成克伦
(贵州航天医院 病理科,贵州遵义563000)
数码显微摄影在病理工作中的应用
成克伦
(贵州航天医院 病理科,贵州遵义563000)
目的:探讨数码显微摄影在病理切片、大体标本和科研中的应用及效果。方法:采用数码显微摄影系统对常规病理切片、大体标本和科研病理切片进行摄影,软件处理图片后保存。结果:图片清晰、逼真,层次突出,对比度好,色彩自然,鲜明地记录了病理标本的病变特征。结论:数码显微摄影是病理资料储存、积累和管理的重要手段之一,对医疗、科研和教学起着非常重要的作用。
显微摄影;病理;应用
数码显微摄影近年来在医疗和科研等领域得到广泛应用,具有操作简便、图像真实和保存方便等优点,现将我院显微摄影应用体会总结如下。
1.1 一般资料。
佳能数码相机EOS600D、镜头接口、莱卡DM2500显微镜、台式电脑、iSee图像处理软件、病理切片、TCT片、科研有关切片和大体标本等。
1.2 方法。
对有价值的病理切片和TCT片以及有关科研切片进行显微摄影,对部分大体标本用外拍镜头进
行摄影,按说明书选用不同拍摄参数进行对比,最后用iSee图像处理软件处理保存,格式为JPEG图像。
图片清晰,层次突出,对比度好,色彩自然,准确记录了病理标本的形态特征(见图1、2)。
数码相机取代了胶卷相机是摄影史上的一大进步,且操作简便、功能强大。数码显微摄影系统由主要部件数码相机以及镜头接口、显微镜、电脑和相关软件构成。它的工作原理是:镜头将光线会聚到感光器(CCD)上, 感光器将光信号转变为电信号(电子图像),模数转换器(ADC)把模拟电信号转换成数字信号,再通过微处理器(MPU)对数字信号进行压缩并转化为特定的图像格式。显微摄影能够真实地反映组织的微细结构、形态及其病理改变,操作简便、直观、快捷,图像清晰逼真,编辑、保存方便,占用磁盘空间小。病理玻片的各种染色,特别是荧光染色,保存不当和时间太长都会褪色,失去当时的染色状态,利用数码显微摄影进行病理玻片标本资料采集和保存,克服了这些缺点,是病理资料积累和管理的好方法,尤其对有价值的标本和科研资料非常重要。在论文写作、书籍出版、学术交流、尸检和教学方面起着很好的作用,也为远程会诊和网上论坛交流提供了极大方便。摄影系统的相机加上外拍镜头,可以对大体标本进行拍摄,在临床病理中,大体标本不能全部长期存放,摄影采集大体形态和典型病变,保留了第一手临床资料,能够减少和避免医疗纠纷的发生。显微摄影图片与有关软件结合制作的图文报告,分辨率高,比通常用摄像头制作的图文报告清楚。总之,数码显微摄影系统的优点突出,应用越来越普遍,对医学形态学的发展起着巨大的推动作用。
图1 乳腺导管内癌 HE×200
图2 前列腺腺癌P504S表达 SP×400
数码拍摄时,相机和软件参数设置很重要,一定要选择合适,否则图片出现欠真实、清晰度差和背景色重等缺点,我们的经验是本款相机选择创意拍摄区的程序自动曝光、EOS-Utility拍摄软件选择实时模式对焦、自动或荧光灯白平衡,照片风格用户定义(锐度4、反差2、色彩饱和度1、色调-3、白平衡漂移A3M3),其余为默认,此操作拍摄效果较好。也可根据具体情况和经验进行设置,原始图片拍摄是质量的关键,它的好坏直接影响图片的后续处理和整体质量。各种参数的手动设置和相机本身的各种自动设置拍摄出来的图片是不完全一样的,这就需要利用图像处理软件进行剪辑、压缩、以及调整色彩、亮度、对比度、饱和度等系列处理,才能得到满意效果。处理过程中,要根据具体情况针对性进行调整,调节范围不宜过大,否则会导致图片失真。显微镜焦距和亮度调节也是一个重要环节,有的显微镜目镜下、电脑屏幕和相机液晶屏显示的图像清晰度不一样,视野选好后要以电脑屏幕清晰为准,通过显微镜微调来实现。不同显微镜倍数亮度要求不同,要随着倍数增大加大亮度。高品质的图片制作需要高质量的病理切片作为基础,恰当的显微镜调节和合理的图像处理软件三者的有机结合。数码显微摄影的强大功能和应用技巧,还需要在实践中不断探索,寻找更好的方法和经验,使之能更好地为病理形态学研究服务。
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2014-02-28
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1002-2376(2014)07-0008-02