Rho激酶抑制剂对大鼠慢性低灌注脑损伤脑组织的保护作用

杨智勇+杨林+钟丽芳

[摘要] 目的 探讨Rho激酶抑制剂对大鼠慢性低灌注脑损伤脑组织的保护作用。 方法 选择SD大鼠，随机分为假手术组、脑损伤组、法舒地尔组，检测脑组织功能、梗死面积及炎症因子水平。 结果 脑损伤组的脑组织功能评分高于假手术组和法舒地尔组，脑组织损伤面积大于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）。脑损伤组的IL-8、TNF-α水平高于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）。IL-8、TNF-α水平与脑组织功能评分及损伤面积呈正相关。 结论 Rho激酶抑制剂能控制炎症反应水平、改善慢性低灌注损伤的脑组织功能，具有积极的应用价值。

[关键词] 脑组织损伤；低灌注；Rho激酶；法舒地尔

[中图分类号] R742[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721（2014）05（a）-0011-03

Protective effect of Rho kinase inhibitor on brain tissue of rat with chronic hypoperfusion injury

YANG Zhi-yong YANG Lin ZHONG Li-fang

Department of Neurosurgery,People′s Hospital of Huidong County in Guangdong Province,Huidong516300,China

[Abstract] Objective To explore protective effect of Rho kinase inhibitor on brain tissue of rat with chronic hypoperfusion injury. Methods SD rats were enrolled and randomly divided into three groups,including sham operation group,cerebral injury group,fasudil group.Then brain function,infarct size and the level of inflammatory factors were detected. Results Brain function score of cerebral injury group was higher than that of sham operation group and fasudil group respectively,brain tissue damage area of cerebral injury group was larger than that of sham operation group and fasudil group respectively,with statistical difference(P＜0.05).The level of IL-8 and TNF-α of cerebral injury group was higher than that of sham operation group and fasudil group respectively,with statistical difference(P＜0.05).The level of IL-8 and TNF-α were positively correlated with brain function score,brain tissue damage area. Conclusion Rho kinase inhibitor has positive application value for controlling inflammatory reaction and improving the level of chronic hypoperfusion injury of brain function.

[Key words] Brain tissue injury;Hypoperfusion;Rho kinase;Fasudil

脑组织缺血性疾病是临床上的常见疾病，会对患者的生命安全和生活质量造成严重影响。在疾病的发生、发展过程中，脑组织低灌注损伤持续存在，采取有效的手段解决低灌注所造成的脑组织损伤具有积极的临床价值[1]。目前研究认为，Rho激酶在脑组织缺血性损伤中发挥了重要价值[2]。本研究主要分析Rho激酶抑制剂辅助治疗对脑慢性低灌注损伤脑组织保护作用的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

选取健康雄性SD大鼠（由广东省医学实验动物中心提供）30只，体重200～230 g，平均（219.3±25.2） g，随机分为假手术组、脑损伤组、法舒地尔组，每组10只。

1.2 方法

1.2.1 假手术组假手术组仅做手术切口，分离颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉的操作，分别于术前1 h和术后1 h给予等量生理盐水腹腔注射。

1.2.2 脑损伤组术前1 h，给予等量生理盐水，腹腔注射，参照Longa等[3]的方法进行大脑中动脉线栓法制备大鼠脑组织慢性低灌注损伤模型：水合氯醛麻醉后，摆放仰卧位，做颈部正中切口，分离皮肤、皮下组织和肌肉，暴露气管，于气管右侧寻找颈动脉鞘并切开，分离颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，结扎颈外和颈总动脉，于颈内动脉处做一个小切口，缓慢插入直径为0.23 mm的尼龙栓线。术后1 h，再次给予等量生理盐水，腹腔注射。

1.2.3 法舒地尔组[4]术前1 h，给予甲磺酸法舒地尔10 mg/kg，腹腔注射；按模型组相同的方式制备大鼠脑组织慢性低灌注损伤模型，并于术后1 h，再次给予甲磺酸法舒地尔10 mg/kg，腹腔注射。

1.3 观察指标

1.3.1 脑组织功能术后24 h，参考Longa等[3]的方法对3组大鼠的脑组织功能进行评价：无神经损伤症状为0分，对侧前爪不能完全伸展为1分，对侧前爪转向另一侧为2分，对侧前爪向另一侧倾倒为3分，不能行走为4分，昏迷或死亡为5分。

1.3.2 脑组织损伤面积处死大鼠，取右侧脑组织，用切片机切取视交叉部位的脑片，厚度约2 mm，2% TTC溶液染色、37℃、15 min，分析梗死脑组织（染色后为白色）和正常脑组织（染色后为红色）的面积，计算梗死脑组织面积/（梗死脑组织面积＋正常脑组织面积）。

1.3.3 血清炎症因子处死大鼠时采集血液，离心后取血清检测炎症因子水平，包括肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素-8（interleukin，IL-8）。检测方法为酶联免疫吸附法[5]：将样品加于酶标板孔底部，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120 min；弃去液体，甩干，不用洗涤；每孔加标记抗体工作液100 μl（取1 μl生物素标记抗体加99 μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前1 h内配制），37℃，60 min；温育60 min后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，浸泡1～2 min/次，甩干；每孔加过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100 μl，37℃，60 min；温育60 min后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，浸泡1～2 min/次，350 μl/每孔，甩干；依序每孔加底物溶液90 μl，37℃避光显色（30 min内肉眼可见标准品的前3～4孔有明显的梯度蓝色，后3～4孔梯度不明显，即可终止）；依序每孔加终止溶液50 μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同；用酶联仪在450 nm波长依序测量各孔的光密度。检测材料：Roche酶联免疫吸附试剂盒。

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0软件进行分析，计量资料以x±s表示，采用方差分析，两两比较采用LSD法，相关性分析采用单因素回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组大鼠脑组织功能及损伤面积的比较

脑损伤组的脑组织功能评分高于假手术组和法舒地尔组，脑组织损伤面积大于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表13组大鼠脑组织功能及损伤面积的比较（x±s）

与脑损伤组比较，*P＜0.05

2.2 3组大鼠血液炎症因子水平的比较

脑损伤组的IL-8、TNF-α水平高于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 3组大鼠血液炎症因子水平的比较（μg/L，x±s）

与脑损伤组比较，*P＜0.05

2.3 炎症因子水平与脑组织功能评分及脑组织损伤面积的相关性

IL-8、TNF-α水平与脑组织功能评分及损伤面积呈正相关（P＜0.05）（表3）。

表3 炎症因子水平与脑组织功能评分及脑组织损伤面积的相关性

3 讨论

近年来，缺血性脑损伤的临床发病率逐年升高，已成为危害人类生命安全和生存质量的重要疾病，具有致死率和致残率高、预后差的特点[6-7]。临床上，引起脑组织缺血性损害的疾病包括高血压、动脉粥样硬化、脑血管栓塞、痉挛等，可在造成脑血管狭窄、脑组织血管减少或中断的基础上引起神经功能损害[8]，并伴发头痛、呕吐、感觉和运动功能受损等临床症状及体征[9]。多数患者在疾病的发生、发展过程中，可持续存在脑组织的慢性低灌注损伤[10]，因此，针对该情况探寻有效的治疗方法，对临床治疗工作具有指导意义。

Rho激酶作为小G蛋白Rho下游的重要底物之一，能通过磷酸化的方式激活下游信号通路，并参与炎症细胞的黏附、迁移及炎症因子的合成和释放[11-12]。法舒地尔作为一种Rho激酶抑制剂，能通过抑制Rho激酶的生物学作用来发挥脑组织保护作用[13]。本研究通过建立大鼠脑组织慢性低灌注损伤模型并给予法舒地尔治疗，分析Rho激酶抑制剂对脑组织的保护作用。研究结果显示，脑损伤组的脑组织功能评分高于假手术组和法舒地尔组，脑组织损伤面积大于假手术组和法舒地尔组，说明模型老鼠建立成功，脑损伤组术后的脑组织功能下降、梗死面积增加；法舒地尔治疗能有效保护脑组织，改善术后脑组织功能，减小梗死面积。

目前研究认为，在脑组织慢性低灌注损伤过程中，炎症反应发挥了重要作用[14]。中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞向脑组织内大量募集并产生TNF-α及IL-1、IL-2、IL-6等炎症因子，直接介导脑组织损伤[15-16]。本研究结果显示，脑损伤组的IL-8、TNF-α水平高于假手术组和法舒地尔组，说明法舒地尔治疗能有效控制脑组织损伤后的炎症水平。

本研究结果显示，IL-8、TNF-α水平与脑组织功能评分、脑组织损伤面积呈正相关，说明炎症因子水平越高、脑组织损伤越严重，两者具有较好的相关性，也能反映法舒地尔可通过控制炎症反应水平来改善脑组织功能。

综上所述，Rho激酶抑制剂能控制炎症反应水平、改善慢性低灌注损伤的脑组织功能，具有积极的应用价值。

[参考文献]

[1]于宗良，陈乐，杨向军.缺血后适应联用粒细胞集落刺激因子对心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用[J].东南大学学报·医学版，2013，32（1）；51-55.

[2]杨坤军.急性脑梗死神经功能恶化的研究进展[J].医学综述，2010，16（20）；3098-3011.

[3]Longa EZ，Weinstein PR，Carlson S，et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J].Stroke，1989，20（1）：84-91.

[4]冯治国，何润源，侯玉立.法舒地尔治疗缺血性脑卒中的系统评价[J].中西医结合心脑血管病杂志，2012，10（4）：424-427.

[5]王建军.大肠癌血清肿瘤坏死因子α，白细胞介素8和可溶性白细胞介素2受体水平的检测及其临床意义[J].中国肿瘤临床与康复，2012，19（3）：241-243.

[6]涂献坤，杨卫忠，石松生.炎症反应介导缺血性脑损伤的机制研究进展[J].中华神经医学杂志，2011，10（3）：322-324.

[7]孙海蛟.法舒地尔配合电针疗法治疗急性缺血性脑血管病的临床观察[J].中国医学创新，2012，9（36）：137-138.

[8]Petrinovic MM，Duncan CS，Bourikas D，et al.Neuronal Nogo-A regulates neurite fasciculation,branching and extension in the developing nervous system[J].Development，2010， 137（15）：2539-2550.

[9]李双凤，王丹，王亚平，等.MPTP参与硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的延迟性保护作用[J].东南大学学报·医学版，2010，29（6）：648-651.

[10]王莉.奥扎格雷联合法舒地尔对短暂性脑缺血发作患者脑氧代谢及炎性指标的影响研究[J].吉林医学，2013， 34（19）：3770-3772.

[11]徐悦，汪健，邓晓玲，等.法舒地尔对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后HMGB1表达的影响[J].中国老年保健医学，2013，11（3）：23-25.

[12]Okada T，Teranishi K，Chen Y，et al.Reversal of postischemic hypoperfusion by tempol:endothelial signal transduction mechanism[J].Neurochem Res，2012，37（4）：680-688.

[13]范鹏涛.盐酸法舒地尔联合辛伐他汀治疗短暂性脑缺血发作疗效观察[J].中国社区医师·医学专业，2010，12（12）：26.

[14]Ishiquro M，Kawasaki K，Suzuki Y，et al.A Rho kinase(ROCK)inhibitor,fasudil,prevents matrix metalloproteinase-9-related hemorrhagic transformation in mice treated with tissue plasminogen activator[J].Neuroscience，2012， 220：302-312.

[15]梁燕，娄季宇，白宏英，等.法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注后Rho激酶、Nogo-A表达的影响[J].中国实用神经疾病杂志，2011，14（3）：27-29.

[16]陈美惠，刘安民，巢晓娟，等.Rho激酶抑制剂法舒地尔对中枢神经系统疾病作用及其结构改造的研究进展[J].中国新药杂志，2013，22（1）：59-67.

（收稿日期：2014-03-13本文编辑：李亚聪）

[基金项目] 广东省惠州市科技立项项目（2013Y216）

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0软件进行分析，计量资料以x±s表示，采用方差分析，两两比较采用LSD法，相关性分析采用单因素回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组大鼠脑组织功能及损伤面积的比较

脑损伤组的脑组织功能评分高于假手术组和法舒地尔组，脑组织损伤面积大于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表13组大鼠脑组织功能及损伤面积的比较（x±s）

与脑损伤组比较，*P＜0.05

2.2 3组大鼠血液炎症因子水平的比较

脑损伤组的IL-8、TNF-α水平高于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 3组大鼠血液炎症因子水平的比较（μg/L，x±s）

与脑损伤组比较，*P＜0.05

2.3 炎症因子水平与脑组织功能评分及脑组织损伤面积的相关性

IL-8、TNF-α水平与脑组织功能评分及损伤面积呈正相关（P＜0.05）（表3）。

表3 炎症因子水平与脑组织功能评分及脑组织损伤面积的相关性

3 讨论

近年来，缺血性脑损伤的临床发病率逐年升高，已成为危害人类生命安全和生存质量的重要疾病，具有致死率和致残率高、预后差的特点[6-7]。临床上，引起脑组织缺血性损害的疾病包括高血压、动脉粥样硬化、脑血管栓塞、痉挛等，可在造成脑血管狭窄、脑组织血管减少或中断的基础上引起神经功能损害[8]，并伴发头痛、呕吐、感觉和运动功能受损等临床症状及体征[9]。多数患者在疾病的发生、发展过程中，可持续存在脑组织的慢性低灌注损伤[10]，因此，针对该情况探寻有效的治疗方法，对临床治疗工作具有指导意义。

Rho激酶作为小G蛋白Rho下游的重要底物之一，能通过磷酸化的方式激活下游信号通路，并参与炎症细胞的黏附、迁移及炎症因子的合成和释放[11-12]。法舒地尔作为一种Rho激酶抑制剂，能通过抑制Rho激酶的生物学作用来发挥脑组织保护作用[13]。本研究通过建立大鼠脑组织慢性低灌注损伤模型并给予法舒地尔治疗，分析Rho激酶抑制剂对脑组织的保护作用。研究结果显示，脑损伤组的脑组织功能评分高于假手术组和法舒地尔组，脑组织损伤面积大于假手术组和法舒地尔组，说明模型老鼠建立成功，脑损伤组术后的脑组织功能下降、梗死面积增加；法舒地尔治疗能有效保护脑组织，改善术后脑组织功能，减小梗死面积。

目前研究认为，在脑组织慢性低灌注损伤过程中，炎症反应发挥了重要作用[14]。中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞向脑组织内大量募集并产生TNF-α及IL-1、IL-2、IL-6等炎症因子，直接介导脑组织损伤[15-16]。本研究结果显示，脑损伤组的IL-8、TNF-α水平高于假手术组和法舒地尔组，说明法舒地尔治疗能有效控制脑组织损伤后的炎症水平。

本研究结果显示，IL-8、TNF-α水平与脑组织功能评分、脑组织损伤面积呈正相关，说明炎症因子水平越高、脑组织损伤越严重，两者具有较好的相关性，也能反映法舒地尔可通过控制炎症反应水平来改善脑组织功能。

综上所述，Rho激酶抑制剂能控制炎症反应水平、改善慢性低灌注损伤的脑组织功能，具有积极的应用价值。

[参考文献]

[1]于宗良，陈乐，杨向军.缺血后适应联用粒细胞集落刺激因子对心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用[J].东南大学学报·医学版，2013，32（1）；51-55.

[2]杨坤军.急性脑梗死神经功能恶化的研究进展[J].医学综述，2010，16（20）；3098-3011.

[3]Longa EZ，Weinstein PR，Carlson S，et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J].Stroke，1989，20（1）：84-91.

[4]冯治国，何润源，侯玉立.法舒地尔治疗缺血性脑卒中的系统评价[J].中西医结合心脑血管病杂志，2012，10（4）：424-427.

[5]王建军.大肠癌血清肿瘤坏死因子α，白细胞介素8和可溶性白细胞介素2受体水平的检测及其临床意义[J].中国肿瘤临床与康复，2012，19（3）：241-243.

[6]涂献坤，杨卫忠，石松生.炎症反应介导缺血性脑损伤的机制研究进展[J].中华神经医学杂志，2011，10（3）：322-324.

[7]孙海蛟.法舒地尔配合电针疗法治疗急性缺血性脑血管病的临床观察[J].中国医学创新，2012，9（36）：137-138.

[8]Petrinovic MM，Duncan CS，Bourikas D，et al.Neuronal Nogo-A regulates neurite fasciculation,branching and extension in the developing nervous system[J].Development，2010， 137（15）：2539-2550.

[9]李双凤，王丹，王亚平，等.MPTP参与硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的延迟性保护作用[J].东南大学学报·医学版，2010，29（6）：648-651.

[10]王莉.奥扎格雷联合法舒地尔对短暂性脑缺血发作患者脑氧代谢及炎性指标的影响研究[J].吉林医学，2013， 34（19）：3770-3772.

[11]徐悦，汪健，邓晓玲，等.法舒地尔对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后HMGB1表达的影响[J].中国老年保健医学，2013，11（3）：23-25.

[12]Okada T，Teranishi K，Chen Y，et al.Reversal of postischemic hypoperfusion by tempol:endothelial signal transduction mechanism[J].Neurochem Res，2012，37（4）：680-688.

[13]范鹏涛.盐酸法舒地尔联合辛伐他汀治疗短暂性脑缺血发作疗效观察[J].中国社区医师·医学专业，2010，12（12）：26.

[14]Ishiquro M，Kawasaki K，Suzuki Y，et al.A Rho kinase(ROCK)inhibitor,fasudil,prevents matrix metalloproteinase-9-related hemorrhagic transformation in mice treated with tissue plasminogen activator[J].Neuroscience，2012， 220：302-312.

[15]梁燕，娄季宇，白宏英，等.法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注后Rho激酶、Nogo-A表达的影响[J].中国实用神经疾病杂志，2011，14（3）：27-29.

[16]陈美惠，刘安民，巢晓娟，等.Rho激酶抑制剂法舒地尔对中枢神经系统疾病作用及其结构改造的研究进展[J].中国新药杂志，2013，22（1）：59-67.

（收稿日期：2014-03-13本文编辑：李亚聪）

[基金项目] 广东省惠州市科技立项项目（2013Y216）

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0软件进行分析，计量资料以x±s表示，采用方差分析，两两比较采用LSD法，相关性分析采用单因素回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组大鼠脑组织功能及损伤面积的比较

脑损伤组的脑组织功能评分高于假手术组和法舒地尔组，脑组织损伤面积大于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表13组大鼠脑组织功能及损伤面积的比较（x±s）

与脑损伤组比较，*P＜0.05

2.2 3组大鼠血液炎症因子水平的比较

脑损伤组的IL-8、TNF-α水平高于假手术组和法舒地尔组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 3组大鼠血液炎症因子水平的比较（μg/L，x±s）

与脑损伤组比较，*P＜0.05

2.3 炎症因子水平与脑组织功能评分及脑组织损伤面积的相关性

IL-8、TNF-α水平与脑组织功能评分及损伤面积呈正相关（P＜0.05）（表3）。

表3 炎症因子水平与脑组织功能评分及脑组织损伤面积的相关性

3 讨论

近年来，缺血性脑损伤的临床发病率逐年升高，已成为危害人类生命安全和生存质量的重要疾病，具有致死率和致残率高、预后差的特点[6-7]。临床上，引起脑组织缺血性损害的疾病包括高血压、动脉粥样硬化、脑血管栓塞、痉挛等，可在造成脑血管狭窄、脑组织血管减少或中断的基础上引起神经功能损害[8]，并伴发头痛、呕吐、感觉和运动功能受损等临床症状及体征[9]。多数患者在疾病的发生、发展过程中，可持续存在脑组织的慢性低灌注损伤[10]，因此，针对该情况探寻有效的治疗方法，对临床治疗工作具有指导意义。

Rho激酶作为小G蛋白Rho下游的重要底物之一，能通过磷酸化的方式激活下游信号通路，并参与炎症细胞的黏附、迁移及炎症因子的合成和释放[11-12]。法舒地尔作为一种Rho激酶抑制剂，能通过抑制Rho激酶的生物学作用来发挥脑组织保护作用[13]。本研究通过建立大鼠脑组织慢性低灌注损伤模型并给予法舒地尔治疗，分析Rho激酶抑制剂对脑组织的保护作用。研究结果显示，脑损伤组的脑组织功能评分高于假手术组和法舒地尔组，脑组织损伤面积大于假手术组和法舒地尔组，说明模型老鼠建立成功，脑损伤组术后的脑组织功能下降、梗死面积增加；法舒地尔治疗能有效保护脑组织，改善术后脑组织功能，减小梗死面积。

目前研究认为，在脑组织慢性低灌注损伤过程中，炎症反应发挥了重要作用[14]。中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞向脑组织内大量募集并产生TNF-α及IL-1、IL-2、IL-6等炎症因子，直接介导脑组织损伤[15-16]。本研究结果显示，脑损伤组的IL-8、TNF-α水平高于假手术组和法舒地尔组，说明法舒地尔治疗能有效控制脑组织损伤后的炎症水平。

本研究结果显示，IL-8、TNF-α水平与脑组织功能评分、脑组织损伤面积呈正相关，说明炎症因子水平越高、脑组织损伤越严重，两者具有较好的相关性，也能反映法舒地尔可通过控制炎症反应水平来改善脑组织功能。

综上所述，Rho激酶抑制剂能控制炎症反应水平、改善慢性低灌注损伤的脑组织功能，具有积极的应用价值。

[参考文献]

[1]于宗良，陈乐，杨向军.缺血后适应联用粒细胞集落刺激因子对心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用[J].东南大学学报·医学版，2013，32（1）；51-55.

[2]杨坤军.急性脑梗死神经功能恶化的研究进展[J].医学综述，2010，16（20）；3098-3011.

[3]Longa EZ，Weinstein PR，Carlson S，et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats[J].Stroke，1989，20（1）：84-91.

[4]冯治国，何润源，侯玉立.法舒地尔治疗缺血性脑卒中的系统评价[J].中西医结合心脑血管病杂志，2012，10（4）：424-427.

[5]王建军.大肠癌血清肿瘤坏死因子α，白细胞介素8和可溶性白细胞介素2受体水平的检测及其临床意义[J].中国肿瘤临床与康复，2012，19（3）：241-243.

[6]涂献坤，杨卫忠，石松生.炎症反应介导缺血性脑损伤的机制研究进展[J].中华神经医学杂志，2011，10（3）：322-324.

[7]孙海蛟.法舒地尔配合电针疗法治疗急性缺血性脑血管病的临床观察[J].中国医学创新，2012，9（36）：137-138.

[8]Petrinovic MM，Duncan CS，Bourikas D，et al.Neuronal Nogo-A regulates neurite fasciculation,branching and extension in the developing nervous system[J].Development，2010， 137（15）：2539-2550.

[9]李双凤，王丹，王亚平，等.MPTP参与硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的延迟性保护作用[J].东南大学学报·医学版，2010，29（6）：648-651.

[10]王莉.奥扎格雷联合法舒地尔对短暂性脑缺血发作患者脑氧代谢及炎性指标的影响研究[J].吉林医学，2013， 34（19）：3770-3772.

[11]徐悦，汪健，邓晓玲，等.法舒地尔对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后HMGB1表达的影响[J].中国老年保健医学，2013，11（3）：23-25.

[12]Okada T，Teranishi K，Chen Y，et al.Reversal of postischemic hypoperfusion by tempol:endothelial signal transduction mechanism[J].Neurochem Res，2012，37（4）：680-688.

[13]范鹏涛.盐酸法舒地尔联合辛伐他汀治疗短暂性脑缺血发作疗效观察[J].中国社区医师·医学专业，2010，12（12）：26.

[14]Ishiquro M，Kawasaki K，Suzuki Y，et al.A Rho kinase(ROCK)inhibitor,fasudil,prevents matrix metalloproteinase-9-related hemorrhagic transformation in mice treated with tissue plasminogen activator[J].Neuroscience，2012， 220：302-312.

[15]梁燕，娄季宇，白宏英，等.法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注后Rho激酶、Nogo-A表达的影响[J].中国实用神经疾病杂志，2011，14（3）：27-29.

[16]陈美惠，刘安民，巢晓娟，等.Rho激酶抑制剂法舒地尔对中枢神经系统疾病作用及其结构改造的研究进展[J].中国新药杂志，2013，22（1）：59-67.

（收稿日期：2014-03-13本文编辑：李亚聪）

[基金项目] 广东省惠州市科技立项项目（2013Y216）