咽一方对小鼠耳肿胀及腹腔毛细血管通透性的影响

欧阳芳+薛敏菲+吴声振

【摘要】目的研究咽一方对二甲苯所致小鼠耳肿胀及醋酸所致腹腔毛细血管通透性的影响。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀法观察咽一方对耳廓肿胀的抑制率, 小鼠尾静脉注射伊文斯蓝, 腹腔注射醋酸造模, 测定吸光度。结果咽一方具有能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的作用。结论咽一方具有较强的抗炎作用。

【关键词】咽一方；二甲苯；耳肿胀；醋酸；通透性；吸光度；小鼠

Effect of Yanyifang on ear swelling and permeability of abdomen capillary in mice model OU Yang-fang, XUE Min-fei, WU Sheng-zhen. Department of Pharmaceutics, Foshan Hospital of Traditional Chinese Medicine, Foshan 528000, China

【Abstract】Objective To investigate the effect of Yanyifang on ear swelling induced by Xylene and permeability of abdomen capillary in mice model. Methods Xylene was used to induce ear swelling, and inhibition ratio of ear swelling was observed;Yiwensilan was injected into the vessel of mice tail, then acetic acid was injected into mice abdomen to cause inflammation and determine absorbency. Results Yanyifang could significantly inhibit Xylene induced ear swelling and acetic acid induced permeability of abdomen capillary in mice model. Conclusion Yanyifang has significantly action on anti-inflammatory.

【Key words】Yanyifang; Xylene; Ear swelling; Acetic acid; Permeability; Absorbance; Mice

本院咽一方是由鱼腥草、广土牛膝、桔梗等药组成的复方, 具有清热化痰、止咳平喘、清利咽喉、养阴清火之功效, 临床证实对慢性咽炎患者的治疗具有较为独特的疗效。本文拟咽一方对二甲苯所致小鼠耳肿胀及醋酸所致腹腔毛细血管通透性的影响研究, 探讨其抗炎活性。现报告如下。

1材料与方法

1. 1动物、试剂与仪器清洁级昆明种小鼠145只, 体质量18~22 g, 均购自广州中医药大学实验动物中心。咽一方处方由鱼腥草、广土牛膝、桔梗等药材组成, 均购自广州致信中药饮片有限公司, 经本院药检室刘东文主任药师鉴定为正品。咽一方汤剂(本院煎药室制备)；吲哚美辛肠溶片(25 mg/片, 广东华南药业集团有限公司)；二甲苯(分析纯, 国药集团化学试剂公司)。紫外可见分光光度计(上海分析仪器厂), 电子天平(METTLER AE-200), 打孔器(广州市新风工业公司)。

1. 2方法

1. 2. 1咽一方对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响实验［1, 2］取雄性小鼠75只, 体质量18~22 g, 编号、称体质量, 按体质量排序, 首先按随机数字表法随机分为五组, 即生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、咽一方低、中、高剂量组。咽一方低、中、高剂量组分别以相当于临床等效剂量1、3、9倍浓度给药；吲哚美辛阳性对照组以相当于临床等效剂量3倍浓度给药(58.5 mg/kg)；药物剂量按照70 kg成人体表面积换算。小鼠均灌胃给药, 给药容积为20 ml/kg, 1次/d, 连续给药7 d, 末次给药后1 h, 于小鼠右耳两面涂二甲苯50 μl, 左耳不涂为正常耳, 致炎30 min后, 脱颈椎处死, 用直径9 mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片, 用电子天平准确称取质量, 计算肿胀度及抑制率。左右耳质量之差为肿胀度, 抑制率(%)=［(生理盐水组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/生理盐水组平均肿胀度］×100%［3］。

1. 2. 2咽一方对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响实验［4］取小鼠70只, 雌雄各半, 体质量18~22 g, 编号、称体质量, 按体质量排序, 性别、体质量分层后按随机数字表法随机分为五组, 即生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、咽一方低、中、高剂量组。各组分别灌胃给药, 给药方法同1.2.1, 1次/d, 连续给药7 d。末次给药后1 h, 于各小鼠尾静脉注射1%伊文斯蓝生理盐水溶液0.02 ml/g, 随即腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml/只, 30 min后脱颈椎处死小鼠, 剖开腹腔, 用5 ml生理盐水冲洗腹腔数次, 收集洗液定容为10 ml, 离心1000 r/min×5 min, 取上清液在紫外可见分光光度计590 nm处测定吸光度［5］, 比较各组间差异。

1. 2. 3统计学方法所有资料均采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验, 计数资料比较采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2结果

2. 1咽一方对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响实验致炎后各组小鼠右耳立刻出现高度红肿现象。实验结果显示, 吲哚美辛阳性对照组和咽一方组对二甲苯致的小鼠耳肿胀均有明显抑制作用, 咽一方组对肿胀的抑制率呈明显的剂量依赖关系, 抑制作用随剂量的增加而增加(P<0.05), 详见表1。

2. 2咽一方对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响实验生理盐水组、吲哚美辛阳性对照组、咽一方低、中、高剂量组的腹腔洗涤液吸光度值分别为(1.022±0.212)、(0.765±0.118)、(0.874±0.021)、(0.782±0.088)、(0.745±0.102)。吲哚美辛阳性对照组及咽一方低、中、高剂量组吸光度均低于生理盐水组, 差异具有统计学意义(P<0.05)。

3讨论

慢性咽炎(pharyngo-laryngitis chronica)是咽部黏膜、黏膜下及淋巴组织的弥漫性炎症, 常为上呼吸道慢性炎症的一部分, 是临床常见病、多发病。该病病程长, 缠绵难愈, 一直是耳鼻喉科的难题, 同时也给患者带来很大的痛苦［6］。

慢性咽炎中医治疗中, 多以清热解毒, 滋阴生津, 利咽消肿为主［7］ 。本院咽一方以鱼腥草、桔梗为君药, 共奏清热化痰、宣肺利咽之功。鱼腥草清热解毒、消肿排脓功效与其抗菌、抗病毒、抗内毒素及抗炎等药理作用相关；桔梗利咽、祛痰、排脓功效与其镇咳、祛痰及抗炎等药理作用相关［8］。

炎症是具有血管系统的机体对组织损伤或致病因子浸入所发生的以防御为主的反应, 包括以毛细血管扩张、通透性增加而引起炎性渗出和炎性肿胀为特征的早期炎症, 以白细胞趋化游走为特征的中期炎症和以结缔组织增生、肉芽肿形成为特征的晚期炎症［9］, 其局部反应主要包括红、肿、热、痛及功能障碍。二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增加是用于研究炎症的常见动物模型［10］。

在二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀实验中, 生理盐水组小鼠造模后30 min耳廓肿胀明显, 与生理盐水组比较, 吲哚美辛阳性对照组及咽一方低、中、高剂量组小鼠耳廓肿胀度均显著降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果表明咽一方能显著抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀炎症反应, 对肿胀的抑制率呈明显的剂量依赖关系, 抑制作用随剂量的增加而增加。

在醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性实验中, 与生理盐水组比较, 各给药组的伊文斯蓝渗出量均明显降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果表明各给药组均能减轻炎症早期组织液等的渗出；咽一方各剂量组均能拮抗醋酸引起的炎症, 降低炎症导致的腹腔毛细血管通透性的异常增高。

咽一方是本院一名老中医应用多年的经验方, 该方在多年临床实践基础上总结并经临床证实疗效确切而毒副作用少的一种中药方剂。它充分体现了毒副作用少、愈后良好、不易复发、标本同治的中医药辨证论治的治疗原则。实验结果提示咽一方具有显著的抗炎作用, 为临床应用提供了可靠的科学理论及实验依据。

参考文献

［1］ 王小晓, 闫艳仓, 王旭丹, 等.复方牛蒡子含片的抗炎作用及其对急性咽炎模型大鼠的治疗作用.中国实验方剂学杂志, 2010, 16(11):147.

［2］ 孙慧静.吲哚-2, 3-二酮对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响.山东医药, 2011, 51(6):30-31.

［3］ 陈奇.中药药理实验方法.北京:人民卫生出版社, 2004:347.

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［8］ 刘青云.中药药理学.北京:人民卫生出版社, 2000:78-79, 201-202.

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［10］叶宝娜, 赫满良, 刘萍, 等.小檗碱的抗炎作用.中国畜牧兽医, 2007, 34(5):53.

［收稿日期：2014-04-08］

在二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀实验中, 生理盐水组小鼠造模后30 min耳廓肿胀明显, 与生理盐水组比较, 吲哚美辛阳性对照组及咽一方低、中、高剂量组小鼠耳廓肿胀度均显著降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果表明咽一方能显著抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀炎症反应, 对肿胀的抑制率呈明显的剂量依赖关系, 抑制作用随剂量的增加而增加。

在醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性实验中, 与生理盐水组比较, 各给药组的伊文斯蓝渗出量均明显降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果表明各给药组均能减轻炎症早期组织液等的渗出；咽一方各剂量组均能拮抗醋酸引起的炎症, 降低炎症导致的腹腔毛细血管通透性的异常增高。

咽一方是本院一名老中医应用多年的经验方, 该方在多年临床实践基础上总结并经临床证实疗效确切而毒副作用少的一种中药方剂。它充分体现了毒副作用少、愈后良好、不易复发、标本同治的中医药辨证论治的治疗原则。实验结果提示咽一方具有显著的抗炎作用, 为临床应用提供了可靠的科学理论及实验依据。

参考文献

［1］ 王小晓, 闫艳仓, 王旭丹, 等.复方牛蒡子含片的抗炎作用及其对急性咽炎模型大鼠的治疗作用.中国实验方剂学杂志, 2010, 16(11):147.

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［10］叶宝娜, 赫满良, 刘萍, 等.小檗碱的抗炎作用.中国畜牧兽医, 2007, 34(5):53.

［收稿日期：2014-04-08］

在二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀实验中, 生理盐水组小鼠造模后30 min耳廓肿胀明显, 与生理盐水组比较, 吲哚美辛阳性对照组及咽一方低、中、高剂量组小鼠耳廓肿胀度均显著降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果表明咽一方能显著抑制二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀炎症反应, 对肿胀的抑制率呈明显的剂量依赖关系, 抑制作用随剂量的增加而增加。

在醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性实验中, 与生理盐水组比较, 各给药组的伊文斯蓝渗出量均明显降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果表明各给药组均能减轻炎症早期组织液等的渗出；咽一方各剂量组均能拮抗醋酸引起的炎症, 降低炎症导致的腹腔毛细血管通透性的异常增高。

咽一方是本院一名老中医应用多年的经验方, 该方在多年临床实践基础上总结并经临床证实疗效确切而毒副作用少的一种中药方剂。它充分体现了毒副作用少、愈后良好、不易复发、标本同治的中医药辨证论治的治疗原则。实验结果提示咽一方具有显著的抗炎作用, 为临床应用提供了可靠的科学理论及实验依据。

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［10］叶宝娜, 赫满良, 刘萍, 等.小檗碱的抗炎作用.中国畜牧兽医, 2007, 34(5):53.

［收稿日期：2014-04-08］