红阳猕猴桃中VC含量测定方法研究

魏明英

（四川工商职业技术学院，四川都江堰611830）

红阳猕猴桃中VC含量测定方法研究

魏明英

（四川工商职业技术学院，四川都江堰611830）

采用2，6－二氯靛酚法和高效液相色谱法对红阳猕猴桃中VC含量的测定进行了研究。结果表明2，6－二氯靛酚法测定VC时滴定终点难以准确判断；高效液相色谱法对VC的测定精密度高，但准确度低。

红阳猕猴桃；VC；高效液相色谱法；2，6－二氯靛酚法

红阳猕猴桃是世界珍惜猕猴桃品种，其果实子房鲜红色，果肉呈黄绿色，横切面呈红、黄、绿相间图案，极为美观，具有刺激食欲的价值[1-2]；营养丰富，品质优良；肉质细嫩，汁多味浓，纯甜浓香，常食红阳猕猴桃有防癌抗癌排毒养颜等保健功效。红阳猕猴桃鲜食、加工均可，是加工工艺菜肴的上等原料，也是酿制高档果酒、果醋，生产果汁和其他休闲食品的绝佳原料。目前，红阳猕猴桃的消费以贮藏鲜食为主，果酒、果片、果汁饮料的消费量也日益增大。VC含量丰富是红阳猕猴桃的特色之一，对红阳猕猴桃VC含量的测定方法还少有报道。本研究采用2，6－二氯靛酚法和高效液相色谱法对红阳猕猴桃VC含量的进行测定，以得到更准确的测定方法，为这种特色果品的研究、加工和贮藏提供有用的资料。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

红阳猕猴桃：由成都青牛农业有限公司提供；甲醇，色谱纯；磷酸，分析纯；还原性VC分析纯；其余试验所用试剂均为分析纯。

TB-215D型精密电子天平：北京赛多利斯仪器系统有限公司提供；1100型高效液相色谱仪配紫外检测器：安捷伦科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 2，6－二氯靛酚法测定还原性VC

2，6－二氯靛酚法样品预处理方法：称取200 g红阳猕猴桃加200mL浓度1%的草酸溶液，倒入捣碎机中打成浆，取20 g匀浆倒入100mL容量瓶中，用浓度1%草酸溶液稀释定容，混匀，加入白陶土10 g混匀，进行脱色，过滤，弃去初滤液，收集滤液以2，6－二氯靛酚法测定还原性VC含量[3]。

1.2.2 高效液相色谱法[4-6]

色谱条件：色谱柱，ODSC18250mm×4.6mm×5μm，紫外检测器波长设定为240 nm，流动相为浓度为pH 3.0，体积分数30%甲醇溶液，用磷酸调节pH，流速为1.0mL/min，柱温25℃；进样量25μL。

VC标准溶液配制：称取VC标准样品0.1 g，用浓度0.001mol/L的盐酸溶液溶解，并定容至100mL，此时VC的质量浓度为1.0mg/mL，过滤脱气后，备用。

标准VC系列溶液配制：取质量浓度为1.0mg/mL的标准溶液用浓度0.001mol/L盐酸溶液分别稀释成质量浓度为10、20、30、40、50μg/mL的系列溶液，过滤脱气后，备用。

样品处理：准确称取一定量样品，加入0.001mol/L盐酸溶液，捣碎，离心，取上清液，经0.45μm滤膜过滤后，按上述色谱条件进样25μL，平行测定5次，以外标法定量。

2 试验结果

2.1 2，6－二氯靛酚法测定还原性VC

还原性VC提取液颜色为红色，以白陶土脱色后，颜色仍为淡粉红色，其颜色与2，6－二氯靛酚法滴定终点的粉红色无显著差异，实验人员难以判断滴定终点，因此该方法未得到红阳猕猴桃还原性VC的含量。

2.2 高效液相色谱法测定红阳猕猴桃还原性VC含量

2.2.1 色谱分析条件选择

试验结果表明，用紫外检测器，波长为240 nm；以pH3.0、体积分数为30%的甲醇溶液为流动相，获得的还原性VC标准样品色谱图效果较其余流动相效果好；以浓度0.001mol/L的盐酸为溶剂，质量浓度50μg/mL还原性VC样标色谱见如图1，红阳猕猴桃VC高效液相色谱见图2。

图1 50μg/m L的VC标样色谱Fig.1 Chromatogram of VC

图2 红阳猕猴桃VC高效液相色谱图Fig.2 Chromatogram of thesam ple

2.2.2 标准曲线制作

取质量浓度为10、20、30、40、50μg/mL的系列标准溶液，分别进样25μL液相色谱仪，测定标准吸收曲线。标准系列溶液浓度对峰面积结果见表1，高效液相色谱法VC的标准曲线见图3。

表1 标准系列溶液质量浓度对峰面积结果Tab le1 Resultof standard curveof VCby HPLC

2.2.3 红阳猕猴桃VC测定

将红阳猕猴桃VC提取液按上述色谱条件进样25μL，平行测定6次，以外标法定量。红阳猕猴桃VC测定结果见表2。

图3 VC的标准吸收曲线Fig.3 The standard curveof VCby HPLC

表2 红阳猕猴桃VC测定结果Table2 Resu ltof determ ination of VCin red sun kiw ifruits

2.2.4 红阳猕猴桃VC回收率测定

红阳猕猴桃VC高效液相色谱法回收率试验结果见表3。

表3 红阳猕猴桃VC高效液相色谱法回收率试验结果Table3 Resultof recovery test

从回收率可以看出，高效液相色谱法测定VC时回收率较低。

3 结论

本试验分别采用了2，6－二氯靛酚法和高效液相色谱法测量红阳猕猴桃的VC含量，结果表明，2，6－二氯靛酚法因红阳猕猴桃VC提取液颜色为粉红色，采用白陶土对提取液进行脱色处理后，提取液颜色仍为浅粉红色，导致样品提取液颜色和滴定终点颜色难以区分，使滴定终点难以准确判断；高效液相色谱法测定红阳猕猴桃VC的结果是精密度高，但是回收率低。分析原因，由于红阳猕猴桃是浆果，预处理超滤时速度极慢，与空气接触时间长，导致VC损失率高，使测定结果偏差大了。2，6－二氯靛酚法和高效液相色谱法在测定红阳猕猴VC时都部分受限，无法准确测定出VC的含量，但高效液相色谱法所得VC的测定条件能较准确的测定非浆果类原料的VC。根据红阳猕猴桃在采用2，6－二氯靛酚法和高效液相色谱法中呈现出的现象，可推测红阳猕猴桃VC采用荧光分光光度法能较准确地测定含量。

[1]吕岩.红阳猕猴桃主要特点[J].西北园艺,2001(3):37-38

[2]珍惜品种—红阳猕猴桃[J].世界农业,2003(2):52

[3]朱克永.食品检测技术理化检验感官检验技术[M].北京:科学出版社,2011

[4]张秀梅.高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C含量[J].福建果树,2007,140(1):20-22

[5]黄力,张宝川.HPLC法测定多维片中的水溶性维生素[J].中国药事,2007,21(4):255-257

[6]王爱月,张向兵,李发生.高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素C含量的研究[J].中国卫生检验杂志,2006,16(10):1175-1176

Determ ination of VCin Red Sun Kiw ifruit by HPLC and M ethylene Chloride Indigo Phenolic Spectrometry

WEIMing-ying

（College of Sichuan Technology and Business，Dujiangyan 611830，Sichuan，China）

Determination of VCin red sun kiwifruit by HPLC and methylene chloride Indigo phenolic spectrometry.The resultshowed thatend-pointof titration is difficult to be judge，bymethylene chloride Indigo phenolic spectrometry.The project team can't obtain The accurate result.The precision of HPLC is high，but accuracy isLow.

red sun kiwifruit；VC；HPLC；methylene chloride Indigo phenolic spectrometry

2014-03-17

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.23.031

魏明英（1979—），女（汉），副教授，硕士研究生，研究方向：农产品加工及贮藏工程。