新疆维吾尔族妇女宫颈癌中HPV16/18的表达及临床意义

李文婷， 王 莹， 赵 峰

(新疆医科大学附属肿瘤医院1病理科， 2医务部, 乌鲁木齐 830011)

宫颈癌(cervical carcinoma, CC)是危害女性健康和生命的常见恶性肿瘤之一。其中鳞状细胞癌(简称鳞癌)占宫颈癌的90%以上[1]。新疆维吾尔族(维族)妇女是宫颈鳞癌的高发人群。和所有恶性肿瘤一样，宫颈癌的发生、发展也是一个多因素、多步骤的过程。研究证实，高危型人类乳头状瘤病毒(human papilloma virus, HPV)16/18是导致宫颈癌发生的主要病因之一[2]。本研究采用原位杂交(In situ hybridization, ISH)方法检测宫颈癌中HPV16/18的表达情况，进一步探讨其与宫颈癌的临床病理特征的关系，为宫颈癌的诊断、治疗及预后判断提供一定的依据。

1 材料与方法

1.1标本随机选取并整理新疆医科大学附属肿瘤医院病理科2010-2012年50例维族妇女宫颈癌手术切除石蜡包埋组织及其临床病理资料，所有病例经核实患者无重复，年龄、病理诊断等临床病理资料完整。50例宫颈鳞癌均经HE染色切片，进行组织学观察和复诊。所有病例均为宫颈浸润性鳞癌，年龄24～72岁，肿瘤最大径0.5～6.8 cm；已绝经22例，未绝经28例，伴有CINⅢ级(cervical intraepithelial neoplasia)26例，不伴有CINⅢ级 24例；高-中分化30例，低分化20例；FIGO分期中Ⅰ期32例，Ⅱ期18例，淋巴结转移7例，无淋巴结转移43例。术前均未进行放化疗。

1.2方法取组织蜡块4 μm厚切片，HPV16/18原位杂交检测试剂盒(产品编号：ISH-5126)购自北京中杉公司。实验步骤按试剂盒说明进行。每组实验均设置阳性对照及阴性对照。以PBS代替一抗为阴性对照，以已知阳性切片作为阳性对照。HPV定位于宫颈鳞癌细胞核，呈棕黄色细颗粒，阳性细胞数≥10%为阳性。

1.3统计学处理采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行处理，率的比较采用χ2检验，P<0.05为有差异统计学意义。

2 结果

2.1HPV16/18在宫颈癌中的表达HPV16/18在宫颈癌中的阳性表达率为72%(36/50)；HPV16/18表达在宫颈鳞癌组织的细胞核，呈棕黄色细颗粒(图1)，肿瘤间质不着色。

图1 HPV16/18在宫颈癌中的表达(×400)

2.2HPV16/18表达与宫颈癌临床病理特征的关系HPV16/18表达在是否伴发CINⅢ级及不同FIGO分期各组中的差异有统计学意义(P<0.05)，HPV16/18表达在临床表现、是否绝经、肿瘤大小、分化程度及有无淋巴结转移各组中的差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 HPV16/18表达与宫颈癌临床病理特征的关系/例(%)

3 讨论

宫颈癌是威胁女性健康和生命的主要疾病之一。新疆为多民族聚居地区，其中维族与汉族人口比例相当。王东存等[3]报道新疆医科大学附属肿瘤医院收治的宫颈癌患者中，维吾尔族女性占75%以上，近年来呈现出年轻化趋势。

HPV是小分子DNA病毒，可分为高危型和低危型。高危型HPV如 HPV16/18是公认的引起宫颈癌发生发展的重要病因之一，HPV16/18病毒的E6/E7蛋白可通过中和抑癌基因如p53、pRb等对细胞周期的负性调控作用，丧失自我修复及凋亡的功能，使细胞持续增殖，从而导致肿瘤的发生发展。

本研究中HPV16/18在宫颈癌中的阳性表达率为72%(36/50)，这种高表达和Vega等[4]的结果相符，再一次证实了高危型HPV16/18在宫颈癌发生、发展中发挥着重要作用。原位杂交技术也是目前大多数病理科开展的项目之一，具有操作简便、可重复性高、特异性较好等优点。采用原位杂交技术进行HPV16/18在宫颈癌中的检测，可为临床宫颈癌早期筛查、早期诊断提供一定的参考依据。

HPV16/18表达在是否伴发CIN分组中差异有统计学意义(P<0.05)，这与陈宝莲等[5]报道的CIN患者也可检出HPV16/18有关，可推测从HPV病毒感染，引起CIN至最终发生浸润性癌是一个渐进的过程。但并非所有的CIN都会进展为浸润癌，大多数CIN病变可能长期无进展或自行消退，仅有部分CINⅢ级，尤其是伴有累及腺体的病变进展为浸润性鳞癌的可能性最大。因此，对CIN患者进行HPV16/18检测，有助于宫颈癌前病变的早期诊断，并进行一定的临床干预[6]，从而避免发展为浸润性癌。HPV16/18的表达在不同FIGO分期各组中存在差异，也提示了HPV16/18在宫颈癌的进展过程中存在一定的参考价值。

宫颈癌临床多表现为接触性出血、不规则阴道出血及阴道排液等，近年来，发病年龄也呈现年轻化趋势，而绝经前后宫颈癌患者的治疗选择有很大的不同。本研究中，HPV16/18表达在临床表现、是否绝经、肿瘤大小、分化程度及有无淋巴结转移各组中的差异均无统计学意义(P>0.05)，说明HPV感染可能只是宫颈癌发生发展的始动因素之一，还有很多其他因素共同作用，导致宫颈癌的发生发展[7]。

综上所述，HPV16/18在宫颈癌的发生、发展中起重要作用，与伴发CINⅢ级及FIGO分期有关，可作为早期诊断、临床分期及预后判断的依据之一。

参考文献：

[1] Wentzensen N, sherman ME, Schiffman M, et al. Utility of methylation markers in cervical cancer early detection: appraisal of the tate-of-the-science[J]. Gynecol Oncol, 2009, 112(2):291-293.

[2] Negri G, Bellisano G, Zannoni GF, et al. p16ink4a and HPV L1 immunohistochemistry is helpful for estimating the behavior of lowgrade dysplastie lesions of the cervix uteri[J]. Am J Surg Pathol, 2008, 32(11):1715-1720.

[3] 王东存, 叶明, 王莉. 子宫颈上皮病变18304例临床病理分析[J]. 临床与实验病理学杂志, 2010, 26(6):692-695.

[4] Vega PA, Illades AB, Flores AE, et al. Risk of progression of early cervical lesions is associated with integration and persistence of HPV-16 and expression of E6, Ki-67, and telomerase [J]. J Cytol, 2013, 30(4):226-232.

[5] 陈宝莲. HPV-DNA检测筛查宫颈癌价值探讨[J]. 重庆医学, 2009, 38(7):854-856．

[6] Yang HP, Zuna RE, Schiffman M, et al. Clinical and pathological heterogeneity of cervical intraepithelial neoplasia grade 3[J].PloS One, 2012, 7 (1):1-10.

[7] Badaracco G, Savarese A, Micheli A, et al. Persistence of HPV after radio-chemotherapy in locally advanced cervical cancer[J]. Oncol Rep, 2010, 23(4):1093-1095.