茶浸出液对牙釉质抗酸性的影响①

黎淑芳，陆海峰，邓敏，陈海波，邓文正

（1.右江民族医学院附属医院口腔科，广西 百色 533000 E－mail：bslishufang＠126.com；2.右江民族医学院化学教研室，广西 百色 533000；3.广西梧州市红十字会医院口腔科，广西 梧州 543002）

茶是世界三大无酒精饮料之一，含有氟及Ca、Zn、Cu、Al、Fe、Hg、Mn、Ni等多种金属离子。茶具有防龋作用，目前认为茶中防龋的有效成分主要是氟和茶多酚。研究发现，氟离子浓度较低时，氟离子与羟磷灰石发生置换反应，形成氟磷灰石，增强其抗酸性［1］。在过往的研究中，茶叶中茶多酚的防龋作用有较多相关报道［2－3］，关于茶叶对牙釉质的抗酸作用报道较少。本研究拟通过茶浸出液浸泡牙釉质块后进行脱矿实验，观察茶浸出液对牙釉质抗酸性的效果，为进一步分析茶防龋机制提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 茶浸出液的制备及氟含量的测定 选取广西凌云白毫茶（绿茶，一级凌螺春），按照人们饮茶习惯，取经80℃烘4h的茶叶1g，加入100ml 90℃的蒸馏水于90℃恒温水浴中保温10 min，冷却后过滤即得茶浸出液。采用氟离子选择电极法测定氟含量，氟离子浓度为1.5mg／L。

1.2 牙釉质标本的选择和制备 选择新鲜拔除的牛切牙，分离冠根，去除根部及软组织，用氧化铝糊剂除去表面有机污染物，冠部超声清洗，经显微镜下观察无裂痕、缺隙。用高速硬组织切割机将牙冠切成长6mm、宽6mm、厚2mm大小的釉质块，颊面釉质留4mm×4mm试验开窗区，其余部分涂防酸指甲油两遍，待防酸指甲油干燥后，置于去离子水中，4℃保存备用。

1.3 氟化物的配制 NaF分析纯加蒸馏水配制与茶浸出液相同浓度的氟化钠溶液（1.5mg／L）。

1.4 脱矿液的制备［4］2.2mmo l／L CaCl2，2.2mmol／L NaH2PO4，0.05mmol／L CH3CHOOH，用 NaOH 校正，pH＝4.0。

1.5 实验分组及处理 将预备好的45个牙釉质块随机分为3组，每组15个牙块。①茶浸出液组；②浓度为1.5mg／L的氟化钠溶液；③对照组：去离子水。将分组的牙块分别浸泡于10 ml的茶浸出液、氟化钠溶液及去离子水中。浸泡是间断性的，每浸泡5min，取出1min，再浸泡5min。浸泡完成10次后，用蒸馏水清洗5次。将茶浸出液、氟化钠及对照组3组釉质块标本分别置于人工脱矿液10ml中浸泡72h，取培养液1ml，置于Roche生化分析仪，应用邻甲酚络合酮法测定钙的浓度，磷钼酸法测定磷的浓度。

1.6 统计学分析 采用SPSS 15.0软件包中的单因素方差分析及SNK检验对脱矿液中钙、磷溶出值进行分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 脱矿液中牙釉质块钙、磷的溶出情况 经脱矿液浸泡的牙釉质开窗区，肉眼可见白色区域。脱矿液中茶浸出液组钙、磷溶出浓度最小，对照组钙、磷溶出浓度最大，3组脱矿液钙、磷溶出量差异有统计学意义（P＜0.05）。结果见表1。

表1 脱矿液中牙釉质块钙、磷的溶出情况（，mmol／L）

表1 脱矿液中牙釉质块钙、磷的溶出情况（，mmol／L）

注：三组间钙含量比较，F ＝13.45，P ＜0.05；磷溶出量比较，F ＝19.92，P ＜0.05，三组间钙、磷溶出量不全相等，再经SNK行两两检验得各组间的差异均有统计学意义（P＜0.05）

组别 n 釉质钙溶出量 釉质磷溶出量茶浸出液组 151.384±0.126 1.304±0.174氟化钠溶液组 151.521±0.114 1.498±0.163对照组 151.708±0.2711.725±0.181

3 讨论

茶作为防龋药物，氟为主要的有效成分之一。但由于产地和采摘时间不同，氟的含量会有所不同。本实验对所选用的广西凌云白毫茶（绿茶，一级凌螺春）进行氟含量的测定，测得氟离子浓度1.5mg／L。然而，茶叶中成分复杂，除黄酮类抗氧化物质、茶多酚、氟等主要成分外还有鞣酸及Ca、Zn、Cu等多种成分。本实验通过对茶浸出液与单一氟化物对牙釉质抗酸性的比对，以初步探讨茶叶中其他成分与氟在对牙釉质抗酸蚀过程中是否存在协同关系。

本实验结果显示，茶浸出液组及氟化物组牙釉质钙磷溶出量均比去离子水对照组少（P＜0.05），该结果与氟离子的存在有关。牙釉质的主要成分是羟磷灰石，氟离子可以与羟磷灰石发生置换反应，形成氟磷灰石，沉淀于釉质表层和表层下，增加釉质的硬度，阻止矿物离子的流失，减轻釉质中钙、磷的溶出。当酸攻击釉质时，釉质表面沉积的氟化钙颗粒能够中和酸，缓冲釉质界面pH，成为酸攻击时的暂时屏障［5］，从而增加釉质对酸的抵抗力，抑制釉质脱矿，降低脱矿的速度［6］。

实验中发现含氟量相同的茶浸出液与氟化物对抑制钙磷溶出差异有统计学意义（P＜0.05），茶浸出液对牙釉质的抗酸性较强。推测这一结果与茶叶中的其他成分有关。有研究指出，鞣酸可与蛋白和Ca2＋、Zn2＋等离子反应形成不可溶性复合物而影响其生物活性［7］，与釉质有机质和钙结合形成复合物，阻塞釉质的超微孔隙，从而降低釉质的通透性［8］。茶浸出液对脱矿实验过程中Ca2＋、PO3－4的溶出显著抑制作用可能与茶叶中鞣酸凝固釉质蛋白和抑制蛋白分解的作用有关。另一方面，茶叶中还含有钙、铁等微量元素，这些元素均具有参与牙齿再矿化的能力。最近研究发现铁离子能干扰酸性物质对牙釉质的腐蚀作用，铁和氟能影响碳酸饮料对牙釉质粉末的溶出度［9］。釉质脱矿及再矿化是在一个组成与结构复杂且不断变化的环境中进行的，其过程不是单纯的钙盐溶解及沉积过程，但Ca2＋、和PO3－4的溶出与晶体的溶解、龋损的形成有直接关系。本实验发现茶浸液能够显著性抑制脱矿过程中Ca2＋、和PO3－4的溶出，表明了茶叶对龋病的进展具有抑制作用。但由于茶叶中含有多种成分，其活性成分的追踪分析及其对牙釉质抗酸性的影响有待进一步研究。

［1]李玲.氟化物的防龋作用［J］.牙体牙髓牙周病学杂志，2001（11）：123.

［2]徐芃，刘东成.茶多酚抗氧化和抑菌机制的研究［J］.中国医药导报，2008，5（23）：21－22.

［3]肖悦，刘天佳，黄正蔚，等.茶多酚对口腔细菌致龋力影响的实验研究［J］.广东牙病防治，2002，10（1）：4－6.

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［6]李黎.氟元素与正畸治疗中牙釉质脱矿的关系探讨［J］.微量元素与健康研究，2001，18（3）：79－82.

［7]Reddy MB，Love M.The impact of food processing on the nutritional quality of vitamins and minerals［J］.Adv Exp Med Biol，1999，459：99－106.

［8]李伟丽，唐荣银，陈强，等.五倍子对实验性釉质龋形成过程中Ca、P溶出的影响［J］.牙体牙髓牙周病学杂志，2004，14（6）：326－329.

［9]吕学超，刘英群，李春梅，等.铁、氟联合抑制3种碳酸饮料对牙釉质粉末溶解作用的实验研究［J］.口腔医学研究，2009，25（2）：146－148.