五皮饮治疗仔猪水肿病模型的疗效观察

孙新堂，王传春，王成森，郭洪梅

（山东畜牧兽医职业学院，山东潍坊261061）

仔猪水肿病是仔猪断奶前后发生的一种急性、散发性、致死性肠毒素血症，其病因为致病性大肠杆菌所产生的毒素。本病的临床特征为头面部、下颌部及前肢皮下等部位水肿[1]，并有神经症状，发病率为30%～50%之间，死亡率可达到80%，对养猪业危害较大[3]。本试验以小鼠为实验动物，采用大肠杆菌107/86菌株复制病理模型，按照中兽医理论选药组方，观察疗效，最终确定五皮饮可以有效治疗本病。

1 材料与方法

1.1 菌株及注射剂量 用营养肉汤培养大肠杆菌107/86菌株（O139︰K12︰H1），大肠杆菌原菌液的浓度为3×108CFU/ml，注射剂量为0.3ml[2]。

1.2 中药及其制剂的制备 根据本病的病机，选则下列中药：桑白皮、生姜皮、陈皮、大腹皮、茯苓皮、藿香、苍术、党参、甘草、焦麦芽、焦神曲、白术及桂枝，按照君、臣、佐、使的原则从不同的侧重点组成如下方剂。中药方（A）：藿香、苍术、党参、甘草；中药方（B）：焦麦芽、焦神曲、白术、桂枝；中药方五皮饮（C）：桑白皮、陈皮、生姜皮、茯苓皮、大腹皮。

干燥上述药物并按组方中的比例准确称重置于砂锅中，加3～5倍体积的蒸馏水浸泡20min，武火煮沸后用文火熬制30min，共煎3次，合并药液并用纱布过滤。为确定用量，将药液蒸发浓缩

1.3 试验分组及给药方案 选取昆明系清洁级小鼠100只，公母各半，体重为20～30g，随机分为A～E 5组，每组20只。复制模型成功后分别开始给药，剂量均为0.2m l/10g体重，每日2次，治疗3d，观察10d。D组为空白对照组，不攻毒，不给药，腹腔注射肉汤培养液，灌服同等剂量生理盐水。E组为阳性对照组，注射细菌但不给药治疗，攻毒后灌服同等剂量的生理盐水。

1.4 疗效判断标准 本试验各药物组的治疗效果以死亡率和存活率来表示。

死亡率：凡死亡前出现眼睑水肿、后肢麻痹等仔猪水肿病的典型症状，死亡后剖检可见到胃壁、肠系膜水肿等示症病变，确定为感染死亡，据死亡数算出各组的死亡率。

存活率：试验结束时，各组存活动物占该组试验动物的百分数。

2 结果

2.1 治疗结果 接种107/86菌液后4～8小时，小鼠陆续出现发病，表现为萎靡不振、眼睑高度水肿、饮食欲降低、被毛逆立、心跳加速、呼吸急迫等。该病的典型症状为神经症状，如后肢麻痹、偏瘫、水肿（眼睑、前额等部位）。给药后治疗的第1、2d，各试验组发病小鼠症状无明显改善；第3d，C组小鼠疗效优于其余中药组方组，表现为C组小鼠死亡数少于A、B组，且C组小鼠健康状态要好于A、B组；第4d开始C组小鼠开始饮食增加，无死亡现象，而其余中药组则仍有死亡小鼠；E组小鼠由于不用药治疗，到第3d全部死亡。由表1可知，组方C（五皮饮组）的显效率明显高于其余各中药组方。

表1 各试验组小鼠存活情况

2.2 剖检病变 剖检病变主要表现为胃壁增厚、水肿、并有散在出血点（图1），肠系膜肿胀，肠内充满淡黄色黏稠液体，直肠有大量出血点，肝、脾、肺、肾等实质脏器有散在性出血点，大脑脑膜充血。

2.3 显微病变 取小鼠病变组织制作病理切片，光学显微镜下可观察到小动脉和微动脉炎病变，小动脉中膜核浓缩和核破裂，平滑肌崩解，坏死。病变的血管壁上由于有纤维素样物质沉积而变厚，管腔变窄，血管壁周围充满炎性细胞（图2），甚至形成血管套。脑干部可见神经细胞变性及神经纤维排列疏松，胶质细胞和巨噬细胞浸润，有时伴有微动脉炎。扫描电镜观察，小肠绒毛坏死脱落（图3），上皮细胞坏死；利用透射电镜观察亚显微结构病变，微血管内皮细胞及其线粒体肿胀，内质网扩张、脱颗粒，细胞核膜广泛性增殖，有伪足伸出，细胞核固缩，严重者，核崩解（图4）。

3 讨论

图1 胃壁增厚、水肿、出血

图2 胃壁固有层纤维变性H.E × 400 S

图3 小肠绒毛坏死EM × 300

图4 线粒体肿胀TEM × 12 000

近年来，仔猪水肿病以其高致死率和高饲料消耗率而引起众多研究者的重视。研究表明，F18ab菌毛和志贺样毒素Ⅱ型变异体（SLT-Ⅱe）为引起仔猪水肿病的致病因子[8,9]。本病的发病机理为菌毛黏附于小肠绒毛上皮细胞后菌体定居、增殖并产生SLT-Ⅱe，猪只吸收毒素后引起广泛性血管内皮细胞损伤，导致血管的通透性增加，血液中的液体成分渗入到组织中，从而引起头部、眼睑、前肢等部位的皮下水肿和神经症状[10]。剖检可见患病动物的胃壁和肠系膜胶冻样水肿，胸腹腔大量积液；显微镜下观察，胃水肿，黏膜下层充满大量浆液和散在的炎性细胞，肌层与黏膜层分离；各组织器官的小动脉和微动脉充血，周围有炎性细胞浸润[3]。

从治疗效果看，方剂A、B、C治疗后小鼠的存活率分别为40%、35%和70%，C组（五皮饮）的存活率显著高于A、B两组（P<0.05），证明五皮饮对人工感染引起的小鼠仔猪水肿病有显著的疗效。中兽医认为，仔猪水肿病主要由脾阳虚衰引起的水湿内停，泛滥皮肤所致，治宜健脾、行气、渗湿利水。纵观试验中所用的方剂，A方由藿香、苍术、党参、甘草组成，以益气健脾为主，渗湿利水作用不足，故其治疗效果较差；B方由焦麦芽、焦神曲、苍术、泽泻、白术、桂枝组成，以消积导滞、渗湿利水为主，但行气作用不足，故其效果也逊于C组；C方为经典名方五皮饮，药物组成为茯苓皮、桑白皮、陈皮、大腹皮和生姜皮，其中茯苓皮可渗湿利水、健脾、宁心安神，陈皮理气和中、止咳化痰，二药合用行气化湿醒脾共为主药；桑白皮宣降肺气，疏通水道为辅药，主治面目浮肿；生姜皮可以辛散水湿，大腹皮乃槟榔的干燥果皮，下气利水，具有很强的消肿和导水下行作用。诸药相合，健脾、理气、行水，共奏健脾化湿、利水消肿之功[9～11]。其功效正于本病的治疗原则相符，故在本试验中取得了良好地治疗效果。

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