小金县疾控中心结核分枝杆菌检测方法探讨

毛太兰

【摘要】有效控制结核病的障碍在于对机体缺乏早期、准确的检测方法，结核分枝杆菌检测作为结核病早期诊断的方法可能具有很高的诊断价值。我们通过了解疾控中心此方面的具体工作，简要综述了结核分枝杆菌检测方法，并针对这些方法做出相关研究进展的探索，旨在与同仁间互相学习，更好的服务于群众。

【关键词】县疾控中心；结核病诊断；结核分枝杆菌；检测方法

【中图分类号】 R378.91+1【文献标识码】B

随着环境污染和艾滋病的传播，结核病发病率越发强烈，结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病，也是一个严重的公共卫生问题。

1结核分枝杆菌检测的意义

20世纪80年代后，由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人口流动等因素，结核病的疫情骤然恶化。中国有5.5亿人感染过结核菌，约占全国人口的45%，高于全球平均水平。全国约有80%的结核病人集中在农村及经济不发达的中西部地区，全国结核病耐药率高达28%[1-4]。随着抗结核药物的不断发展和卫生生活状况的改善，结核的发病率和死亡率也一度大幅下降，而肺结核的及时诊断对治疗结核病有着重要的意义，以下我们通过探讨结核分枝杆菌检测方法，来对肺结核的诊断做出说明及认识。

2结核分枝杆菌检测方法的比较分析

（1）病原学检测方法

病原学检测方法主要包括萋尼染色、荧光染色；罗氏培养、分枝杆菌快速培养。

涂片镜检的抗酸染色方法是目前为止最快的检出方法，可用来检测病情进展，为感染控制提供参考依据，可确证培养物为阳性。荧光染色法是涂片法中阳性率较高，较快速的方法，但是由于假阳性率较高，保存时间短，荧光显微镜成本高等缺点，荧光染色法一直没有得到广泛的应用。

结核菌培养仍是目前诊断的金标准，是鉴定是否为活菌的可靠方法。罗氏培养法准确度、灵敏度略高于涂片法，可以鉴定死菌与活菌，可进一步进行菌种鉴定和药敏试验。但是诊断周期长，有一定的污染率。分枝杆菌快速培养技术是一个鉴定及药敏系统，操作简便，阳性标本检出率比传统固体培养提高10%左右。

（2）免疫学检测方法

免疫学检测方法包括抗原抗体检测及细胞因子检测。

结核菌素试验优点是对活动性结核的诊断灵敏度高达77%。缺点是假阴性产生于小儿结核、老年人结核、免疫缺陷或免疫功能低下患者；假阳性产生于接种过卡介苗的人，其也会产生阳性反应[5]。

γ干扰素释放试验被认为是近十年来结核诊断史上取得的最重要成就，该检测方法目前市售两种：QFT-G和T-SPOT.TB，比较两种方法，T-SPOT.TB更灵敏但QFT-G更特异，但均优于结核菌素试验，同时也被推荐用于潜伏结核诊断。

（3）分子生物学检测方法

分子生物学检测方法包括荧光定量PCR、芯片杂交。

近年来核酸扩增技术和杂交分析技术的发展，为分枝杆菌的检测、鉴定和药敏实验提供了极大的方便，可将诊断时间从几周降低到几天。研究、应用报道较多的结核病基因诊断技术主要包括PCR、核酸探针杂交、DNA序列测定等。

3小金县疾控中心结核分枝杆菌检测方法的现状及发展

小金县位于四川省阿坝藏族羌族自治州南部，全县人口近9万人，主要由汉族、藏族、回族等民族分布，农村生活习惯非常不好，有时甚至会出现几十个人供用一个酒杯的情况，这使得结核病的蔓延变得容易，因此卫生宣传工作一直是卫生系统部门的重点工作[6-7]。另一方面，改革开放以来，小金县卫生设施逐渐完善，疾控中心利用国债和灾后重建资金建成，并按照要求配备了县级实验室设备，并建成了洁净实验室及P2实验室，大大地提高了实验室检测能力。

对于结核病的诊断，目前疾控中心近年均150多个病人，有10多个呈现阳性，而检测方法则以抗酸染色法为主，痰涂片抗酸染色试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供。抗酸染色法用普通高倍显微镜，显示菌色为红色。此检测方法操作方便，易于掌握；片中结核菌分布均匀，染色效果清晰；消化，制片，烤片，染色均在超净工作室中完成，更好的提高了操作的安全性。但是抗酸染色对分枝杆菌非特异，其他如奴卡、红球菌属、军团菌、隐孢子虫等孢球虫等有抗酸菌特点，所有分枝杆菌均可着色，不能区分结核和非结核分枝杆菌；无法区别死菌与活菌，结果均为阳性；且敏感性低，一般1mL痰中有5000-10000条菌时可检出，而培养可检出>10-100条菌。我们一般要求新病人早晚各一口痰进行检测，而通过多年的检测经验得出，我们发现病人早上第一口痰检测率相对较高，这样我们可以此方法的缺陷中尽量提高我们的诊断能力。虽然目前抗酸染色法、胸部影像、症状诊断法已经能满足县内需求，而小金县亦作为一个旅游县级市，为了更好的服务广大群众，对于医护人员来说，而提高我们自身的技术水平的同时，也要积极学习其他检测方法，在有条件的情况下发挥作用[8]。

4结束语

结核病临床表现症状为咳嗽、咳痰大于2周，或咯血为肺结核可疑症状。早期肺部体征不明显，当病变为大叶性干酪性肺炎时，局部叩诊呈浊音，听诊可闻及管状呼吸音，有空洞合并感染或合并支气管扩张时，可闻及干或湿性啰音。胸部影像学检查不同类型肺结核的典型胸部影像学也有不同表现，而对于小金县疾控中心来说主要通过以上检测方法来进行诊断，在结核分枝杆菌检测中我们还有很多工作要完善，我们也要利用现有设备及科研成果，为广大群众提供更专业的服务。

参考文献

[1]王仙，袁俐.结核病实验室诊断技术[J].新疆农业科学，2004，41：45-48.

[2]樊学军，孙敏.结核病实验室诊断技术的比较研究[J].中国国境卫生检疫杂志，2005，28：03.

[3]陈双红，封岩.结核实验诊断的研究进展[J].海军医学杂志，2002，23：2.

[4]王仙，袁俐.结核病实验室诊断技术[J].新疆农业科学，2004，41：45-48.

[5]张立群，王云霞.4种不同结核分枝杆菌检测方法对结核病的诊断价值比较[J].中华医院感染学杂志，2010，9：266.

[6]尹志涛.我国近10年肺结核发病率分析及结核分枝杆菌快速检测方法研究[J].第三军医大学，2013，10：23.

[7]陈琪，张轩.结核分枝杆菌快速检测方法研究进展[J].国际检验医学杂志，2013，3：261.

[8]王华钧，孙小军.4种结核分枝杆菌检测方法的比较[J].中华医院感染学杂志，2012，9：17-20.