HPLC法测定感冒软胶囊中胡薄荷酮的含量

牛丽彬

摘要：目的：建立HPLC法同时测定感冒软胶囊中胡薄荷酮含量的方法。方法：采用Diamonsil C18 色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），用甲醇-水梯度洗脱，检测波长250nm，柱温35℃，流速1.0mL·min-1，进样量10μL。结果：胡薄荷酮与其他杂质峰分离良好。胡薄荷酮在0.393～6.286μg·mL-1与峰面积呈良好的线性关系（r=

0.9998），胡薄荷酮平均加样回收率为98.43%，RSD为0.80%（n=6）。结论：该方法操作简便，结果准确，可作为感冒软胶囊的质量控制方法。

关键词：HPLC 感冒软胶囊 胡薄荷酮 含量测定

感冒软胶囊是卫生部药品标准中药成方制剂第六册收录的品种，主要由羌活、麻黄、桂枝、荆芥穗、防风等14味中药材组成。用于外感风寒引起的头痛发热，鼻塞流涕，恶寒无汗，骨节酸痛，咽喉肿痛。荆芥穗是感冒软胶囊中具有抗病原微生物、解热、抗炎、镇痛作用的成分，本文采用HPLC法测定感冒软胶囊中胡薄荷酮的含量，获得满意效果，可用于产品质量控制。

1 仪器与试药

Agilent1200 高效液相色谱仪；赛多利斯股份公司CPA225D型电子分析天平（德国）；KQ-300 DA型超声波清洗器； UV-2550 型紫外分光光度仪（日本岛津）。胡薄荷酮对照品；甲醇为色谱纯；水为重蒸水。感冒软胶囊由石药中诺有限公司生产。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Phenomenex Luna C18（4.6mm×250mm，

5μm）；以甲酸溶液为流动相A，以水为流动相B，按表1中规定进行梯度洗脱；流速：1mL·min-1，柱温35℃；检测波长为250nm；进样量10μL。

表1 梯度洗脱条件

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2.2 溶液的制备

2.2.1 制备对照品溶液

准确称量胡薄荷酮对照品约1.965mg，置于50mL容量瓶中，加入甲醇溶解并稀释待规定的刻度，并摇匀，即得39.3μg·mL-1胡薄荷酮储备液；再取8mL胡薄荷酮储备液，置50mL量瓶中，同时加入甲醇至规定的刻度，得到含胡薄荷酮6.288μg·mL-1的对照品溶液。

2.2.2 制备供试品溶液

精密称定1g感冒软胶囊内容物，并将其置于塞锥形瓶中，并精确加入20mL甲醇，称定其重量，对其超声处理30min，然后冷却到室温，再称量其重量，通过甲醇补足减失的重量，并摇匀，然后用0.22μm有机系微孔滤膜对其进行滤过处理。

2.2.3 阴性对照液

对于除荆芥穗、薄荷以外的其余药味，按照处方比例进行称取，同时依据感冒软胶囊制备工艺制成相应的阴性样品，根据供试品溶液制备方法制成阴性对照液。

2.3 系统适用性实验

分别取10μL对照品溶液、供试品溶液、阴性对照液，注入液相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定，其色谱图如图1所示。

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A——对照品，B——供试品，C——阴性对照；1——胡薄荷酮

图1

2.4 线性关系考察

分别精密吸取对照品溶液，并用甲醇进行稀释，得到标准的溶液。含胡薄荷酮分别为0.393、0.786、1.572、3.144、6.288μg·mL-1，在液相色譜仪中注入10μL标准液，记录相应的色谱图。

2.5 精密度实验

按上述色谱条件，精密吸取含胡薄荷酮为1.572μg·mL-1的对照品溶液10μL，连续重复进样5 次，记录胡薄荷酮峰面积值分别为40.8，40.8，41.3，40.9，41.5，平均值为41.1，RSD为1.07%（n=5）。

2.6 重复性实验

取本品（批号0311428）内容物，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按色谱条件检测，精密吸取供试品溶液10μL，注入色谱仪，共进样5次，记录胡薄荷酮峰面积值分别为62.3，61.7，61.9，61.8，62.1，平均值为62.0，RSD为0.55%（n=5）。结果表明，本方法重复性良好。

2.7 稳定性实验

取本品（批号0311428）内容物，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按色谱条件，精密吸取供试品溶液10μL，分别在0，4，8，12，16，24h进样。

2.8 回收率实验

取6份已知含量的感冒软胶囊（批号0311428）内容物约0.5g，准确称量，分别加入到编号1～6的具塞锥形瓶中，分别精密加0.4mL、浓度0.0393mg·mL-1的胡薄荷酮对照品储备液，然后加入19.6mL甲醇，按照供试品溶液制备方法，计算回收率。平均回收率如表2所示：

表2 回收率试验结果

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2.9 样品含量测定

分别称取6批不同批号的感冒软胶囊内容物约1g，精密称定，用“2.2.2”方法制备，用“2.1”方法测定感冒软胶囊中胡薄荷酮的含量；结果见表3。

表3 样品测定结果

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3 讨论

3.1 检测波长的选择

取对照品溶液，在200～400nm范围内扫描，胡薄荷酮在250nm有最大吸收。故采用250nm作为测定波长。

3.2 流动相的选择

综合考虑，采用梯度洗脱，流动相中甲醇的浓度先低后高，使胡薄荷酮出峰时间23min左右，分离度好，灵敏度高。

本试验方法测定了薄荷与荆芥穗中的胡薄荷酮的含量，作为检测感冒软胶囊的质量标准，为感冒清热颗粒的质量检测提供了一种简便、有效的方法。

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