哈尔滨三乐生物工程有限公司制药厂,黑龙江 哈尔滨 150000
脱敏浓缩丸止痒及抗过敏药效学研究
张德志
哈尔滨三乐生物工程有限公司制药厂,黑龙江 哈尔滨 150000
目的探讨脱敏浓缩丸抗过敏及止痒的药理作用,为其临床治疗荨麻疹提供实验依据。方法利用卵蛋白致大鼠被动过敏模型和DNCB引起的迟发超敏反应模型研究脱敏浓缩丸的抗过敏作用;采用右旋糖苷致小鼠全身瘙痒模型观察脱敏浓缩丸的止痒作用。结果脱敏浓缩丸能减少小鼠搔痒次数,抑制过敏反应。结论脱敏浓缩丸具有止痒、抗过敏的药理作用,可用于荨麻疹的治疗。
荨麻疹;止痒;抗过敏
脱敏浓缩丸为民间自拟方,由紫草、当归、黄芪、苦参、白鲜皮五味中药组成,具有清热解毒、凉血活血、除湿止痒等作用,用于荨麻疹等疾病治疗。临床显效率较高,受到患者好评。荨麻疹在临床具有明显过敏、瘙痒及易复发等特点。本实验以止痒、抗过敏为主要指标,探讨脱敏浓缩丸治疗荨麻疹的药理作用,为临床用药提供实验支持。
1.1 实验材料
1.1.1 试验药物 受试药:脱敏浓缩丸,由黑龙江中医药大学制剂室提供,批号:100603。阳性对照药:荨麻疹丸,由吉林龙泰制药股份有限公司生产,生产批号:20121007B30。
1.1.2 实验动物 KM种小鼠,清洁级,体重18~22g,雌雄各半,由吉林大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK-(吉)2010-0003。 Wistar大鼠,清洁级,体重180~220g,雌雄各半,由吉林大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK-(吉)2010-0003。
1.1.3 试剂和仪器 电子天平;72-1分光光度计;打孔器;DNCB;右旋糖苷注射液;醋酸;伊文斯蓝等。
1.2 方法
1.2.1 脱敏浓缩丸对小鼠全身瘙痒的影响[1,2]取清洁级KM种小鼠50只,雌雄各半,常规饲养7天,适应环境。将小鼠随机分为5组,每组10只,即脱敏浓缩丸高剂量组(4.68g/kg)、中剂量组(2.34g/kg)、低剂量组(1.17g/kg)、阳性对照药组(2.6g/kg)和模型对照组。各组按所设剂量灌胃相应浓度的药液0.2ml/10g体重,模型对照组灌胃等容积的生理盐水。每日1次,连续7天。末次给药后1h,各组小鼠尾静脉注射右旋糖苷,观察注射后30min内小鼠搔痒次数和搔痒时间。
1.2.2 脱敏浓缩丸对DNCB致小鼠耳廓迟发性超敏反应的影响[1,2]取小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只,即脱敏浓缩丸高剂量组(4.68g/kg)、中剂量组(2.34g/kg)、低剂量组(1.17g/kg)、阳性对照药组(2.6g/kg)和模型对照组。小鼠腹部去毛,面积约3cm×3cm,将5%DNCB丙酮液均匀涂抹致敏,2日后强化1次。致敏前一日按上述剂量灌胃给药,模型对照组灌胃等容积的生理盐水,每日1次,连续9天。第9天给药后,立即将1%DNCB丙酮液均匀涂于小鼠一侧耳正反两面,建立Ⅳ型变态反应小鼠动物模型。于给药1h后处死小鼠,剪取直径8mm的耳片称重,以左右耳片重量之差为肿胀度。
1.2.3 脱敏浓缩丸对大鼠被动皮肤过敏反应的影响[1,2]①抗原的制备:取清洁级大鼠4只,肌内注射鸡蛋清生理盐水溶液,同时腹腔注射白百破疫苗,过13日后,摘眼球采血,离心分离抗卵蛋白血清,置冰箱备用。②造模:取清洁级大鼠50只, 随机分为5组,即脱敏浓缩丸低剂量组(0.81g/kg)、中剂量组(1.62g/kg)、高剂量组(3.24/kg)、阳性对药组(1.8g/kg)和模型对照组。每组大鼠按设计剂量给药,模型对照组灌胃等容积生理盐水,每日1次,连续7天。给药第4天,在大鼠背部中线两侧,距脊柱1.5cm处剪毛。给药第5天,在大鼠每侧剪毛处选取2点,间隔2cm,取抗血清,分别1∶5、1∶10稀释后,皮内注射。末次给药后1h进行抗原攻击,尾静脉注射5%鸡蛋清和0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g体重,30min后处死大鼠,翻转背部皮肤,测量蓝色反应斑直径,计算PCA抑制率。
2.1 脱敏浓缩丸对小鼠全身瘙痒的影响 与模型对照组相比,脱敏丸高、中、低剂量(4.68、2.34、1.17g/kg)的搔痒次数明显减少,搔痒持续时间明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结果见表1。
表1 脱敏浓缩丸对小鼠全身瘙痒的抑制作用±s,n=10)
注:与模型对照组比较,**P<0.01。
2.2 脱敏浓缩丸对DNCB致小鼠耳廓迟发性超敏反应的影响 与模型对照组比较,脱敏丸高、中、低剂量组(4.68、2.34、1.17g/kg)均能显著减少耳廓肿胀度,差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表2。
表2 脱敏浓缩丸对小鼠耳廓迟发超敏反应耳肿胀程度的影响
注:与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
2.3 脱敏浓缩丸对大鼠被动皮肤过敏反应的影响 与模型对照组比较,脱敏丸高、中剂量组(4.68、2.34g/kg)能明显抑制蓝斑直径,差异具有统计学意义(P<0.05),其抑制率分别为17.46%和16.67%,结果见表3。
表3 脱敏浓缩丸对大鼠被动皮肤过敏反应的影响±s,n=10)
注:与模型对照组比较,*P<0.05。
荨麻疹,中医学称“瘾疹”,俗称“风疹块”, 临床表现为遍身瘙痒,搔之不止,来势快,疹块骤然而生,迅速消退,起病急,缠绵难愈,反复发作[3]。该病主要由于禀赋不足,外受风寒风热之邪侵袭,再有情志不遂,肝郁不舒,气机壅滞不畅,郁而化火,灼伤阴血,感受风邪而诱发或因饮食不当,进食腥发及辛辣之品化热,内不得疏泄,外不得透达,郁于皮毛肌腠之间而发病[4]。中医治疗以清热凉血、消风解毒、活血化瘀等治则治疗。该方中紫草凉血活血、清热解毒治温热斑疹,当归可补血活血,黄芪补气固表、托毒排脓,苦参清热燥湿,白鲜皮可祛风燥湿、清热解毒,组方符合中医理论治疗荨麻疹的治则治法。
荨麻疹现代医学认为属于过敏性疾病,常与免疫系统异常有关,由多种原因所致的皮肤、黏膜小血管扩张和通透性增加而出现的一种局限性水肿反应疾病,其病因复杂,发病机制尚不明确,病情反复,难以根治[5]。经药效学研究脱敏浓缩丸能够明显减少右旋糖苷引起小鼠搔痒的次数,降低小鼠搔痒持续时间,同时减轻迟发超敏反应,对速发型超敏反应具有抑制作用。证明该药在符合中医治疗原则的基础上具有止痒、抗过敏的药理作用,可用于治疗荨麻疹。但其作用机理有待进一步研究。
[1]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1994:7.
[2]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术出版社,2006:10.
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[4]姜红玲.麻黄桂枝各半汤加减治疗荨麻疹60例[J]. 湖南中医药大学学报,2009,20 (11) ,37-39.
[5]陈晓雪,胡勇,谯志文.金蝉止痒胶囊对非免疫性接触性荨麻疹的治疗作用研究[J]. 中国药业,2013,22 (16 ),32-33.
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1007-8517(2014)13-0007-02
2014.04.28)