谢兆莉,周 贤,李爱欣,孙孝玉,杨羽双,王淑敏
(长春中医药大学,长春 130117)
高血脂是指脂肪代谢或运转异常使血浆一种或多种脂质高于正常值的一种症状。高脂血症是诱发和加重动脉硬化、高血压、糖尿病、脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎等疾病的主要原因,与冠心病的发生和发展有着密切的关系[1]。人参为五加科人参PanaxginsengC.A.Mey.的根,具有大补元气,补脾益肺,生津止渴,安神益智等功效。现代研究表明,人参多糖能提高巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞NK活性及IL-2产生能力,从而增强机体的免疫功能[2]。本试验将人参提取完皂苷后的药渣经高温高压处理,水煎煮提取高温高压处理后的人参多糖,研究多糖对高脂饮食小鼠高血脂的预防作用。
TECAN光吸收酶标仪Sunrise(瑞士Tecan帝肯),总胆固醇试剂盒(CHO),低密度脂蛋白胆固醇试剂盒(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇试剂盒(HDL-C),甘油三酯试剂盒(TG)均购于北京北化康泰临床试剂有限公司。 实验动物为健康昆明小鼠,体质量18~22 g,吉林大学实验动物中心提供。人参药渣多糖及高温高压处理后的人参药渣多糖皆为本实验室提取所得。山楂叶总黄酮由中科院长春应化所绿色化学实验中心提供。
2.1 多糖的制备与高脂饲料[3-4]分别取一定量的经高温高压处理过的人参药渣,加8倍量水煎煮1 h,滤过,滤渣加4倍量水煎煮30 min,滤过,合并滤液,减压浓缩至比重为1.1~1.3,放置至室温,加入乙醇至含醇量为60%,静置过夜。取其沉淀置于60 ℃干燥箱中干燥,粉碎,即得人参药渣多糖和高温高压人参药渣多糖。高脂饲料:67%基础饲料,30%猪油,3%胆固醇。
2.2 高血脂小鼠模型的分组及构建[4-6]取体质量18~22 g健康成年小鼠50只,随机分成5组,每组10只,雌雄各半。分为空白对照组,模型对照组,阳性对照组,人参药渣组,高温高压人参药渣组。各组小鼠自由进食和饮水,每天称1次体质量并按小鼠体质量灌胃给药,连续灌胃45 d。实验方案见表1。
2.3 指标观察与测定方法 每日观察小鼠的生活状况,皮毛光泽度,粪便情况等变化。连续给药45 d后,小鼠禁食但不禁水,12 h后断头取血,分离血清,按试剂盒测定操作方法测血清中的总胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)和甘油三酯(TG)体积浓度。
表1 实验设计方案
3.1 多糖样品对实验小鼠生活状况的影响 实验中观察到高脂模型组小鼠呆滞嗜睡,精神萎靡,运动迟缓,皮毛杂乱,粪便稀软。经过一段时间给药后,阳性对照组较精神较佳,活泼好动,皮毛柔顺光滑,粪便正常;人参药渣组呆滞嗜睡,运动较迟缓、皮毛杂乱,粪便干燥;高温高压人参药渣组活泼、精神较佳,皮毛光滑,粪便正常。
3.2 多糖样品对高脂饮食小鼠血脂的影响 对高脂饮食小鼠三酰甘油(TG)体积浓度的影响:高温高压人参药渣组>人参药渣组>阳性对照组。对高脂饮食小鼠总胆固醇(CHO)体积浓度的影响:高温高压人参药渣组>阳性对照组>人参药渣组;对高脂饮食小鼠高密度脂蛋白(HDL-C)体积浓度的影响没有显著性差异;对高脂饮食小鼠低密度脂蛋白(LDL-C)体积浓度的影响:阳性对照组>高温高压人参药渣组>人参药渣组。如表2、图1所示。
图1 人参药渣多糖对实验性高脂小鼠血脂体积浓度的影响
表2 多糖对高脂饮食小鼠血脂体积浓度的影响 mmol/L
注:与空白组比,#P<0.05,##P<0.01;与高脂模型组比,△P<0.05,△△P<0.01。
实验结果表明,人参药渣多糖能极显著降低高脂小鼠血清TG、CHO和LDL-C体积浓度(P<0.01),但对HDL-C体积浓度的升高效果不明显,对模型小鼠生活状态无明显改善。高温高压人参药渣组能极显著降低高脂小鼠血清TG、CHO、LDL-C体积浓度(P<0.01),能显著性升高HDL-C体积浓度(P<0.05),对小鼠生活状态有明显改善,可使其恢复正常状态。从对高血脂小鼠生活状况及血脂体积浓度的影响2方面来综合评价,高温高压人参药渣多糖预防小鼠高血脂效果显著。主要是由于人参药渣中的多糖在高温高压的过程发生了一系列复杂的化学变化,使长链大分子多糖断裂成短链多糖,增强了对高血脂症小鼠的预防效果。
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