反相HPLC 法测定酸梨干中山梨醇的含量

杨沫银 宋广莹 韩塔娜

(1.内蒙古食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特 010020； 2.内蒙古商贸职业学院，内蒙古 呼和浩特 010020)

酸梨干作为蒙药“阿格力格-阿力玛”(别名: 花盖梨、山梨、野梨)。原植物名: 秋子梨，为蔷薇科植物花盖梨Pyrus ussuriensis Maxim 的干燥成熟果实。祛“巴达干”热、止泻。用于“巴达干宝日”病、耳病、烧心、泛酸［1］。乔木高10 ～15m，树皮粗糙，暗灰色，枝黄灰色或褐色，常有刺，无毛;芽宽卵形，有数片褐色鳞片，鳞片边缘稍被毛。叶片近圆形、宽卵形或卵形，长3 ～7cm，宽2.5 ～5cm，先端长尾状渐尖，或锐尖，基部圆形或近心形，边缘具刺芒的尖锐锯齿，两面近无毛，或幼嫩时稍被毛;叶柄长2 ～5cm，稍被毛，托叶条状披针形，早落。伞房花序有花5 ～7 朵;花梗长1 ～2cm，近无毛，花直径2.5 ～3.5cm;萼片三角状披针形，外面无毛，里面密被绒毛;花瓣倒卵形，长约1.8cm，宽1 ～1.2cm，基部有短抓，白色;雄蕊20，短于花瓣，花药紫色;花柱5，离生，长于雄蕊，近基部有稀疏柔。果实近球形，直径2～5cm，黄色或绿黄色，有褐色斑点，果肉含多数石细胞，味酸甜，经后熟果肉变软，有香气;果梗粗短，长1 ～2cm，花萼宿存。花期5 月，果熟期9 ～10 月。

酸梨干含有可溶性糖主要由果糖、葡萄糖、蔗糖和山梨醇组成，果实有机酸的组分包括苹果酸、柠檬酸、奎尼酸、莽草酸和草酸［2］，本研究建立了其有效成分山梨醇的HPLC含量测定方法。

1 仪器与试剂

日本岛津LC-20 泵，CBM-20A 型控制器，岛津RID-10A 型示差检测器，LCsolution 色谱工作站。山梨醇对照品: 美国(批号: 47841 LB78111)。水为离子交换高纯水。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件: 色谱柱: 磺化交联的苯乙烯二乙烯基苯共聚物为填充剂的强阳离子钙型交换柱(赛分Carbomix Ca-NP 7.8 ×300mm、安捷伦Hi-Plex Ca 7.8 ×300mm);流动相: 水;柱温: 85℃;流速1.0mL·min-1。

2.2 对照品溶液的制备: 精密称取山梨醇对照品适量，加水制成每1mL 各含2.5mg 的溶液，即得。

2.3 供试品溶液制备: 供试品溶液的制备: 取本品粉末(过三号筛)约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入水20mL，密塞，称定重量，分别超声处理(功率为400W，频率为40KHz)20min，取出，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，离心(5000 转/min，10min)，上清液用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.4 专属性考察: 精密吸取水空白溶剂，山梨醇对照品溶液，供试品溶液各10μL 注入液相色谱仪。供试品溶液中色谱峰保留时间与山梨醇对照品一致，且水空白溶剂无吸收。表明该含量测定方法专属性好，空白溶剂无干扰。(色谱图见图1、2、3)

2.5 线性关系考察: 取山梨醇对照品5.334mg 置2mL 量瓶中加水使溶解，并稀释至刻度，摇匀(山梨醇2.667mg /mL、)，分别取2、5、10、15、20、25、30、35、40L 进样，按上述色谱条件进行测定，以峰面积对进样量进行回归分析，结果山梨醇在5.334μg ～106.68μg 范围内分别呈良好的线性关系。回归方程为Y=11396X -2958.4，r =0.9999。结果表明，山梨醇在5.334g ～106.68g 范围内与峰面积积分值呈良好的线形关系。

2.6 稳定性试验: 取同一供试品溶液，分别于0h、2h、4h、6h、8h、12h、16h、24h 进行测定，RSD 为0.71%。

2.7 精密度试验: 取同一供试品6 份，各取约2.0g，精密称定，分别按上述供试品溶液的制备和色谱条件进行测定，进样量各10μL，RSD 为0.75%。

2.8 回收率试验: 取同一批已知含量供试品(含量23.187mg/g)6 份，各约0.5g，精密称定，再分别依次精密加入山梨醇对照品11.5mg;再取供试品6 份，各约2.0g，精密称定，再分别依次精密加入山梨醇对照品46mg，分别按准确度试验方法操作，计算回收率及高低浓度点6 份样品的RSD%，结果见表1、2。

表1 山梨醇回收率试验结果表(低浓度)

表2 山梨醇回收率试验结果表(高浓度)

2.9 样品测定: 取本品粉末按上述方法处理并测定，不同产地(赤峰林东罕山、赤峰白塔子)的4 批样品的测定山梨醇含量(按干燥品计算)计算，结果分别为2.38%;2.50%;5.83%;6.10%。

3 小 结

从上述实验结果中可以看出，该实验方法所测定的酸梨干中山梨醇有效成分的分离效果好，结果稳定，可以用于酸梨干中山梨醇成分的测定方法。

［1］卫生部药典委员会. 卫生部药品标准. 蒙药分册［S］.1998.203.

［2］姚改芳，等.10 个不同系统梨品种的可溶性糖与有机酸组分含量分析［J］.南京农业大学学报，2011，34(5) ：25-31.

［3］国家药典委员会.中华人民共和国药典( 一部) ［S］.北京：中国医药科技出版社，2010