急性脑出血患者发病过程中血清炎性因子的变化

马征 孙雅菲 康玲伶 房铭辉 高燕军

·论著·

急性脑出血患者发病过程中血清炎性因子的变化

马征 孙雅菲 康玲伶 房铭辉 高燕军

目的探讨急性脑出血患者发病过程中血清炎症因子的变化。方法选择80例初发急性脑出血的患者，采用放射免疫法对其血清TNF-α和IL-6水平进行测定。并且与60例正常健康人对照组进行比较。结果与对照组相比，脑出血患者在发病过程中在不同时间点，试验组患者血清TNF-α和IL-6水平明显增高(P<0.05)；脑出血患者血清中TNF-α和IL-6的变化与出血量大小成正相关(P<0.05)。结论TNF-α和IL-6均与脑出血的发病有关，可通过对血清中的TNF-α和IL-6水平的测定来推测脑出血量的大小，进而可根据血清中的TNF-α和IL-6的变化来探讨脑出血的临床治疗新方法。

急性脑出血患者；炎性因子；肿瘤坏死因子；IL-6

脑出血指原发性非外伤性脑实质内出血，是一种发病率、致残率及病死率都很高的急性脑血管病，至今其治疗效果仍不理想[1]。ICH后继发性脑水肿是导致神经功能恶化的主要原因，其发生发展与ICH患者病情密切相关。随着研究的不断深入[2]，炎性因子、自由基损伤及氧化应激效应与出血性脑血管病的关系日益引起人们的广泛关注。肿瘤坏死因子(TNF-α)由活化的巨噬细胞、单核细胞和T细胞产生[3],是一种多功能细胞因子。白细胞介素-6(IL-6)也是一种重要致炎因子，主要由单核细胞和巨噬细胞产生。IL-6在炎症反应和免疫应答过程中起到关键作用，它参与炎症损伤过程，具有刺激细胞生长、促进细胞分化和加速细胞急性期蛋白合成的作用，在急性脑出血发病中具有重要意义[4]。为此，我们测定80例急性脑出血患者血清中的TNF-α和IL-6水平，探讨急性脑出血患者发病过程中血清炎性因子的变化，探讨他们与疾病的病程及预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究共分为2组：对照组与试验组。试验组：初发急性脑出血患者80例，我院2011年6月至2012年3月收住院患者，均符合第四届全国脑血管病学术会议修订的诊断标准[5]，并经颅脑CT证实；男48例，女32例；年龄44～83岁，平均年龄(62±6)岁。对照组：正常健康人60例，为同期我院健康体检人员，该组人员均无脑血管病，无心、肝、肾、血液病、自身免疫性疾病。男37例，女23例；年龄39～85岁，平均年龄(63±6)岁。2组受检者性别比、年龄方面差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

根据CT扫描片上血肿的最大直径和层厚对患者的血肿大小进行计算。根据血肿的大小将急性脑出血患者进行分组。出血量按多田氏公式(π/6×长×宽×层数)计算，将其分为：大量脑出血组(LH,出血量>30 ml)18例，中等量脑出血组(MH,出血量10～30 ml)42例，小量脑出血组(SH,出血量<10 ml)30例。

1.2 方法 抽取入院后3、7、14 d时肘静脉血，均为清晨采取空腹肘静脉血5 ml。离心后取上层血清，于-20°冰箱保存。采用放射免疫法测定血清TNF-α、IL-6水平[6]。

1.3 观察指标 血液标本用双抗体夹心ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6含量。具体步骤严格按照试剂盒说明书操作，酶标仪450 nm处测定OD值，绘制标准曲线，计算样品TNF-α、IL-6含量。

2 结果

2.1 脑出血患者血清中TNF-α和IL-6变化 与对照组相比，脑出血患者在发病过程中在不同时间点，试验组患者血清TNF-α水平明显增高(P<0.05)。脑出血患者试验组中，血清TNF-α呈现下降的趋势。与对照组相比，脑出血患者在发病过程中在在不同时间点，试验组患者血清IL-6水平明显增高(P<0.05)。脑出血患者试验组中，血清IL-6呈现下降的趋势。见表1。

2.2 不同出血量组血清中 TNF-α和IL-6变化 脑出血患者血清中TNF-α和IL-6的变化与出血量大小成正相关(P<0.05)。见表2。

表1脑出血患者血清中TNF-α和IL-6变化

组别TNF-α3d7d14dIL-63d7d14d对照组(n=60)21±921±921±912±811±812±8试验组(n=80) 106±22* 40±19*# 21±18*# 79±13* 43±12*# 12±10*#

表2 不同出血量组血清中TNF-α和IL-6变化

表2 不同出血量组血清中TNF-α和IL-6变化

组别TNF-α3d7d14dIL-63d7d14dLH组(n=18)101±1940±1821±1074±1240±1212±10MH组(n=42)105±2041±19*20±16*75±13*43±12*12±10*SH组(n=30) 113±21*41±20* 22±18*79±21*44±13*13±10*

注：与LH组比较，*P<0.05

3 讨论

脑出血是脑血管疾病中严重威胁人类健康的常见病，是最难治疗的脑卒中之一，在急性脑血管疾病中，脑出血约占10%～20%，全球每年发患者数为200万，占每年新发脑卒中的10%～15%，可能是由于同期老年人口的增长，脑出血的住院率在过去10年中增加了18%[7]，内科保守治疗无新的进展。多数学者认为脑出血后血肿周围脑组织的继发性损伤是导致神经功能恶化的主要原因，其中最重要的病理变化是继发性脑水肿，目前由于脑CT和MRI的广泛应用，脑出血的临床诊断并不困难，同时也能发现血肿周围的脑组织水肿。但由于脑出血后脑水肿产生的机制至今尚未阐明，其形成原因极其复杂，许多研究表明炎性因子的参与在脑出血后脑水肿的形成过程中起重要作用。炎性反应具有吸收血肿、清除坏死组织的作用，但过度炎性反应可导致局部脑血流量减少、血脑屏障通透性增加，引起脑水肿和脑组织继发损伤[8]。具有免疫活性的细胞炎性因子是由免疫细胞产生的小分子的多肽，它们有很高的生物活性，能调节和介导免疫反应、机体代谢、炎性反应。炎性因子在急性出血性脑血管病中能够起激活、介导了脑组织的继发损伤的作用。相当数量的研究认为炎性细胞因子在脑出血病理生理机制中有重要作用[9]，其中TNF-α和IL-6都是重要的炎性细胞因子。TNF-α是最先起作用的前炎性因子，是炎症反应的启动物质，具有广泛的生物活性作用，它可以活化各种炎性细胞释放白细胞介素。TNF-α不仅会刺激或诱发多种细胞因子释放，而且会激活白细胞和血小板产生血小板激活因子等，同时能激活内皮细胞，使白细胞粘附因子-I升高,能诱导血管舒张因子增加，使血管通透性增加。TNF-α主要由单核-巨噬细胞产生，既是一种具有重要免疫调节功能的细胞因子，也具有广泛的生物学功能，同其他细胞因子共同参与机体的生长发育和维持内环境的稳定，同时又介导感染、创伤及免疫应答反应。TNF-α在体内有17 kD分泌状态的可溶性的TNF-α(sTNF-α)和26 kD膜相关的TNF-α(mTNF-α)两种形式存在，通常把mTNF-α当作sTNF-α的前体，在膜金属蛋白酶的作用下，从膜上裂解，脱落成为sTNF-α。研究表明，两型TNF-α在受体结合、生物学效应及其作用机制等方面各具特础[10]。IL-6是由212个氨基酸组成，分子质量为26 kD的糖蛋白，是一种具有广泛免疫调节作用的细胞因子，主要由T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞和内皮细胞产生，在脑组织中产生的细胞可能是星形细胞和胶质细胞[11，12]。IL-6能参与机体多种组织细胞的生长、分化和调节，在免疫和炎症反应中发挥重要的作用，是机体-神经-内分泌网络调节的主要因子。本研究显示，试验组各时点血清TNF-α、IL-6水平均高于对照组，其中发病后7 d时，TNF-α达到高峰，14 d时开始下降。对于IL-6，则在发病后3d时达高峰，随后开始下降。说明TNF-α、IL-6在脑出血后炎性反应的发生、发展中具有重要作用。脑出血患者血清IL-6水平明显高于对照组，可以推测出单核-巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞处于激活状态。进一步推测出，患者在脑出血发生后，出现脑组织坏死现象，使得体内相当数量的抗原产生，来刺激免疫系统，进而使得相当数量的炎性细胞浸润和激活，导致强烈的免疫应答过程出现，致使单核-巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞等被激活，从而产生大量的炎性因子，也表明了IL-6参与了脑出血的病理变化过程。同时，研究结果也显示，脑出血患者血清中TNF-α和IL-6的变化与出血量大小成正相关。由此，可以通过对血清中的TNF-α和IL-6水平的测定来推测脑出血量的大小。因此，在治疗的过程中，可控制IL-6和 TNF-α含量，减少由此而引发的继发性脑损伤。因此，动态监测血清炎性因子的变化有利于对脑出血后脑水肿及脑损伤程度的判断以及预后的判定，将开辟ICH的内科治疗新途径，对减轻脑出血后脑损伤的程度及改善患者的预后有重要的临床价值。

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12 沈晓明,马丹,王兴山.脑梗死患者血清白介-6水平变化的临床意义.临床神经病学杂志,2002,15:296.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.08.023

067000 河北省承德市，承德医学院附属医院神经内科

高燕军，067000 承德医学院附属医院；

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2013-12-11)