋白酶浓度升高可导致精子活率和活力降低，但不影响精子密度。Moretti等［7］通过对患者精浆弹性硬蛋白酶的检测发现，精浆弹性硬蛋白酶浓度大于1 000 ng／mL组与精浆弹性硬蛋白酶浓度小于290ng／mL组在精子密度、活率、活力及头部畸形等方面存在明显差异。与之相反，Eggert－Kruse等［8］研究发现，不育患者血清及精浆弹性硬蛋白酶浓度与精液各项指标及精子功能各项指标均无相关性。Henkel等［9］也得到同样结论。本实验室通过对生殖科门诊就诊不孕男性患者精浆弹性硬蛋白酶检测发现，不同精浆弹性硬蛋白酶含量患者在精子密度、活率和运动速度方面差异均无统计学意义（P＞0.05），与Eggert－Kruse等［9］和 Henkel等［10］的结论相同。

综上所述，本研究结果显示精浆弹性硬蛋白酶浓度不影响精子的密度、活率及运动速度。由于本研究未对精液做病原菌培养和白细胞计数，未能确定精浆弹性硬蛋白酶浓度的升高是否与感染有关，因此，精浆弹性硬蛋白酶浓度与感染的相关性有待进一步的研究。

［1］Gomendio M，Malo AF，Garde J，et al.Sperm traits and male fertility in natural populations［J］.Reproduction，2007，134（1）：19－29.

［2］包华琼，蔡敏，陈可，等.计算机电磁辐射对男性精液质量影响［J］.重庆医学，2012，41（11）：1108－1110.

［3］房磊臣，苟欣，丘彦，等.禁欲时间对精液质量的影响［J］.重庆医学，2006，35（22）：2076－2078.

［4］邓天勤，黄永汉，李颖嫦，等.精浆生化检测在262例梗阻性无精子症分析中的意义［J］.检验医学与临床，2009，6（12）：929－930.

［5］林艳君，张唯力，胡自力，等.慢性前列腺炎对精液质量的影响［J］.重庆医学，2007，36（14）：1378－1379.

［6］王贺，邹德学，李世勤.精浆弹性硬蛋白酶与精液主要参数及精子功［J］.中国男科学杂志，2009，23（9）：55－57.

［7］Moretti E，Cosci I，Spreafico A，et al.Semen characteristics and inflammatory mediators in infertile men with different clinical diagnoses［J］.Int J Androl，2009，32（6）：637－646.

［8］Eggert－Kruse W，Zimmermann K，Oei flier W，et al.Clinical relevance of polymorphonuclear（PMN－）elastase determination in semen and serum during infertilityinvestigation［J］.Int J Androl，2009，32（4）：317－329.

［9］Henkel R，Maass G，Jung A，et al.Age－related changes in seminal polymorphonuclear elastase in men with asymptomatic inflammation of the genital tract［J］.Asian J Androl，2007，9（3）：299－304.