测定尼群地平片含量HPLC法的改进

内蒙古妇幼保健医院药剂科，内蒙古 呼和浩特 010020

测定尼群地平片含量HPLC法的改进

聂世英

内蒙古妇幼保健医院药剂科，内蒙古 呼和浩特 010020

目的对尼群地平片进行含量测定的高效液相法；方法色谱柱为Diamonsil(TM)-C18(250mm×4.6mm,5μm)，流动相为甲醇-水(70：30)，检测波长为237nm，流速为1.0ml/min,进样量为10μl。结果再改条件下，尼群地平进样量在0～2.5μg范围内线性关系良好(r=0.9996)，平均回收率为100.16%(n=9)。结论本方法简便、准确、快捷，重复性良好，可用于尼群地平片剂的含量测定和质量控制。

尼群地平； 高效液相色谱； 含量测定

尼群地平(商品名落普思)为钙离子通道阻滞剂，属短效抗高血压药。能选择性地作用于外周血管，阻断其钙离子内流，松弛其平滑肌，扩张血管而降压，能显著扩张冠状动脉，降低心肌耗氧量，保护缺血性心肌，用于各种类型的高血压，特别是伴有冠心病的高血压的治疗。目前《中国药典》2010年版收载尼群地平片的含量测定虽为高效液相色谱法，但操作较繁琐，流动相复杂，对仪器要求较高，为更简单有效控制尼群地平质量特建立了用HPLC法测定其含量的方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent-1100高效液相色谱仪；岛津UV-2450紫外分光光度计；Aiamonsil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱；Mettler ToledoAE-100电子天平(瑞士Mettler公司)。

1.2 试药 尼群地平对照品来源 批号：100585-200602；中国药品生物检定所。

尼群地平原料药来源 由赤峰万泽制药有限公司提供。

尼群地平片来源 规格：10mg/片；天津太平洋制药有限公司生产；产品批号：080704.

甲醇为色谱纯；水为纯化水，自制。

2 液的制备

2.1 对照品溶液 精密称取尼群地平对照品25mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。

2.2 原料药溶液 精密称取尼群地平原料药25mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。

2.3 供试品溶液 取尼群地平片剂20片，准确称定，研成细粉，精密称取尼群地平细粉适量(约相当于尼群地平25mg),置25ml量瓶中，加甲醇溶解(超声处理)并稀释至刻度，摇匀，静置即得。

1.5 患者管理 入院时注意对患者进行护理告知及入院宣教，入院后应有基本医师管理和查房、沟通机制或渠道。科室定期开展相应讲座，加强患者疾病认识和自身管理。术后应有基本监护措施，建立随访本或随访档案，进行后续随访。

2.4 阴性溶液 精密称取可溶性淀粉、羧甲基纤维素钠(5∶1)0.19g(相当于2.5片的尼群地平片重)，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。

3 实验方法的建立

3.1 检测波长的选择 精密称取尼群地平原料药0.050g置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；再精密量取该溶液2ml置100ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀。制成每1ml中含20μg的溶液。扫描紫外图谱，见图-1.尼群地平在351nm、237nm、204nm有最大吸收，在351nm、204nm处的吸收值较小，用于高效液相色谱法测定时响应值小，在237nm处吸收值大，灵敏度高。因此选择237nm作为检测波长。

3.2 流动相的选择 取1mg/ml的原料药溶液作为供试品。根据尼群地平的溶解性，选用C18色谱柱，以甲醇-水(70：30)为流动相[1]，237nm为检测波长，柱温30℃；流速为1.0ml/min，进样10μl,计录色谱图-2.结果：尼群地平的保留时间为12min左右且与杂质峰的分离效果良好，因此选定甲醇-水(70∶30)为流动相。

3.3 进样量的选择 分别以不同体积不同浓度进样4次，记录色谱图结果见表1。

表1 尼群地平进样量实验数据

由表得出：进样量选择为10μl(浓度为0.1mg/ml)

3.4 综上所述，色谱条件为：流动相为甲醇-水(70；30)；检测波长为237nm；柱温：30℃；流速为1.0ml/min，进样量为10μl(1μg)。

4 方法学考证

4.1 线性关系的考察 精密称取尼群地平对照品25mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀作为储备液。

表2 尼群地平线性关系实验数据

以尼群地平的浓度(X)为横坐标，相应的峰面积(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，见下图。

结果表明:尼群地平浓度在0～247μg/ml范围内线性关系良好，结果准确可靠。

4.2 精密度试验 精密量取浓度为1mg/ml的储备液1ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。在上述色谱条件下，连续进样5次，记录色谱图，计算尼群地平峰面积的RSD为0.09﹪。结果见表3.

表3 尼群地平精密度实验数据

结果表明：采用此方法测定尼群地平片的含量精密度良好。

4.3 稳定性试验 精密量取浓度为1mg/ml的储备液1ml置10ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀作为供试品。在0h、4h、8h、24h分别进样10μl，在上述色谱条件下，记录色谱图，结果见表4.计算尼群地平峰面积的RSD为0.94﹪。结果表明尼群地平在24h内稳定。

表4 尼群地平稳定性实验数据

4.4 重复性试验 取尼群地平片剂20片，准确称定，研成细粉，精密称取尼群地平细粉适量(约相当于尼群地平25mg)置25ml量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀静置。精密量取该溶液的上清液1ml，置10ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，摇匀。制备5份，作为供试品溶液，进样测定其峰面积，结果见表5.

表5 尼群地平重现性实验数据

结果表明:采用此方法测定尼群地平的重现性良好。

4.5 加样回收试验 以可溶性淀粉、羧甲基纤维素钠为辅料，配制9份尼群地平片的供试品溶液，每3份为一组，分别精密加入尼群地平原料药20mg、25mg、30mg，配制成含量约为2.5片尼群地平片的80﹪、100﹪、120﹪的模拟处方溶液，加甲醇溶解并稀释至刻度，尼群地平的浓度分别为80、100、120μg/ml，分别进样10μl，测定其回收率。结果见表6。

表6 尼群地平回收率实验数据

上述结果表明，采用此方法测定尼群地平的回收率良好，结果准确可靠。

5 样品含量测定

采用高效液相法测定天津太平洋制药有限公司生产的批号为080704的尼群地平片的含量。把尼群地平片配成每1ml中含0.1mg的尼群地平溶液，制备2份(各进样2次)，在上述色谱条件下测定其含量，采用外标法进行计算。结果见表7。

表7 尼群地平片含量测定数据

6 讨论

HPLC 法与化学法测得尼群地平结果基本一致,但本方法具有简便、灵敏、快速、准确的特点,专属性高,可有效的控制尼群地平片的质量[2]。本方法与药典方法相比易掌握,避免了因终点不明确造成的结果误差。

[1] 《中国药典》2010 年版(二部)；《欧洲药典》2008年版；《英国药典》2005.

[2]米振清，刘芹.HPLC法测定尼群地平片的含量[S].泰安市药品检验所 泰安 271000.

DeterminethecontentsofnitrendipinetabletsbyRP-HPLC

Nie Shi-ying

Maternal and child health hospital of Inner Mongolia,Hohhot 010020,China

ObjecticeTo determine the contents of nitrendipine tablets by RP-HPLC .MethodsThe chromatographic column was Diamonsil TM-C18 (250mm×4.6mm,5μm)with methyl alcohol - water(70:30)as the mobile phase, the detection wavelength was 237nm and the rate was 1.0ml/min ,the amount of injection was 10μl.ResultsThe calibration curves of nitrendipine were linear in the rang of 0～2.5μg, the average recoverg was 100.16﹪(n=9).ConclusionThe method is simple and accurate ,sensible and reproducible ,which can be used for the determination both the raw material and preparations and of the quatity control of nitrendipine tablets .

nitrendipin; RP-HPLC ; determination

R284.1

A

1007-8517(2014)06-0018-03

2014.02.12)