平湖市227例手足口病患者病原学检测结果分析

+陈其龙+蒋雪峰

作者简介：陈其龙(1952— )，男,主任医师。平湖市227例手足口病患者病原学检测结果分析陈其龙, 蒋雪峰 （浙江省平湖市疾病预防控制中心, 浙江 平湖 314200）手足口病(HFMD)是一种由肠道病毒引起的常见传染病，婴幼儿高发。一般认为病原体主要为肠道病毒EV71型（EV71）及柯萨奇病毒A组16型（coxA16）。为进一步了解平湖市手足口病病原体种类，我们自2010年起开展手足口病患者病原学检测，现将2010年1月—2013年8月的检测结果分析如下。

1对象与方法

1.1对象

2010年1月—2013年8月，在平湖市市级及以上医院临床诊断的手足口病病例共227例，其中男性146例，女性81例。

1.2标本采集

在发生手足口病的现场采集病人发病7 d内粪便(量为5~8 g/份)，放于灭菌采便管内；或是肛拭采样，即将采样棉签插入病人肛门2 cm,轻轻转动，取出放入保存液中；对咽拭子标本(病人发病3 d内)用专用采样棉签取适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位(避免触及舌部)，取出后放入装有3～5 mL保存液的试管内，折断棉签杆，旋紧管盖并封好后放置－20℃低温冷藏待检；疱疹液采集用75.00%酒精对疱疹周围皮肤消毒后，用消毒针挑破疱疹，再用棉签蘸取疱疹液迅速放入装有3～5 mL保存液管中，然后折断棉签杆旋紧管盖并密封。

1.3方法

检测方法按《卫生部手足口病预防控制指南(2009版)》要求进行[1]；荧光定量PCR检测试剂盒由大连宝生物公司提供，荧光定量PCR仪为美国安捷伦公司生产，在有效期内使用。

2结果

2.1阳性率

共采样227例，阳性147例，阳性率为64.76%。其中男性146例，女性81例，男性阳性率为64.38%，女性阳性率为65.43%，两者基本一致。

2.2年龄分布

0~26岁，其中0~3岁166例，占73.13%。

2.3采样时间与阳性检出关系

227例标本中，发病后3 d内采样的146例，阳性105例，阳性率为71.92%；4~7 d采集的68例，阳性36例，阳性率为52.94%；超过7 d采样的13例，阳性6例，阳性率为46.15%，即采样间隔时间越长，检测结果阳性率越低(表1)。

表1不同采样间隔时间与检测阳性率（%）

发病至采样

间隔（d）病例

数阳性EV71CoxA16其他肠道病毒合计阳性率0~14636294010571.924~68115203652.948~13006646.15

2.4不同标本类型阳性率比较

227例标本中，咽拭子97例，肛拭子122例，疱疹液8例，以采样间隔时间为分层条件，结果显示，采样间隔时间相同条件下，不同标本类型检测结果差异不明显(表2)。

表2不同标本类型与检测阳性率（%）

发病至

采样间隔

（d）样本类型病例

数阳性EV71CoxA16其他肠

道病毒合计阳性率0~咽拭子671117124059.70肛拭子或粪便72237275779.17疱疹液72507100.004~咽拭子21223733.33肛拭子或粪便4683172860.87疱疹液11001100.008~咽拭子9004444.44肛拭子或粪便4003375.00

2.5不同年份手足口病病原学分析

本次共检测到EV71型病毒47例，CoxA 16型病毒34例，其中2010年两种类型病毒各占45.45%，而2013年分别占11.43%和0.00%，呈下降趋势；而其他肠道病毒感染所占比例从2010年的9.09%上升至2013年的88.57%。经对不同年份手足口病病原体类型分析显示，不同年份手足口病流行病原体的构成有明显差异(表3)。

表3不同年份手足口病病原学检测结果分析

年份EV71例数构成比CoxA16例数构成比其他肠道病毒例数构成比合计20101545.451545.4539.093320111336.11616.671747.223620121534.881330.231534.88432013411.430—3188.5735合计4731.973423.136644.901473讨论

手足口病病原体属于小RNA病毒科肠道病毒属，包括肠道病毒71(EV71)，柯萨奇病毒A组（16、4、5、7、9、10型）和B组（2、5型），埃可病毒血清型等，而最为常见病原体类型为EV71型及Cox Al6[2]。1957年新西兰首次报道该病，1958年分离出CoxA，1959年命名为手足口病，1969年EV71在美国被确认[3]。

我市手足口病发病以0~3岁散居儿童为主，每年5—8月为高发季节。病原学检测显示，手足口病病原体，2010—2012年以EV71和CoxA16为主，占50.00~60.00%，而2013年则以其他肠道病毒为主，占88.57%。目前手足口病检测方法按照《卫生部手足口病预防控制指南(2009版)》操作，即仅重点检测EV71和CoxA16常见病原类型，而未开展其他病毒检测，导致无法判断本市目前手足口病流行的病原体具体类型。因此我们以为，应设立手足口病病原体监测哨点，提高肠道病毒分型检测技术，为手足口病防控提供病原学依据。我市发生的5例重症病例中，3例EV71感染，1例CoxA16感染，另1例为其他肠道病毒感染，因此仍需警惕EV71感染后重症病例的出现。

手足口病病原体检测受采样时间的影响明显，即发病后采样时间越早，标本检测阳性率越高。《卫生部手足口病预防控制指南(2009版)》中规定，粪便及肛拭子采样应在发病后7 d内采集，咽拭子应在发病后3 d内采集。本次检测结果显示，无论咽拭子还是肛拭子或是疱疹液，3 d内采集的阳性率均明显高于超过3天标本，且不同标本类型间无明显差异，这与上海浦东报道基本一致[4]。因此,建议手足口病病原学检测力争在发病后3 d内采集，可根据患儿年龄、配合程度及症状采样咽拭子、肛拭子或粪便、疱疹液。

4参考文献

［1］卫生部．手足口病预防控制指南(2009版)［S］．2009．

［2］胡亚美，江载芳.实用儿科学［M］．第7版．北京:人民卫生出版社，2002:802．

［3］于长水．天津市由CoxA16肠道病毒引发的手足口病流行［J］．中华流行病学杂志，1985，6(2):66-69．

［4］潘丽峰，刘丹，刘青，等.上海市浦东新区2010—2011年手足口病检测情况分析［J］.中国初级卫生保健,2011,11（25）:64-66.

(收稿日期：2013-10-24)文章编号：1004-9231(2014)04-0174-03