陈妙婵,蔡葵
(佛山市第一人民医院输血科,广东佛山528000)
·论著·
意外抗体筛查检出抗“Mur”抗体的临床意义
陈妙婵,蔡葵
(佛山市第一人民医院输血科,广东佛山528000)
目的 通过对“Mur”抗原的制备研究,探讨意外抗体筛查检出抗“Mur”抗体的临床意义,为临床选择合适的血液,预防输血反应,确保有效输血及输血安全。方法首先用含Mur抗原谱细胞筛查出抗“Mur”抗体,然后用该抗“Mur”抗体制备“Mur”抗原作为4号筛查细胞,用于输血前的意外抗体筛查。结果8 200例抗体筛查中抗“Mur”抗体阳性68例,阳性率为0.83%。该68例患者中,33例有反复输血史,26例有妊娠史,由于产生意外抗体而引起疑难配血者38例。结论意外抗体筛查检出抗“Mur”抗体能有效提高临床输血安全,具有重要的临床价值。
筛查;意外抗体;“Mur”抗原;抗“Mur”抗体
输血前意外抗体筛查是临床有效输血的保障[1],目前国内商品生产的意外抗体筛查的三种谱细胞普遍缺乏对低频抗体抗“Mur”的筛检。据有关文献报道,Mur血型抗原在西方人群中为低频抗原,大部份人群中抗原频率为0.1%,但在热带东南亚地区却有比较高的分布频率,在亚洲地区患者当中,同种异体抗-Mur产生的频率比较高。在我国南方人中Mur抗原频率为2.07%;上海地区频率为0.84%,均明显高于白种人的<0.1%与黑种人的<0.1%[2]。抗“Mur”多为免疫产生的抗体,可以引起严重的溶血性输血反应[3],因此,检出抗“Mur”抗体在我国特别是南方地区的临床输血安全有重要的临床意义。我院输血科在实际工作中尝试应用自制“Mur”抗原联合商品筛查谱细胞,探讨意外抗体筛查检出抗“Mur”抗体的临床意义,现报道如下:
1.1 标本采集2013年1~12月我院8 200例输血病人均按规定进行输血前意外抗体筛查。
1.2 主要检测试剂与仪器上海血液生物责任公司生产提供的三种抗体筛选细胞(不含Mur抗原),上海血液生物责任公司生产提供的十种谱细胞(含Mur抗原)见表1,强生公司生产的微珠抗人球卡和ORTHOAUTOVUE全自动血型分析仪。
1.3 检测方法首先用含Mur抗原的十种谱细胞筛查出抗“Mur”抗体,然后用该抗“Mur”抗体制备“Mur”抗原作为4号筛查细胞,联合三种抗体筛选细胞用于输血前的意外抗体筛查,见表2。
1.3.1 抗“Mur”抗体的制备选取我院HIV抗体、梅毒、丙肝抗体、乙肝抗原检测阴性,自身抗体阴性的病人血清,上海血液生物责任公司生产的含Mur抗原十种谱细胞进行抗“Mur”抗体检测,然后选取抗体滴度>1:128的血清制备成抗“Mur”抗体血清。
1.3.2 4号筛查细胞(“Mur抗原”)的制备用抗“Mur”抗体血清对“O”型健康献血员的红细胞进行筛选,取抗原抗体反应超过3+的红细胞作为4号筛查细胞,联合三种抗体筛选细胞对我院输血病人进行输血前的意外抗体筛查,阳性者再用上海血液生物责任公司生产的十种谱细胞(含“Mur抗原”)进行抗体确认,同时用试管法做盐水法和低离子凝聚胺法进行对照实验。
1.3.3 4号筛查细胞的保存取4号筛查细胞按1 ml加400 μ l的SAGM红细胞保存液的比例配置,放于4℃冰箱内保存,保存期限为筛选出的“O”型健康献血者原血袋的有效期内。应用时先摇匀4号筛查细胞,取5 ml的Bliss液加50µl 4号筛查细胞配制成浓度为0.8%的悬液,制备成4号筛查细胞联合三种抗体筛选细胞对病人进行输血前的意外抗体筛查。
1.3.4 意外抗体筛查向微珠抗人球卡加入用Bliss液配制成浓度为0.8%的四种筛查细胞50µl,然后加患者血清50 μl,用孵育仪37℃孵育15 min后,专用卡式离心机1 050 r/min离心5 min,肉眼判断结果,红细胞沉于底部者为阴性,悬浮于微珠表面或中断者为阳性。同时作对照试验:用患者自身血清加自身红细胞做自身对照,以排除自身抗体造成的假阳性干扰,若自身抗体为阳性者的血清,用自身红细胞吸收自身血清直至自身抗体阴性,然后再做意外抗体筛查。
8 200例进行输血前意外抗体筛查的患者当中,68例为单一4号筛查细胞阳性,4例自身抗体阳性,经自身红细胞吸收试验后再做意外抗体筛查为阴性,4号筛查细胞联合其他筛查细胞阳性者5例。经上海血液生物责任公司生产提供的十种谱细胞(含Mur抗原)进行抗体鉴定,68例患者血清均符合抗“Mur”抗体反应格局,4号筛查细胞联合其他筛查细胞阳性者5例患者血清,经鉴定3例为抗-E抗体,1例为抗-Ce抗体,1例为抗-s抗体。68例患者血清与红细胞分别用盐水法和抗人球法进行对照实验,其中29例盐水法和抗人球法均阳性,39例仅为抗人球法阳性,表明29例患者抗“Mur”抗体含IgM型抗体,见表1、表2。
表1 十种谱细胞(含Mur抗原)反应格局
表2 三种谱细胞加4号筛查细胞反应格局
8 200例输血前意外抗体筛查的患者中抗“Mur”抗体阳性68例,阳性率为0.83%,以IgG型抗体为主。在68例抗“Mur”抗体阳性的患者中,33例有反复输血史,26例有妊娠史,由于意外抗体而引起疑难配血的有38例。
本文应用自制4号筛查细胞联合另外三种筛查细胞,对我院8 200例患者进行输血前意外抗体筛查,再用含Mur抗原的谱细胞进行抗体鉴定,68例单一4号筛查细胞阳性鉴定为抗“Mur”抗体,4号筛查细胞联合其他筛查细胞阳性5例,经抗体鉴定3例为抗-E抗体,1例为抗-Ce抗体,1例为抗-s抗体,结果符合率达93%。8 200例意外抗体筛查抗“Mur”抗体68例,阳性率为0.83%。
由于反复输血容易产生意外抗体而引起迟发性溶血性输血反应,由于反复妊娠会导致流产和新生儿溶血病。输血前进行意外抗体筛查是输血安全的重要手段。《临床输血技术规范》第十七条规定输血前必须做意外抗体筛查,因此,输血前筛查出患者是否存在血型意外抗体非常重要。在中国人群中红细胞血型意外抗体出现最多的是Rh血型系统,其次就是Miltenberger血型系统[4]。研究显示,“Mur”抗原在亚洲人群中具有较高的分布频率(5%~10%),泰国人为9.7%,我国香港和台湾地区人群分别为6.28%和7.3%[5],邓诗桢等报道番禺地区抗-“Mur”频率为0.21%[6],说明“Mur”抗原有较高的分布频率,抗-“Mur”发生率也有较高的比例,因此“Mur”抗原对于我国的临床输血有一定的临床意义,应当并已经越来越受到临床的重视。因此,在输血前筛查项目中增加Miltenberger血型系统抗体对中国人群是十分必要的。
我院68例抗“Mur”抗体阳性的患者中,其中33例有反复输血史,26例有妊娠史,由于产生意外抗体而引起疑难配血的有38例。由此可见意外抗体筛查检出抗“Mur”抗体,能有效提高临床输血安全,具有重要的临床价值。但由于实验条件制约,自制筛查细胞的其他抗原存在不确定性,只能作为输血相容性实验检测的借鉴与筛检,不能作为确证试验,目前在符合国家要求,可检出低频抗“Mur”抗体的商品化筛查细胞试剂推出市场前,能有效筛检出我院输血患者的抗“Mur”意外抗体,暂时弥补目前国内意外抗体筛查细胞的不足,为日后推出包含“Mur”抗原的商品化筛查谱细胞生产,提供有价值临床参考数据。
[1]于笑难,周雪莹,兰炯采.输血前3项试验在疑难配血工作中的应用[J].中国输血杂志,2013,26(1):5-6.
[2]黄秀琼,陈丽琼,钮荣祥,等.云南怒族稀有血型MNSs系统-(Mur)抗原抽样调查分析[J].大理学院商报,2004,(01):39-40.
[3]闫文强,周金安,刘慧芳.抗-Mur1例及抗-S1例[J]临床血液学杂志,2011,24(2):122-123.
[4]刘达庄,朱自严,Byrne P,等.低频率抗体抗-“Mur”引起的溶血性输血反应[J]中国输血杂志,2000,(01):8-10.
[5]刘忠,孙爱农,谭方圆,等.“Mur”血型分子诊断方法的建立与应用[J].中国输血杂志,2009,(10):793-795.
[6]邓诗桢,严康峰,谢敬文.番禺地区“Mur”抗原与抗-“Mur”频率调查[J].中国输血杂志,2010,23(3):218.
Clinical significance of unexpected antibody screening with detection of anti-Mur antibody.
CHEN Miao-chan, CAI Kui.Blood Transfusion Department,the First People's Hospital of Foshan,Foshan 528000,Guangdong,CHINA
ObjectiveTo investigate the clinical significance of unexpected antibody screening with detection of anti-Mur antibody by preparation of Mur antigen,for the purpose of selecting the appropriate blood for clinical transfusion,preventing the transfusion reaction and assuring the safety and efficiency in clinical transfusion.MethodsFirst,with panel cells containing Mur antigen,we screened out anti-Mur antibody.Then,we prepared the Mur antigen as new sieve cells used in unexpected blood screening before transfusion.ResultsTotally 68(0.83%) samples were positive among 8 200 samples by antibody screen test.Of the 68 cases,33 cases had a history of repeated transfusion,26 cases had a history of pregnancy and 38 cases had difficulty of blood matching because of the unexpected antibody.ConclusionScreening of unexpected antibody(anti-Mur)could effectively improve the safety of clinical transfusion,which is of great clinical value.
Screening;Unexpected antibody;Mur antigen;anti-Mur antibody
R446.11
A
1003—6350(2014)21—3186—03
10.3969/j.issn.1003-6350.2014.21.1249
2014-02-28)
陈妙婵。E-mail:cmchan1048@163.com